[표제지 등]

제출문

요약문

SUMMARY

연구과제 및 수행연구자

List of Table

List of Figure

칼라

[목차]

총괄과제 동식물생체방어기술 9

목차 10

1. 서론 15

제1장 CMV 순수분리 16

제2장 CMV의 혈청학적 진단법개발 16

제3장 CMV RNA 분리정제 및 cDNA 합성 17

제4장 cDNA를 이용한 CMV 유전자진단 17

제5장 CMV 저항성품종 선발및 검정 18

제6장 원형질체 배양및 세포단위에서의 Virus 연구 19

2. 연구방법 20

제1장 CMV 순수분리 20

제1절 바이러스의 분리 20

제2절 바이러스의 동정 20

제3절 CMV 순화 20

제4절 CMV 특성조사 20

제2장 CMV의 혈청학적 진단법개발 21

제1절 CMV-As 항혈청제조 21

제2절 혈청학적 진단법개발 21

1. Agarose gel double diffusion test 21

2. ELISA test 21

3. ISEM test 22

제3장 CMV RNA 분리정제 및 cDNA 합성 23

제1절 CMV-As RNA 분리정제 23

제2절 cDNA 합성및 클로닝 23

1. CMV 전 genome RNA에 대한 cDNA 합성및 클로닝 23

2. CMV-As satellite RNA에 대한 cDNA 합성및 클로닝 24

제4장 cDNA를 이용한 CMV 유전자진단 25

제1절 유전자진단용 cDNA probe 제작 25

제2절 cDNA hybridization 25

제5장 CMV 저항성품종 선발및 검정 26

제1절 CMV 저항성품종 선발을 위한 품종선발 26

제2절 ELISA-test를 이용한 CMV 저항성품종 선발및 검정 26

1. 공시품종 26

2. 공시 virus 계통및 접종법 26

3. CMV 저항성 품종선발을 위한 ELISA-test법 27

제3절 바이러스 내병성품종육성연구 27

1. 품종간 품질비교 27

2. 내병성계통및 품종간 교잡연구 27

제6장 원형질체 배양및 세포단위에서의 Virus 연구 29

제1절 오이와 고추의 callus 유기 29

제2절 고추의 callus 배양에 미치는 NAA, 2, 4-D 및 BAP의 영향 29

제3절 오이의 원형질체 나출 30

제4절 고추원형질체 나출수율에 미치는 cellulase와 macerozyme의 영향 31

제5절 배추의 원형질체 나출 32

제6절 cDNA를 이용한 식물체내 antisense RNA의 발현 33

3. 결과 37

제1장 CMV 순수분리 37

제1절 바이러스의 분리 37

제2절 바이러스 동정 37

제3절 CMV-As 순화 38

제4절 CMV 특성조사 39

제2장 CMV의 혈청학적 진단법개발 40

제1절 CMV-As 항혈청제조 40

제2절 혈청학적 진단법개발 40

제3장 CMV RNA 분리정제및 cDNA 합성 42

제1절 CMV-As RNA 분리정제 42

제2절 cDNA 합성및 클로닝 42

제4장 cDNA를 이용한 CMV 유전자진단 43

제1절 유전자진단용 cDNA probe 제작 43

제2절 cDNA hybridization 43

제5장 CMV 저항성품종 선발및 검정 44

제1절 CMV 저항성 품종선발을 위한 품종수집 44

제2절 ELISA-test를 이용한 CMV 저항성 품종선발및 검정 44

제3절 바이러스 내병성 품종육성연구 45

제6장 원형질체 배양및 세포단위에서의 Virus 연구 47

제1절 오이와 고추의 callus 유기 47

제2절 고추의 callus 배양에 미치는 NAA, 2, 4-D 및 BAP의 영향 47

제3절 오이의 원형질체 나출 48

제4절 고추원형질체 나출수율에 미치는 cellulase와 macerozyme의 영향 49

제5절 배추의 원형질체 나출 50

제6절 cDNA의 5',3' 말단 염기서열결정 50

4. 고찰 51

제1장 CMV 순수분리 51

제2장 CMV의 혈청학적 진단법개발 53

제3장 CMV RNA 분리정제및 cDNA 합성 54

제4장 cDNA를 이용한 CMV 유전자진단 55

제5장 CMV 저항성품종 선발및 검정 56

제6장 원형질체 배양및 세포단위에서의 Virus 연구 59

5. 결론 61

제1장 CMV 순수분리 61

제2장 CMV의 혈청학적 진단법개발 62

제3장 CMV RNA 분리정제및 cDNA 합성 63

제4장 cDNA를 이용한 CMV 유전자진단 64

제5장 CMV 저항성품종 선발및 검정 65

제6장 원형질체 배양및 세포단위에서의 Virus 연구 66

6. 참고문헌 67

제1세부과제 CMV의 혈청학적 진단과 형광물질을 결합한 cDNA 합성 및 진단법 개발 73

목차 74

1. 서론 84

제1장 CMV 분리및 특성 87

