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SUMMARY
CONTENTS
목차
제1장 연구개발과제의 개요 30
제1절 연구개발의 목적과 필요성 30
제2절 연구개발의 범위 35
제2장 국내외 기술개발 현황 36
제3장 연구개발수행 내용 및 결과 37
제1절 우슬의 항관절염 예방 및 치료제로서의 특성 조사, 물질 분리 및 생리기능성 연구 37
1. 생약 성분(우슬)에 대한 특성 조사 37
2. 우슬의 성분 추출 및 분석 39
가. 우슬의 추출용매 선정 39
나. 추출조건 확정 40
다. 분획에 의한 성분 분리 40
1) 분획의 순서 40
2) Hexane층 41
3) Chloroform층 - 3차 42
4) Ethyl acetate층 - 7차 42
5) Butanol층 - 2차 42
라. 우슬의 부위에 따른 성분함량 비교 43
3. 우슬의 기능성 물질 분리 44
가. 재료 및 방법 44
1) 시약 및 재료 44
2) 기기와 검체 44
3) 확인시험 44
4) 건조감량과 회분시험 44
5) 산불용성 회분시험 45
6) 20-Hydroxyecdysone 추출 및 정제 45
7) HPLC의 분석조건 및 검량선 작성 46
8) 검액의 조제 및 20-Hydroxyecdysone의 함량 48
나. 결과 및 고찰 49
1) 확인시험 및 건조함량 49
2) 회분시험 및 산불용성 회분시험 49
3) 20-Hydroxyecdysone 추출 및 정제 49
4) 20-Hydroxyecdysone의 검량선 49
5) 20-Hydroxyecdysone의 함량 50
4. 추출차의 제조 52
5. 우슬의 연골 세포 독성 실험 및 대사활성 기능 실험 55
가. 재료 및 방법 55
1) 시약 및 재료 55
2) 연골세포 분리 및 배양 56
3) 관절연골세포의 자가고사 유도 57
4) XTT를 이용한 연골세포의 증식 변화 57
나. 결과 및 고찰 58
1) 우슬 농도에 따른 증식률 58
2) 우슬 처리 후 배양시간에 따른 증식률 58
3) 과산화수소수 농도에 따른 세포 증식률 60
4) 과산화수소수 처리 후 배양시간에 따른 세포 증식률 60
5) 우슬이 prostaglandin E₂에 미치는 영향 62
제2절 우슬의 퇴행성 관절염과 류마티스 관절염에 우슬의 효과 63
1. 퇴행성 관절염에서 우슬이 미치는 영향 63
가. 서설 63
나. 재료 및 방법 64
1) 실험동물 64
2) 퇴행성 골관절염 모델 65
3) 실험구성도 65
4) 우슬 크림 제조 66
5) 조직학적 검사 67
(1) Hematoxylin & Eosin (H & E) 염색 68
(2) Safranin O-fast green 염색 68
(3) 조직학적 평가 68
다. 결과 및 고찰 70
1) 퇴행성 골관절염 유발 시 병리조직학적 평가 70
2) 치료 종료 후 병리조직학적 소견 72
3) 치료 종료 후 병리조직학적 평가 74
2. 류마티스 관절염에서 우슬이 미치는 영향 79
가. 서설 79
나. 재료 및 방법 82
1) 실험동물 82
2) 류마티스 관절염 모델 83
3) 우슬추출물 경피투과제의 제조 및 연고도포방법 83
4) 행동학적인 관찰 평가 83
(1) 족 부종의 체적변화 84
(2) 관절염 지수의 임상적 평가 84
(3) 관절염의 배측굴곡과 저측굴곡 통증 지수 84
(4) 기계적 이질통 측정(Measurement of mechanical allodynia) 85
5) 조직학적 검사(Histological assessment) 86
(1) 조직 표본제작 86
(2) 류마티스 관절염 유발 전·후 슬관절의 병리조직학적인 관찰 86
(3) 실험 종료 후 슬관절의 병리조직학적인 관찰 86
6) COX-2 단백질에 대한 면역조직화학 염색 87
7) 혈청에서의 Prostaglandin E₂의 농도 측정 87
다. 결과 89
1) 류마티스 관절염의 육안 및 조직학적 유발 소견 89
2) 행동학적인 관찰 평가 89
(1) 족 부종의 체적변화 89
(2) 관절염 지수의 임상적 평가 91
(3) 관절염의 배측굴곡 통증 지수 92
(4) 관절염의 저측굴곡 통증 지수 94
(5) 기계적 이질통의 변화 95
3) 조직화학적 평가 96
(1) 슬관절의 Safranin O-fast green 염색을 통한 조직화학적 반응 96
(2) 슬관절의 Safranin O-fast green 염색을 통한 조직학적인 지수 평가 97
(3) 슬관절의 COX-2 단백질의 발현 면역조직화학적 반응 98
4) 혈청에서의 Prostaglandin E₂(PGE₂)의 농도 변화 99
5) 혈청에서의 염증성 사이토카인의 농도 변화 100
6) 방사선학적 소견 102
라. 고찰 104
제3절 우슬 함유 경피 흡수 제제 제조 108
1. 경피흡수제 108
2. 경구투여제 114
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 116
제1절 연구개발 목표의 달성도 116
제2절 관련 분야에의 기여도 117
제5장 연구개발결과의 활용계획 118
제1절 활용방안 118
제2절 산업화 추진방안 120
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 121
제7장 참고문헌 123