뇨 중의 아크릴아마이드 (AA)와 대사체인 glycidamide (GA), N-Acetyl-S-(2-carbamoylethyl)-L-cysteine (AAMA)의 검출을 목적으로 신속하고 간편한 LC-MS/MS 분석법을 개발하였다. 뇨 시료의 전처리는 Isolute ENV+ cartridge를 이용한 고체상 추출법을 사용하였다. 고정상으로 Kinetex HILIC 칼럼 (2.1 x 100 mm, 2.6 μm)을 사용하고 이동상으로 아세토니트릴과 0.2% 포름산 수용액의 혼합액 (96/4, v/v)을 사용하여 등용리 조건으로 분석하였다. 유속은 100 μL/min로 유지시켰으며 6분 이내 분석이 완료되었다. 아크릴아마이드와 대사체의 검출은 전기 분무 이온화 방식 양이온모드에서 이루어졌으며 각각의 동위원소 치환체를 내부표준물질로 사용하여 정량하였다. AA는 m/z 71.9 → 54.6, GA는 m/z 87.9 → 44.3 그리고 AAMA는 m/z 235 → 103.9로 MRM 조건을 설정하여 분석의 선택성을 높였다. 개발된 분석법은 직선성, 정량한계, 정확성, 정밀성, 회수율 시험을 통하여 검증되었다. AA는 1-300 ng/mL, GA는 50-2500 ng/mL 그리고 AAMA는 10-2000 ng/mL의 농도 범위에서 검량선의 상관계수 (R²)값이 0.995 이상의 양호한 직선성을 나타내었다. 일내 및 일간 정확성과 정밀성도 각각 15% 이내로 얻어졌다. 검증된 분석법을 이용하여 보편적인 사람을 대상으로 하여 아크릴아마이드의 체내 노출을 평가하였다. 본 연구에서 확립된 시험법은 뇨 중의 아크릴아마이드와 대사체의 정확한 정량 및 고 효율 분석에 매우 유용할 것이라 사료된다.