제2장 CMV-As 순화 87

제3장 CMV-As coat protein및 RNA 특성 88

제4장 CMV-As 항혈청 제조 88

제5장 CMV의 진단 88

2. 연구방법 89

제1장 공시바이러스및 특성 89

제1절 공시바이러스 89

제2절 CMV-As strain의 일반적 특성 90

1. 물리적 특성 90

2. 전자현미경 검정 90

3. 혈청학적 검정 91

제2장 CMV-As 순화 92

제1절 CMV-As multiplication 92

제2절 CMV-As 순화 92

1. CMV-As 부분순화 92

2. Sucrose density-gradient centrifugation 93

3. U.V scanning 및 E.M 관찰 93

제3장 CMV-As coat protein및 RNA의 특성 95

제1절 CMV-As coat protein의 특성 95

1. 시료제조 95

2. 전기영동(SDS-PAGE) 95

3. 발색및 분자량조사 95

제2절 CMV-As RNA의 분리정제및 특성 96

1. CMV-As RNA의 분리정제 96

2. Agarose gel electrophoresis 97

제4장 CMV-As 항혈청 제조 98

제1절 Immunization 98

1. Antigen and Immunization 98

제2절 항혈청 분리및 역가검정 98

1. 항혈청 분리 98

2. 역가검정 98

제5장 CMV의 진단 99

제1절 혈청학적 방법에 의한 CMV진단 99

1. Ouchterlony agarose gel double diffusion test 99

2. ELISA(Enzyme-liked immunosorbent assay) test 99

가. γ-globulin 분리 99

나. Enzyme-lahelled antibody 제조 100

다. 시료제조 100

라. Optimum concentration 조사 101

마. ELISA test에 의한 CMV 진단 101

1) ELISA test 101

가) DAS-ELISA test 101

나)／나. Dot ELISA test 101

3. Western blot analysis 103

가. SDS-PAGE 103

나. Western Blot 103

4. 면역전자현미경법(I.S.E.M)에 의한 CMV 진단 104

가. 항혈청및 시료제조 104

나. I.S.E.M test(제목없음) 104

1) Trapping 104

2) Decoration 105

3) Trapping and decoration 105

4) E.M. 관찰및 photography 105

제2절 cDNA Hybridization에 의한 CMV진단 107

1. cDNA및 Plasmid DNA 형질전환 107

가. cDNA및 plasmid전 DNA 107

나. Escherichia coli 형질전환(Transfomation) 108

1) Competent cell 제조 108

2) Escherichia coli 형질전환(Transfomation) 108

다. 형질전환체의 선별 108

1) Alkaline lysis에 의한 plasmid DNA 분리 108

2) 제한효소처리및 Agarose gel electrophoresis 109

2. Restriction map 작성 109

가. Plasmid DNA 분리정제 109

나. 제한효소처리및 Agarose gel electrophoresis 110

3. cDNA probe 제조 111

가. cDNA 대량분리 111

1) 제한효소처리및 전기영동 111

2) DNA 추출및 정제 111

나. Biotinylated cDNA probe제조 111

1) Nick translation 111

2) Spun column chromatography 112

다. 32P(이미지참조)-labelled cDNA probe 제조 112

4. cDNA Hybridization에 의한 CMV 진단 114

가. 시료제조 114

나. Slot blotting 115

다. Prehybridization 및 Hybridization 115

라. 발색(Visualization) 116

제6장 실증실험(포장시험) 119

제1절 시료채집 119

1. 시료채집 119

2. 시료제조 119

제2절 CMV 감염조사 119

1. ELISA test에 의한 CMV 진단 119

가. ELISA test 120

나. Dot ELISA test 120

2. cDNA hybridization에 의한 CMV 진단 120

3. 결과 121

제1장 CMV-As strain의 일반적 특성 121

제1절 CMV-As의 증식및 기주반응 121

