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제출문
요약문
Summary
칼라
목차
제1장 서론 27
제2장 연구추진방법 31
제1절 실험재료 31
제2절 실험방법 31
1. TTP 환자 혈장의 수집 31
2. 세척 혈소판 수용액의 준비 32
3. 혈소판 응집반응의 측정 32
4. SDS-polyacrylamide 겔 전기영동 33
5. 단백질 농도의 측정 33
6. 황산 암모니움 침전 분리 34
7. DEAE-Sephacel 크로마토그라피 34
8. Con A-Sepharose 크로마토그라피 35
9. Superose 12 겔-여과 크로마토그라피 36
제3장 연구결과 및 고찰 37
제1절 혈소판 응집 단백질의 분리 37
제2절 혈소판 응집 단백질의 특성 비교[원문불량;p.42~44,46] 43
제4장 결론 52
제5장 참고문헌 55
제6장 위탁과제 : 펩타이드 Library로 부터 CETP Inhibitor의 탐색 61
SUMMARY 65
목차 63
제1장 서론 67
제2장 실험 및 방법 71
1. 시약 71
2. Transfer vector 구성 71
3. 세포배양 및 virus 처리 72
4. 재조합 virus 생성 74
5. Southern blot analysis 75
6. Northern blot analysis 76
7. Western blot analysis 76
8. CETP assay 77
9. Affinity chromatography 77
10. 혈장으로부터 Apolipoprotein의 분리 78
11. Apo-AI 및 apo-B 의 확인 79
12. 단백질 정량과 분자량 결정 79
13. 지단백질의 재조합과 방사성 동위원소 표지 79
14. Artificial Substrate System에서의 CETP Assay 81
제3장 결과 및 고찰 83
1. 재조합 vector의 구성[원문불량;p.83] 83
2. 재조합 virus 생성 및 선별 86
3. 재조합 virus의 DNA 분석 87
4. 전사단계의 확인[원문불량;p.87] 87
5. GST/CETP fusion 단백질 생산[원문불량;p.89] 90
6. GST/CETP fusion 단백질의 활성 측정 92
7. CETP 순수분리 92
8. Ape-B 와 Apo-AI 단백질의 대량 분리 97
9/10. Artificial Substrate System 에서의 CETP Assay 확립 101
제4장 결론 107
제5장 참고문헌 109
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Contents
Chapter I. Introduction 27
Chapter II. Materials and Methods 31
(1) Materials 31
(2) Methods 31
1. Collection of plasma from TTP patient 31
2. Preparation of platelet solution 32
3. Assay of platelet agglutinating activity 32
4. SDS-polyacryIamide gel electrophoresis 33
5. Measurement of protein concentration 33
6. 50% ammoniumsulfate precipitation(precifitaton) 34
7. DEAE-Sephacel column chromatography 34
8. Con A-Sepharose column chromatography 35
9. Superose 12 gel filtration chromatography 36
Chapter III. Results and Discussion 37
(1) Purification of PAP 37
(2) Characterization of PAP[원문불량;p.42~44,46] 43
Chapter IV. Conclusion 52
Chapter V. References 55
Chapter VI. Subproject[원문불량;p.83] 61