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Title Page
ABSTRACT
Contents
1. INTRODUCTION 8
2. MATERIALS AND METHODS 12
2.1. Drosophila stock and husbandry 12
2.2. Co-localization analysis 12
2.3. Quantitative RT-PCR 12
2.4. RNA and small RNA sequencing and analysis 13
3. RESULT 15
3.1. THO is required for piRNA biogenesis in Drosophila testis. 15
3.2. Distinct pathways are involved in THO-mediated piRNA biogenesis during spermatogenesis in Drosophila 15
3.3. Expression of most genes related to the spermatogenesis are dependent on THO 17
4. FIGURES and LEGENDS 20
5. Discussion 28
6. REFERENCES 30
7. 국문초록 33
Figure 1. Many piRNAs targeting transposons were defective in tho5 mutant testis. 21
Figure 2. piRNAs from dual strand clusters are mainly affected in thoc5 testis 22
Figure 3. Ping-pong cycle of most transposon mapped-piRNAs is normal in thoc5 testis. 23
Figure 4. RDC is required for only subset of THO-dependent piRNAs in Drosophila testis 24
Figure 5. Correlation of gene expression levels in testes between thoc5 and other meiotic... 25
Figure 6. Feature of genes differentially expressed only in thoc5 mutant compared to... 27
초록보기 더보기
THO 복합체는 잘 보존된 여러 개의 부속 단백질로 구성되어 있으며, mRNP를 핵 밖으로 이동시키는 과정에 필요하다고 알려졌다. 최근에 THO가 초파리 난소에서 전이인자를 억제하여 생식세포를 온전하게 유지하는 piRNA의 전구체를 싣는 것이 밝혔다. 초파리 난소에서 THO는 염색질 신호에 의해 양쪽으로 전사가 진행되는 piRNA에만 작용하여 piRNA의 전사 능률을 높인다. 난소뿐만 아니라 다른 기관에서도 같은 현상이 일어나는지 확인해보기 위해 RNA염기순서열과 실시간 정량적 연쇄 중합반응을 통하여 초파리 정소의 RNA 발현량을 확인하는 실험을 진행하였다. 그 결과 piRNA는 초파리 정소에서도 THO에 의존적이라는 것을 확인하였다. 또한, 정자생성 과정에 필요한 많은 mRNA가 THO에 영향을 받았다. THO가 줄어든 돌연변이와 생식능력이 없는 수컷 돌연변이를 비교해 본 결과, thoc5 돌연변이에서 특이적으로 발현되는 mRNA가 생식능력이 없는 aly, sa 돌변변이에서도 관찰되는 것을 확인되었다. 종합해보면, THO는 piRNA 생성과정과 정자 생성에 필요한 mRNA 발현에 중요한 역할을 하는 것을 알 수 있다.
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