제2절 물리적 성질 121

제3절 E.M 및 혈청학적 검정 124

1. E.M 검정 124

2. 한천젤 이중확산법에 의한 혈청학적 검정 124

제2장 CMV-As 순화및 순화및 특성 127

제1절 CMV-As 순화및 특성 127

1. CMV-As 순화 127

2. 순화바이러스의 특성 130

가. U.V. scanning 130

나. E.M 검정 130

제3장 CMV-As coat protein및 RNA 특성 133

제1절 CMV-As coat protein 특성 133

제2절 CMV-As RNA 분리정제및 특성 133

1. CMV-As RNA 분리정제 133

2. CMV-As RNA의 특성 137

제4장 CMV-As 항혈청 제조 139

제1절 CMV-As 항혈청분리 139

제2절 역가검정 139

제5장 CMV의 진단 141

제1절 혈청학적 방법에 의한 CMV 진단 141

1. Ouchterlony agarose gel double diffusion test 141

2. ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay) test 141

3. Western blot analysis 146

4. 면멱전자현미경(ISEM, immunsorbent electuron microscopy) 법 146

제2절 cDNA hybridization에 의한 CMV 진단 149

1. 형질전환체의 선별및 Plasmid DNA 분리 149

2. Restriction map 149

3. 32P(이미지참조)및 Biotinylated cDNA probe 제조 151

4. 32P(이미지참조)-labelled cDNA probe를 이용한 CMV 진단 155

5. Biotinylated cDNA probe를 이용한 CMV 진단 155

제6장 실증시험(포장시험) 159

제1절 ELISA test에 의한 CMV 진단 159

제2절 cDNA hybridization에 의한 CMV 진단 159

4. 고찰 162

제1장 CMV-As의 일반적 특성 162

제2장 CMV-As 순화 163

제3장 CMV-As coat protein및 RNA 특성 164

제4장 CMV-As 항혈청 제조 165

제5장 CMV의 진단 166

제6장 실증시험(포장시험) 168

5. 결론 169

제1장 CMV-As의 일반적 특성 169

제2장 CMV-As 순화 170

제3장 CMV-As coat protein및 RNA 특성 171

제4장 CMV-As 항혈청 제조 172

제5장 CMV의 진단 173

제6장 실증시험(포장시험) 174

6. 참고문헌 175

제2세부과제 CMV-RNA의 molecular cloning 및 cDNA를 이용한 유전자진단법의 개발 181

목차 182

1. 서론 187

제1장 CMV의 분리, 동정 189

제2장 CMV-RNA의 cDNA합성 및 클로닝 189

제1절 CMV 전 RNA에 대한 cDNA 클로닝 189

제2절 CMV satellite RNA에 대한 cDNA클로닝 190

제3장 CMV의 유전자 진단 191

2. 연구방법 193

제1장 CMV의 분리 동정 193

제1절 바이러스의 분리 193

제2절 지표식물 반응 193

제3절 전자현미경 관찰 194

제4절 혈청반응실험 194

제5절 CMV의 순화 195

제6절 CMV-RNA의 정제 및 전기영동 195

제2장 CMV-RNA의 cDNA합성 및 클로닝 197

제1절 CMV의 전 RNA에 대한 cDNA합성 및 클로닝 197

1. 공시 바이러스 197

2. cDNA 합성 197

3. cDNA 클로닝 199

4. Cloned plasmid DNA의 선별 199

제2절 CMV의 satellite RNA의 cDNA 합성 및 클로닝 202

1. 공시 바이러스 202

2. Satellite RNA의 cDNA합성 202

3. Satellite RNA의 cDNA클로닝 204

4. Cloned plasmid DNA의 선별 204

5. Satellite RNA 염기배열 결정 205

제3장 CMV의 유전자 진단법 개발 205

제1절 유전자 진단용 cDNA probe의 제작 205

제2절 유전자 진단용의 작성 206

1. Southern blot법의 이용 206

2. Dot blot법의 이용 207

3. 결과 209

제1장 CMV의 분리 동정 209

제1절 바이러스의 분리 209

제2절 지표식물의 반응 209

제3절 바이러스의 입자 210

제4절 혈청학적 성질 210

제5절 RNA의 성질 212

제2장 CMV-RNA의 cDNA합성 및 클로닝 215

제1절 CMV의 전 RNA에 대한 cDNA의 합성 및 클로닝 215

