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SUMMARY
칼라
목차
제1장 서론 15
제2장 재료 및 방법 23
제3장 결과 및 고찰 31
제1절 인공 유전자의 합성 및 발현 검정 31
가. 필수 아미노산을 code 하는 인공 유전자의 E. coli에서의 발현검정 31
ㄱ. Repeating unit (Met-Trp-Lys-Met-Trp-Asp) 의 확장 32
ㄴ. Unfused protein 으로서 인공 유전자의 발현 36
나. 담배에서 필수아미노산을 code하는 인공유전자의 GUS fusion 을 이용한 transient expression 39
ㄱ. GUS fusion vector의 제조 40
ㄴ. 인공유전자와 GUS fusion 플라스미드의 transient expression 43
다. Tryptophan과 lysine-rich polypeptide를 code하는 인공 유전자의 합성 및 E. coli 에서의 발현 45
ㄱ. 화학 합성 DNA의 design 45
ㄴ. 인공 유전자의 합성 및 cloning 46
ㄷ. Repeating unit (Glu-Trp-Lys)의 확장 46
ㄹ. Fusion protein으로서 인공 단백질의 발현 46
ㅁ. Unfused protein 으로서 인공 유전자의 발현 50
ㅂ. 발현된 인공 단백질의 분석 53
제2절 재조합 유전자 제조 및 담배의 형질 전환 55
가. 재조합 유전자 제조 55
ㄱ. pG10G 재조합 (Gy2 promoter + 10kZ+ + Gy2 terminator) 56
ㄴ. pCa10G 재조합 (CaMV promoter + 10kz + Gy2 terminator) 60
ㄷ. pCag10G 재조합 (CaMV promoter + Gy2 leader + 10kZ + Gy2 terminator) 63
나. 담배의 형질 전환 및 재분화 66
ㄱ. 담배 세포의 형질 전환 및 재분화 66
ㄴ. Genomic Southern 분석[원문불량;p.65] 66
제3절 대두의 형질 전환 71
가. 대두의 자엽절에서 BA에 의한 신초 형성 71
나. 대두 자엽절의 형질전환 72
제4장 참고문헌 80
[title page etc.]
Contents
Chapter I. Introduction 15
Chapter II. Materials and Methods 23
Chapter III. Results and Discussion 31
1. Synthesis of artificial genes 31
1) Expression of a synthetic gene in E.coli 31
a. Expansion of a repeating unit (Met-Trp-Lys-Met-Trp-Asp) 32
b. Expression of artificial gene as an unfused protein 36
2) Transient expression of a synthetic gene in tobacco by GUS fusion 39
a. Synthesis of GUS fusion vector 40
b. Transient expression of a synthetic gene and GUS fusion protein 43
3) Synthesis of a synthetic gene encoding tryptophan and lysine-rich polypeptide and its expression 45
a. Design of chemically synthesized DNA 45
b. Synthesis of a synthetic gene 46
c. Expansion of a repeating unit (Gly-Trp-Lys) 46
d. Expression of a synthetic protein by fusion protein 46
e. Expression of a synthetic gene as an unfused protein 50
f. Assay of synthetic protein expressed 53
2. Synthesis of chimeric genes and transformation into tobacco 55
1) Synthesis of chimeric gene 55
a. Construction of pG10G (Gy2 promoter + 10kZ + Gy2 terminator) 56
b. Construction of pCa10G (CaMV promoter + 10kZ + Gy2 terminator) 60
c. Construction of pCag10G (CaMV promoter + Gy2 leader + 10kZ + Gy2 terminator) 63
2) Transformation and regeneration of tobacco 66
a. Transformation and regeneration of tobacco cell 66
b. Genomic Southern blot analysis[원문불량;p.65] 66
3. Transformation of soybean 71
1) Shoot induction from soybean cotyledonary node by BA 71
2) Transformation in soybean cotyledonary node 72
Chapter IV. References 80
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