표제지
목차
I. 서론 10
II. 재료 및 방법 15
1. 실험 재료 15
1) 재료 15
2) 시약 및 실험기기 15
2. 실험 방법 17
1) 방풍 추출 17
2) 방풍 추출물의 총 폴리페놀 함량 측정 19
3) 방풍 추출물의 in vitro에서 항산화 활성 측정 20
4) 방풍 추출물의 조골세포 활성 검색 22
5) 방풍 추출물의 파골세포 활성 측정 28
6) 동물 실험 30
3. 통계 처리 37
III. 결과 및 고찰 38
1. 방풍 추출의 최적 추출 조건의 확립 38
2. 방풍 추출물의 총 폴리페놀(Polyphenols) 함량 40
3. 방풍 추출물의 항산화 활성 42
1) 1,1-Diphenyl-2-picrylgydrazyl (DPPH) radical 소거능 42
2) Superoxide dismutase (SOD) 유사활성 45
5. 방풍 추출물이 조골세포의 활성에 미치는 영향 47
1) MC3T3-E1 세포의 성장률 47
2) 방풍 추출물이 조골세포의 증식 유도에 미치는 영향 49
3) 방풍 추출물이 alkaline phosphatase (ALP) 활성에 미치는 영향 51
4) 방풍 추출물이 조골세포의 collagen 합성에 미치는 영향 53
5) 방풍 추출물의 골 석회화 형성에 미치는 영향 55
6) Western blot 결과 58
6. 방풍 추출물이 파골세포의 활성억제에 미치는 영향 60
1) 방풍 추출물의 파골세포 성장억제 효과 60
2) 방풍 추출물이 파골세포의 TRAP 활성에 미치는 영향 62
7. 방풍 추출물이 갱년기 장애를 유발한 흰 쥐의 지질 변화에 미치는 영향 64
1) 실험동물의 체중 증가량, 식이효율 및 장기중량 65
2) 방풍 추출물의 혈청 효소활성에 미치는 영향 68
3) 혈청의 지질 조성에 미치는 영향 70
4) 혈소판 응집 억제에 미치는 영향 72
8. 방풍 추출물의 난소절제 흰 쥐의 골 형성에 미치는 영향 75
1) 방풍 추출물이 골 조직중의 collagen 함량에 미치는 영향 75
2) 방풍 추출물이 혈청 중의 alkaline phosphatase 활성에 미치는 영향 77
IV. 요약 79
V. 참고문헌 82
ABSTRACT 95
Table 1. Extraction conditions of Ledebouriella seseloides 18
Table 2. Experimental design of animals 31
Table 3. Yields (%) of hot water and ethanol extracts of Ledebouriella seseloides 39
Table 4. Total polyphenol concentration of Ledebouriella seseloides 41
Table 5. Body weight gain, food intake and food efficiency ratio of rats supplemented Ledebouriella seseloides ethanol extracts for 7 weeks 57 66
Table 6. Effect of Ledebouriella seseloides on weight of liver, heart, lung, spleen, adrenal, kidney and uterus in ovariectomized rats 67
Table 7. Effect of Ledebouriella seseloides ethanol extracts on serum glutamic oxaloacetic transaminase (GOT), glutamic pyruvic transaminase(GPT) activities in ovariectomized rats 69
Table 8. Effect of Ledebouriella seseloides ethanol extracts on serum, total-cholesterol, trigylceride, high density lipoprotein cholesterol and low density lipoprotein cholesterol in ovariectomized rats 71
Table 9. Effect of Ledebouriella seseloides ethanol extracts against collagen induced platelet aggregation 74
Table 10. Effect of Ledebouriella seseloides ethanol extract on collagen content in bone of ovariectomized rats 76
Table 11. Effect of Ledebouriella seseloides ethanol extract on serum alkaline phosphatase activity in ovariectomized rats 78
Fig 1. Determination of hydroxyproline 36
Fig 2. DPPH radical-scavenging activity of Ledebouriella seseloides extracts 44
Fig 3. SOD-like activity of Ledebouriella seseloides extracts 46
Fig 4. Growth of MC3T3-E1 osteoblastic cell 48
Fig 5. Effects of hot water and ethanol extracts of Ledebouriella seseloides on the proliferation of the MC3T3-E1 osteoblastic cells by theMTT assay 50
Fig 6. Effects of hot water and ethanol extracts of Ledebouriella seseloides on the alkaline phosphatase activities of the MC3T3-E1 osteoblastic cell during the differentiation 52
Fig 7. Effects of hot water and ethanol extracts of Ledebouriella seseloides on collagen content in MC3T3-E1 osteoblastic cells 54
Fig 8. Histochemical changes of hot water and ethanol extracts of osteoblastic Ledebouriella seseloides on the mineralization of MC3T3-E1 cell 56
Fig 9. Histochemical changes of hot water and ethanol extracts of Ledebouriella seseloides on the mineralization of MC3T3-E1 osteoblastic cell 57
Fig 10. Effect of LW on the protein expression of OPN, BMP2 and ALP in MC3T3-E1 cells 59
Fig 11. Effects of hot water and ethanol extracts of Ledebouriella seseloides on the viabillity of RAW 264.7 osteoclastic cell 61
Fig 12. TRAP activity of hot water and ethanol extracts of Ledebouriella seseloides on osteoclast diffentiation of RAW 264.7 cells 63