제2절 CMV의 satellite RNA의 cDNA 합성 및 클로닝 217

1. Satellite RNA의 전기영동 217

2. Satellite RNA에 대한 cDNA의 특성 221

3. Satellite RNA의 염기배열 224

제3장 CMV의 유전자 진단 228

제1절 유전자 진단용 cDNA probe 228

제2절 CMV 게놈 RNA의 검출 229

제3절 CMV satellite RNA의 검출 229

1. Satellite RNA에 대한 cDNA의 검출 229

2. Satellite RNA의 검출 231

가. Southern blot 231

나. Dot blot 231

4. 고찰 236

제1장 CMV의 분리 동정 236

제2장 CMV-RNA의 cDNA합성 및 클로닝 238

제3장 CMV-RNA의 유전자진단 241

5. 결론 244

제1장 CMV의 분리 동정 244

제2장 CMV-RNA의 cDNA합성 및 클로닝 245

제3장 CMV-RNA의 유전자 진단 246

6. 참고문헌 247

제3세부과제 주요채소의 CMV저항성품종선발 및 육성 258

목차 259

1. 서론 268

2. 연구방법 270

제1장 CMV 저항성 품종선발을 위한 품종수집. 270

제2장 ELISA-test를 이용한 CMV 저항성 품종선발 및 검정. 270

제1절 공시품종 270

제2절 공시 virus 계통 및 접종법 271

제3절 CMV 저항성 품종선발을 위한 ELISA-test법. 271

제3장 바이러스 내병성 품종 육성연구 273

제1절 품종간 품질비교 273

제2절 내병성계통 및 품종간 교잡연구 273

제4장 원형질체 배양과 세포단위의 virus 연구를 위한 기초 실험 274

제1절 오이와 고추의 callus 유기. 274

제2절 고추의 callus배양에 미치는 NAA, 2, 4-D 및 BAP의 영향. 276

제5장 원형질체 배양과 세포단위에서 바이러스 연구 277

제1절 오이의 원형질체 나출 277

1. 재료 277

2. 방법 277

제2절 고추의 원형질체 나출수율에 미치는 cellulase와 macerozyme의 영향. 278

1. 재료 278

2. 방법 279

제3절 배추의 원형질체 나출. 279

1. 재료 279

2. 방법 280

제4절 cDNA를 이용한 식물체내 antisense RNA의 발현. 280

1. E. coli Cell로 부터 plaomid DNA의 분리. 280

2. Restriction Enzyme digestion. 281

3. Agarose Gel로 부터 DNA 절편의 분리. 282

4. ligation 반응 및 E. Coli 세포 내로의 transformation 283

5. Insert의 확인. 284

6. Sequencing을 위한 template DNA의 정제. 284

7. cDNA 말단부위의 sequencing. 285

3. 결과 286

제1장 품종수집. 286

제2장 ELISA-Test를 이용한 CMV 저항성 품종선발 및 검정. 286

제3장 바이러스 내병성 품종육성연구. 297

제1절 품종간 품질비교. 297

제2절 품종간 교잡 및 F₂종자특성과 내성조사 307

제3절 바이러스 내성과 세포벽 두께검정 309

제4장 원형질체배양과 세포단위의 virus 연구를 위한 기초실험. 309

제1절 오이와 고추의 callus 유기. 309

제2절 고추의 callus 배양에 미치는 NAA, 2, 4-D 및 BAP의 영향 313

제5장 원형질체 배양과 세포단위의 virus 연구. 318

제1절 오이의 원형질체 나출. 318

제2절 고추의 원형질체 나출수율에 미치는 cellulase와 macerozyme의 영향. 324

제3절 배추의 원형질체 나출. 329

제4절 pCMV7의 5', 3' 말단 염기서열 결정. 329

4. 고찰 332

제1장 품종수집 332

제2장 저항성 품종 선발 및 검정 333

제3장 내병성 품종육성 연구 335

제4장 원형질체배양과 세포단위의 virus연구 337

5. 결론 340

6.참고문헌 341

CMV의 혈청학적 진단과 형광물질을 결합한 cDNA 합성 및 진단법 개발 81

Table 1. Composition of the agarose gel solution. 97

Table 2. Working steps in the direct double astibody sandwich procedure of enzme-linked immunosorbent assay 102

Table 3. Nature of pCMV7 clone used in this atudy derived form DSM in West Germany 107

