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논문명/저자명
형광 에세이를 활용한 효소 활성 측정에 관한 연구 = Studies on the detection of enzyme activity utilizing the fluorescence assay / 김세연 인기도
발행사항
성남 : 가천대학교 대학원, 2017.2
청구기호
TM 620.5 -17-127
형태사항
47 p. ; 26 cm
자료실
전자자료
제어번호
KDMT1201712407
주기사항
학위논문(석사) -- 가천대학교 대학원, 바이오나노학과 나노화학전공, 2017.2. 지도교수: 강종백
원문

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표제지

국문초록

목차

제1편 구아닌-사중구조를 이용한 DNA중합효소의 형광 에세이 10

제1장 서론 10

제1절 Klenow Fragment exo- (KF-)(이미지참조) 10

제2절 구아닌-사중구조 (G-quadruplex structure) 12

제3절 KF- 활성 측정을 위한 G-quadruplex에 선택적인 염료(이미지참조) 13

제2장 실험 방법 15

제1절 재료 15

제2절 DNA 중합 반응 15

제3절 형광 측정 16

제4절 KF- 억제(이미지참조) 16

제3장 결과 및 토의 17

제1절 NMM이 부가된 G-quadruplex의 형광 에세이 개략도 및 형광 스펙트럼 17

제2절 다양한 형광 에세이 21

제3절 KF-의 농도에 따른 형광 에세이(이미지참조) 26

제4절 KF- 활성의 억제제, daidzein(이미지참조) 29

제4장 결론 31

제5장 참고문헌 32

제2편 분자 비콘(beacon)을 이용한 메틸기전달효소의 형광 에세이 36

제1장 서론 36

제2장 실험 방법 39

제1절 재료 39

제2절 분자 비콘 (MB) 준비 및 형광 세기 측정 39

제3절 MB 절단 반응 40

제4절 MB 메틸화 반응 40

제3장 결과 및 토의 41

제1절 MB의 형광 에세이 개략도 및 형광 스펙트럼 41

제2절 Acc II의 농도에 따른 형광 에세이 45

제3절 CG MTase의 농도와 시간에 따른 형광 에세이 48

제4절 MB에 대한 효소의 인공적인 영향 51

제4장 결론 53

제5장 참고문헌 54

ABSTRACT 57

제1편 구아닌-사중구조를 이용한 DNA 중합효소의 형광 에세이 19

그림. 1. NMM이 부가된 G-quadruplex의 형광 에세이 개략도. 19

그림. 2. KF- (25 U/mL)의 유무에 따른 형광 스펙트럼.(이미지참조) 20

그림. 3. NMM이 부가된 형광세기와 주형 DNA 농도 사이의 직접적인 상관... 23

그림. 4. KF- (25 U/mL)존재 하에, cDNA 농도에 따른 DNA 합성 의존도.(이미지참조) 24

그림. 5. KF- (25 U/mL)존재 하에, dNTP농도에 따른 DNA 합성 의존도.(이미지참조) 25

그림. 6. KF- (0-50 U/mL) 농도에 따른 형광 에세이.(이미지참조) 27

그림. 7. KF- (0-50 U/mL) 농도에 따른 형광 스펙트럼.(이미지참조) 28

그림. 8. KF- (25 U/mL)존재 하에, daidzein(0-150 μM) 농도에 따른...(이미지참조) 30

제2편 분자 비콘(beacon)을 이용한 메틸기전달효소의 형광 에세이 43

그림. 1. MB의 형광 에세이 개략도. 43

그림. 2. Acc II (20 U/mL)의 유무에 따른 형광 스펙트럼. 44

그림. 3. Acc II (5-40 U/mL) 농도에 따른 (F-F0)/F0) 그래프.(이미지참조) 46

그림. 4. Acc II (0-30 U/mL) 농도에 따른 형광 스펙트럼. 47

그림. 5. CG MTase (0-10 U/mL) 농도에 따른 (F-F0)/F0) 그래프.(이미지참조) 49

그림. 6. CG MTase의 시간에 따른 형광 에세이. 50

그림. 7. 절단 반응 관련 형광 세기에 대한 효소의 영향. 52

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