표제지
국문초록
목차
제1장 서론 11
제2장 연구 내용 및 방법 15
제1절 실험재료 15
1. 재료 15
2. 시약 및 실험기기 15
1) 시약 15
2) 실험기기 16
제2절 실험방법 17
1. 고리매 시료 제조 17
2. 고리매 추출물의 항산화 활성 측정 18
1) 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical 소거능 측정 18
2) Superoxide dismutase (SOD) 유사활성 측정 19
3) 총 폴리페놀 함량 측정 19
3. 고리매 추출물의 조골세포 활성 검색 20
1) 세포배양 및 분화 20
2) 세포증식 유도 검색 20
3) Alizarin-Red 염색법에 의한 골석회화 형성도 측정 21
4) Alkaline phosphatease (ALP) 활성 검색 21
5) Western blot 분석 22
4. 고리매 추출물의 파골세포 활성 검색 23
1) 세포배양 및 분화 23
2) 세포증식 유도 검색 23
3) TRAP 활성 측정 24
4) Western blot 분석 24
5. 동물 실험 25
1) 실험동물 사육 및 관리 25
2) 난소절제시술을 이용한 폐경 및 골다공증 유도모델 제작 27
3) 혈액 채취 및 장기적출 27
4) 혈청 중의 지질 및 효소 활성 분석 28
5) 항 혈전 활성 측정 29
6) 골형성지표 측정 30
7) 골용해지표 측정 30
8) 결합조직 중의 collagen 함량 측정 31
6. 통계 처리 33
제3장 연구 결과 및 고찰 34
제1절 고리매 추출물의 수득율 34
1. 수득율 34
제2절 고리매 추출물의 항산화 활성 35
1. 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical 소거능 35
2. Superoxide dismutase (SOD) 유사활성능 37
3. 총 폴리페놀 함량 39
제3절 고리매 추출물이 조골세포의 활성에 미치는 영향 41
1. 조골세포의 증식 유도 41
2. 고리매 추출물의 ALP 활성 효과 43
3. 고리매 추출물이 골석회화에 미치는 영향 45
4. Western blotting을 이용한 단백질 발현 48
제4절 고리매 추출물이 파골세포의 활성에 미치는 영향 50
1. 파골세포의 성장억제 효과 50
2. 파골세포의 TRAP 활성에 미치는 영향 52
3. Western blotting을 이용한 단백질 발현 54
제5절 고리매 추출물이 갱년기 장애 유발한 흰 쥐의 골대사 및 지질 변화에 미치는 영향 56
1. 실험동물의 체중 증가량, 식이효율 및 장기중량 56
1) 실험동물의 체중 증가량 및 식이효율 56
2) 장기무게 58
2. 고리매 추출물이 혈청 GPT 및 GOT 활성에 미치는 영향 60
3. 고리매 추출물의 항 혈전 활성 62
1) 혈청의 지질 조성에 미치는 영향 62
2) 혈소판 응집에 미치는 영향 65
4. 고리매 추출물이 골대사 지표물질에 미치는 영향 68
1) 골형성지표 68
2) 골용해지표 70
5. 고리매 추출물이 골 조직의 collagen 합성에 미치는 영향 72
제4장 결론 74
참고문헌 76
Abstract 88
Table 1. Extraction conditions of Scytosiphon lomentaria 17
Table 2. Experimental design of animals 26
Table 3. Yield of water and ethanol extracts of Scytosiphon lomentaria 34
Table 4. Total polyphenol concentration of water and ethanol extracts of scytosiphon lomentaria 40
Table 5. Body weight gain, food intake and food efficiency ratio of rats supplemented Scytosiphon lomentaria water extracts for 4 weeks 57
Table 6. Effects of Scytosiphon lomentaria on weight of liver, heart, lung, spleen, adrenal, kidney and uterus in ovariectomized rats 59
Table 7. Effects of scytosiphon lomentaria water extract on serum glutamic oxaloacetic transaminase (GOT), glutamic pyruvic transaminase(GPT) in ovariectomized rats 61
Table 8. Effect of scytosiphon lomentaria extracts on serum total-cholesterol, trigyceride, high density lipoprotein cholesterol and low density lipoprotein cholesterol in ovariectomized rats 64
Table 9. Effect of scytosiphon lomentaria extracts against collgen induced platelet aggregation 67
Table 10. Biochemical values of serum indicators of the bone metabolism of rats 71
Table 11. Effect of scytosiphon lomentaria extracts on collagen content in cartilge, bone and skin of ovariectomized rats 73
Fig. 1. Determination of hydroxyproline. 32
Fig. 2. Scavenging activity of DPPH radicals of scytosiphon lomentaria extracts. 36
Fig. 3. Superoxide dismutase (SOD)-like activity of scytosiphon lomentaria extracts. 38
Fig. 4. Effect of water and ethanol extracts of scytosiphon lomentaria on proliferation of the MC3T3-E1 osteoblastic cells as assessed by the MTT assay. 42
Fig. 5. Effect of the water and ethanol extracts of scytosiphon lomentaria on alkaline phosphatase (ALP) activity of MC3T3-E1 osteoblastic cells during differentiation. 44
Fig. 6. Alizarin Red S Staining of MC3T3-E1 cells for calcification after treatment with the ethanol and water extracts of scytosiphon lomentaria for 14 days. 46
Fig. 7. Effect of the water and ethanol extracts of scytosiphon lomentaria on mineralization of MC3T3-E1 osteoblastic cells. 47
Fig. 8. Expression of ALP and BMP2 during differentiation of MC3T3-E1 osteoblastic cells treated with the scytosiphon lomentaria water extract. β-actin was used as the internal control. 49
Fig. 9. Effect of water and ethanol extracts of scytosiphon lomentaria on pro-liferationof the RAW 264.7 osteoclastic cells as assessed by the MTT assay. 51
Fig. 10. Effect of the water and ethanol extracts of scytosiphon lomentaria on TRAP activity of RAW 264.7 osteoclastic cells during differentiation. 53
Fig. 11. Expression of TRAP and RANKL during differentiation of RAW 264.7 osteoclastic cells treated with the scytosiphon lomentaria water extract. β-actin was used as the internal control. 55