Table 4. Composition of prehybridization and hybridization solutions 116

Table 5. Reactions of cucumber mosaic virus(CMV) As and Y strains on different indicator plant(Kweon, 1990, and in this study) 123

Table 6. Physical properties of cucumber mosaic virus As strain 124

Table 7. Characteristics of absorbance patterns and number of local lesions after sucrose-density gradient ultracentrifugation of mosaic virus As strain 129

Table 8. Incidence of cucumber mosaic virus from randomly collected field cultivated various crops as determined by ELISA. 161

주요채소의 CMV저항성품종선발 및 육성 264

Table 1. Working steps in the direct double antibody sandwich procedure of enzyme-linked immunosorbent assay(Koenig, R., 1986,modification) 272

Table 2. Crossing combination of pepper. 275

Table 3. Cultivars of cucumber collected to select CMV resistant cultivar 287

Table 4. Inbreed lines of cucumber collected to select CMV resistant inbreed line. 288

Table 5. Cultivars of pepper collected to select CMV resistant cultivar. 289

Table 6. Inbreed lines of hot pepper collected to select CMV resistant inbreed line. 290

Table 7. Cultivars of chinese cabbage collected to select CMV resistance cultivar. 291

Table 8. Lines of chinese cabbage collected to select CMV resistant cultivar 292

Table 9. Results of ELISA test for selecting CMV resistant cultivar in cucumber 295

Table 10. Results of ELISA test for selecting CMV resistant inbreed line in cucumber. 296

Table 11. Results of ELISA test for selecting CMV resistant cultivar in pepper 298

Table 12. Results of ELISA test for selecting CMV resistant cultivar in foreign pepper. 299

Table 13. Results of ELISA test for selecting CMV resistance in chinese cabbage 300

Table 14. Results of ELISA-test for selecting CMV resistant cultivar in chinese cabbage. 301

Table 15. Results of ELISA-test and quality of fruit of cucumber. 304

Table 16. Characteristics of fruit of hot pepper. 305

Table 17. Comparison of growth according to the grade of CMV resistance in chinese cabbage. 306

Table 18. Seed potential test of F₂ in pepper. 308

Table 19. Effects of NAA and BA on organogenesis from hypocotyl explant of cucumber (cv.Baikrokdadagi). 310

Table 20. Effects of 2, 4-D and kinetin on organogenesis from hypocotyl explant of pepper (cv.Toldori). 311

Table 21. Effect of NAA levels on fresh weight of Capsicum annuum callus cultured in in vitro. 314

Table 22. Fresh weight of callus from cotyledon in pepper. 315

Table 23. Effect of 2, 4-D levels on fresh weight of Capsicum annuum callus cultured in in vitro. 316

Table 24. Effect of 2, 4-D and NAA on fresh weight of Capsicum annuum cv. Hong-ilpoom callus cultured in in vitro. 317

Table 25. Effect of combination of NAA, 2, 4-D and BAP on fresh weight of Capsicum annuum cv. Hong-ilpoom callus cultured in in vitro. 319

Table 26. Effects of hormon treatment on the callus formation in different hot pepper. 320

Table 27. Extent of protoplast yield and viability of cotyledon of cucumber (cv. Marketmore 80) in each case enzyme mixture. 321

Table 28. Extent of protoplast yield and viability of young leaf of cucumber (cv. Marketmore 80) in each case enzyme mixture. 322

Table 29. Extent of protoplast yield and viability of hypocotyl of cucumber (cv. Marketmore 80) in each case enzyme mixture. 323

Table 30. Extent of protoplast yield and viability of various cultivars of cucumber according to the resistance in optimal enzyme mixturez)(이미지참조). 325

Table 31. Protoplast isolation yield of the cotyledon in capsicum annuum cv. Hong-ilpoom cultured in the greenhouse. 326

Table 32. Protoplast isolation yield of the young leaves in capsicum annuum cv. Hong-ilpoom cultured in the greenhouse. 327

Table 33. Protoplast isolation yield of the cotyledon in capsicum annuum cv. Hong-ilpoom cultured in in vitro. 328

Table 34. Extent of protoplast yield in each case enzyme mixture and incubation time in chinese cabbage 'Bokdori'. 330

CMV의 혈청학적 진단과 형광물질을 결합한 cDNA 합성 및 진단법 개발 82

Fig 1. Procedure for the purification of cucumber mosaic virus As strain. 94

Fig 2. Procedure of the working steps of immunosorbent electron microscopy(ISEM) test. 106

