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SUMMARY
칼라
목차
제1장 서론 20
제1절 연구의 목적과 범위 20
1. 연구의 목적 20
2. 범위 21
제2장 인삼원형질체 융합 및 선발에 관한 기초연구 23
제1절 서설 23
제2절 재료 및 방법 25
1. 인삼원형질체의 유리 25
2. 인삼원형질체의 융합 25
3. 융합원형질체의 생존율 25
4. 전기장의 세기가 따른 인삼원형질체의 융합률 조사 26
5. Buoyant density 차이에 의한 인삼원형질체의 분리 26
제3절 결과 및 고찰 27
1. 전기충격시 amplitude 와 fusion chamber내 field strength의 관계 27
2. 전기충격에 의한 인삼원형질체 융합 28
3. 나출 인삼 원형질체의 생존율에 미치는 electric field strength의 영향 29
4. 전기융합시 전기장의 세기가 인삼원형질체의 융합률에 미치는 효과 32
5. 인삼원형질체의 buoyant density 분포 36
제4절 결론 38
참고문헌 39
제3장 인삼의 체세포배 형성 42
제1절 서설 42
제2절 재료 및 방법 43
1. 인삼의 세포배양 43
가. 인삼 callus 유기 및 증식 43
나. 체세포배발생 및 이차대사산물 생성을 위한 배양조건 43
다. 배양시기별 세포배양 44
라. 체세포배발생 및 생장량 조사 44
2. 대사산물 함량분석 44
가. 단백질 및 유리아미노산 44
나. 지질, 지분, phenol 및 anthocyanin 44
다. Polyamine, ethylene 및 탄산가스 45
라. 환원물질과 과산화지질 46
제3절 결과 및 고찰 47
1. 인삼배양조직의 체세포배발생과 anthocyanin색소 발현 47
가. 체세포배 발생조건 : 47
나. Anthocyanin 생성조건 48
2. 배양시기별 물질대사의 변화 50
제4절 결론 60
참고문헌 62
제4장 인삼조직배양에 의한 saponin 생산 65
제1절 서설 65
제2절 재료 및 방법 67
1. 인삼세포 및 조직배양에 의한 사포닌의 생산 67
가. 사포닌의 생산에 미치는 식물호르몬의 영향 67
나. 액체배양 callus의 사포닌 분석 67
2. 기내배양에 의한 변리체의 선발 69
가. 공시재료 및 callus 유기 69
나. 현탁배양에 의한 인삼 단세포의 선발 70
다. Mutagen처리 인삼배양세포의 생장과 변리체 선발 70
라. T-DNA 도입에 의한 변리체의 선발 70
마. 황산 vanillin법을 이용한 사포닌 간이 분석방법 71
제3절 결과 및 고찰 72
1. 인삼세포 및 조직배양에 의한 사포닌의 생산 72
가. 인삼세포의 생장에 미치는 광 효과 72
나. 인삼세포의 생장에 미치는 IBA와 IAA의 효과 73
다. 배양 시기별 인삼세포의 생장량 74
라. 사포닌 생합성에 미치는 2, 4-D의 효과 75
마. 2, 4-D 대체식물생장조절물질에 의한 인삼세포의 경시적 사포닌 함량의 변화 76
2. 기내배양에 의한 변리체 선발 77
가. 인삼육성계통뿌리 callus의 생장 및 사포닌 함량 77
나. 단세포유래조직의 생장 및 사포닌함량에 미치는 세포밀도와 배양기간의 영향 79
다. Mutagen 처리 인삼 배양세포의 생장과 변리체 선발 81
라. T-DNA 도입에 의한 변리체 선발 83
제4절 결론 86
참고문헌 88
제5장 요약 91
[title page etc.]
Contents
Chapter I. Introduction 20
1. Objective of study 20
2. Contents and scope of study 21
Chapter II. The basic studies on the fusion and selection of fused ginseng protoplasts 23
1. Introduction 23
2. Materials and methods 25
1) Isolation of ginseng protoplast 25
2) Protoplast fusion of ginseng 25
3) Checking of viability of protoplast 25
4) Effect of electric field strength on fusion ratio of protoplast 26
5) Isolation of ginseng protoplast using the difference of buoyant density 26
3. Results and discussion 27
1) Relation of field strength between amplitude and fusion chamber by the electric pulse 27
2) Effect of the electric shock on protoplast fusion of ginseng 28
3) Effect of the electric field strength on the viabilities of ginseng protoplasts 29
4) Effect of the electric field strength on the fusion ratio of ginseng protoplast 32
5) Distribution of buoyant density of protoplast 36
4. Conclusion 38
5. Literature cited 39
Chapter III. Embryogenesis of ginseng 42
1. Introduction 42
2. Materials and methods 43
1) Callus culture of ginseng 43
① Induction and amplification of ginseng callus 43
② Determination of culture condition for embryogenesis and metabolite production 43
③ Cell culture on different culture period 44
④ Measurement of the ratio of embryogenesis and growth activity 44
2) Measurement of metabolite content 44
① Protein and free amino acids 44
② Lipid, starch, phenol, and anthocyanin 44
③ Polyamine, ethylene, and CO₂ 45
④ Oxidants and lipid peroxide 46
3. Results and discussion 47
1) Embryogenesis of ginseng cultured cell and expression of anthocyanin in embryogenic callus 47
① Condition of somatic embryogenesis 47
② Condition of anthocyanin production 48
2) Changes of metabolites during the culture 50
4. Conclusion 60
5. Literature cited 62
Chapter IV. Production of saponin by ginseng cell culture 65
1. Introduction 65
2. Materials and methods 67
1) Saponin production by ginseng cell and tissue culture 67
① Effect of plant growth regulator on saponin production 67
② Analysis of saponin in liquid cultured callus 67
2) Mutant selection by in vitro culture 69
① Materials and induction of callus 69
② Selection of ginseng single cell by liquid culture 70
③ Culture and selection of mutagen treated cells 70
④ Mutant selection by T-DNA transformation 70
⑤ Simple analysis of saponin by H₂SO₄-vanillin method 71
3. Results and discussion 72
1) Saponin production by ginseng cell and tissue culture 72
① Effect of the light on callus growth 72
② Effect of the IBA and IAA on callus growth 73
③ Growth patterns of ginseng callus during culture period 74
④ Effect of the concentration of 2, 4-D on saponin production 75
⑤ The variation of saponin content by the 2, 4-D analog compounds 76
2) Selection of mutants by in vitro culture 77
① Growth and saponin content of ginseng inbred line calli 77
② Selection and growth of single cell originated callus, and effect of cell density and culture period on saponin production 79
③ Selection of mutants by mutagen treatment 81
④ Selection of mutants by T-DNA insertion 83
4. Conclusion 86
5. Literature cited 88
Chapter V. Summary 91
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