Fig 3. Schematic repesentation of DNA probe labelling by nick translation using 32p-dCTP(이미지참조) and biotin-11dUTP. 113

Fig 4. Schematic representation of working steps in slot blot hybridization to detect cucumber mosaic virus using 32p(이미지참조) and biotinylated probr. 118

Fig 5. Tobacco(Nicotiana tabacum cv. Xanthi-nc) leaves infected with cucumber mosaic virus AS strain(A). Healthy tobacco leaves, (B), control. 122

Fig 6. Electron micrograph of crude extract of infected with cucumber mosaic virus As strain. CMV particles were stained with 2 % uranyl acetate. Bar represents 100 nm. 125

Fig 7. Serological reaction in Ouchterlony agar gel double diffusion test... 126

Fig 8. Ultra-Violet(U.V.) absorption pattern of a sucrose density gradient centrifugation of purified cucumber mosaic virus(CMV) As strain... 128

Fig 9. Characteristics of absorbance pattern after sucrose-density gradient centrifugation of CMV-As. 131

Fig 10. Electron micrograph of purified cucumber mosaic virus As. 132

Fig 11. Coat protein pattern of cucumber mosaic virus As strain on SDS-PAGE(10 % gel). Lane(A),(E); molecular weight marker proteins, (B); CMV-As, (C); CMV-Y, (D); TMV-OM. 134

Fig 12. Determination of molecular weight of the protein subunit of CMV-As by electrophoresis on 10% SDS-PAGE. 135

Fig 13. U.V. absorption spectra of CMV-As RNA. 136

Fig 14. Electrophoretic patterns of the RNAs of cucumber mosaic virus As strain... 138

Fig 15. Production of antibody to cucumber mosaic virus As in rabbit after immunization... 140

Fig 16. Serological reactions in Ouchterlony agar gel double diffusion test (0.75 % agarose gel in 10 mM phosphate buffer, pH 7.0, containing 0.85 % NaCl, 2 mN EDTA, and 0.02 X NaN₃)... 142

Fig 17. Ion-exchange chromatography of a cucumber mosaic virus As strain antiserum on a column of DEAE-52 cellulose... 143

Fig 18. Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) test absorbance for the dilutions of purified preparations(1 mg/ml) of cucumber mosaic virus-As, tobacco plant sap infected with CMV-As, and healthy tobacco plant sap. The plate was read at 405 nm. 145

Fig 19. Western blot from SDS-PAGE of purified preparations of CMV-As demonstrating specificity of immunoglobulin G for the CMV-As coat protein... 147

Fig 20. Electron micrograph of CMV-As strain using immunosorbent electron microscopy(ISEM) tests with tobacco plant sap infected with CMVAs... 148

Fig 21. Agarose gel electrophoresis of transformed pCMV7. plasmid. 150

Fig 22. Restriction endonuclease analysis of pCMV7(cDNA clone of CMV-D strain RNA 4)... 152

Fig 23. Schematic representation of physical map of pCMV7, cDNA clone of cucumber mosaic virus D strain RNA 4. Two arrows indicate insert sites. 153

Fig 24. DNA pattern of pCMV7 after enzyme digestion. Electrophoresis was carried out in a 1 agarose gel. Lane A, not digested, B,double digested with EcoRI/BamHI,, C, DNA fragment from lane B, and D, Size standard DNA. 154

Fig 25. Detection of cucumber mosaic virus RNA by slot blot hybridization using 32P-labelled pCMV7 DNA probe(0.5 x 108 cpm)... 156

Fig 26. Slot blot hybridization analysis of CMV-As RNA samples, and crude extract tobacco plant sap infected with CMV-As with 32P-labelled(이미지참조) DNA probe(pCMV7:cDNA clone of CMV-D RNA 4)... 157

Fig 27. Slot blot hybridization analysis of CMV-As RNA samples with biotinlabelled DNA probe(pCMV7:cDNA clone of CMV-D RNA 4).... 158

Fig 28. Dot ELISA test for the detection of CMV 160

주요채소의 CMV저항성품종선발 및 육성 267

Fig 1. Cell wall thickness of young leaf according to CMV resistance in cucumber. 312

Fig 2. Nucleotide sequence and insert size of the pCMV7. coat protein gene in puc9. 331