생몰정보
소속
직위
직업
활동분야
주기
서지
국회도서관 서비스 이용에 대한 안내를 해드립니다.
검색결과 (전체 1건)
원문 있는 자료 (1) 열기
원문 아이콘이 없는 경우 국회도서관 방문 시 책자로 이용 가능
목차보기더보기
[표제지 등]
중과제명 : 약효 및 독성시험 지원연구
제출문
요약문
목차
I. 제목 7
II. 연구개발의 목적 및 중요성 7
1. (In vitro 독성시험법 개발 연구) 7
2. (암전이 관련효소를 이용한 새로운 암전이억제제검색법 확립) 9
3. (생체내 (in vivo) 중기 발암성 시험법 연구) 10
4. (발암물질 대사효소(P450)의 분자독성학적 연구) 11
III. 연구개발의 내용 및 범위 13
1. (In vitro 독성시험법 개발 연구) 13
2. (암전이 관련 효소를 이용한 새로운 암전이 억제제검색법 확립) 17
3. (생체내 (in vivo) 중기 발암성 시험법 연구) 18
4. (발암물질 대사효소(P450)의 분자독성학적 연구) 21
IV. 연구개발 결과 및 활용에 대한 건의 23
1. (In vitro 독성시험법 개발 연구) 23
2. (암전이 관련 효소를 이용한 새로운 암전이 억제제 검색법 확립) 31
3. (생체내 (in vivo) 중기 발암성 시험법 연구) 32
4. (발암물질 대사효소(P450)의 분자독성학적 연구) 34
SUMMARY 36
제1세부과제명 : In vitro 독성시험법 개발 연구(제목없음) 67
목차 67
제1장 서론 73
제1절 In vitro 표적장기 독성시험법 개발 74
제2절 Skin 구성세포를 이용한 in vitro 국소자극시험법 확립 76
제3절 Mid brain cell culture를 통한 생식독성시험법 확립 78
제4절 포유류배양세포를 이용한 항돌연변이물질검색법 확립 79
제5절 In vitro 광독성 시험법의 개발 80
제2장 세부과제별 연구결과 82
제1절 In vitro 표적장기 독성시험법 개발 82
1. In vitro 신장독성시험법 개발 82
가. 랫드 신장으로부터 근위세뇨관 세포의 1차 배양 82
나. 효소유리 측정법 83
다. α-Methylglucose uptake 측정 83
라. 세포내 ATP 양 측정 84
마. Na+-K+ ATPase 활성 측정(이미지참조) 84
바. Alkaline Phophatase의 활성 측정 85
2. In vitro 신경독성시험법 개발 85
가. 소뇌과립세포(cerebellar granule cell) 배양 85
나. 신경교세포(astrocyte) 배양 85
다. SRB assay에 의한 섬유아세포의 생존율과 형태적 변화 86
라. MTT assay에 의한 소뇌과립세포의 생존율 측정 86
3. In vitro 간장독성시험법 개발 86
가. 랫드 간장으로부터 간세포의 1차 배양 86
나. LDH leakage assay 86
다. GSH 정량 88
제2절 Skin 구성세포를 이용한 in vitro 국소자극시험법 확립 89
1. In vitro 세포 독성 89
2. In vitro, in vivo 시험의 상관관계 89
제3절 Mid brain cell culture를 통한 생식독성시험법 확립 90
제4절 포유류 배양세포를 이용한 항돌연변이물질 검색법 확립 92
1. In vitro 염색체이상시험 92
2. In vivo 염색체이상시험 93
제5절 In vitro 광독성 시험법의 개발 95
제3장 결론 96
제1절 In vitro 표적장기 독성시험법 개발 96
1. In vitro 신장독성시험법 개발 96
2. In vitro 신경독성시험법 개발 97
3. In vitro 간장독성시험법 개발 98
제2절 Skin 구성세포를 이용한 in vitro 국소자극시험법 확립 99
제3절 Mid brain cell culture를 통한 생식독성시험법 확립 99
제4절 포유류배양 세포를 이용한 항돌연변이물질 검색법 확립 100
1. In vitro 염색체이상시험 100
2. In vivo 염색체이상시험 101
제5절 In vitro 광독성 시험법의 개발 101
제4장 향후 연구계획 102
제1절 In vitro 표적장기 독성시험법 개발 102
1. In vitro 신장독성시험법 개발 102
2. In vitro 신경독성시험법 개발 102
3. In vitro 간장독성시험법 개발 103
제2절 Skin 구성세포를 이용한 in vitro 국소자극시험법 확립 103
제3절 Mid brain cell culture를 통한 생식독성시험법 확립 104
제4절 포유류배양세포를 이용한 항돌연변이물질검색법 확립 104
제5절 In vitro 광독성 시험법의 개발 104
제2세부과제명 : 암전이 관련 효소를 이용한 새로운 암전이 억제제 검색법 확립 106
목차 106
제1장 서론 110
제2장 실험방법 115
제1절 사용한 세포주 및 배양조건 115
제2절 Northern (RNA) Blot Analysis 115
제3절 HT1080 배양세포로 v-H-ras 유전자의 transfection 117
제4절 Secreted alkaline phosphatase (SEAP) 유전자를 이용한 MMP-9 리포터 벡터 (pMMP9P-SRAP)의 제조 118
1. Restriction(Restrction) enzyme digestion 118
2. DNA elution 118
3. DNA ligation 119
제5절 HT1080 세포주로 리포터 벡터 pMMP9P-SEAP의 도입 (stable transfection) 119
제6절 pMMP9P-SEAP 벡터가 도입된 세포주에서 alkaline phosphatase 활성측정 119
제3장 연구결과 및 고찰 120
제1절 MMP-2, MMP-9, v-ras 유전자의 발현 연구 (Northern blot analysis) 120
제2절 ras oncogen이 MMP 발현에 미치는 영향 123
제3절 Secreted alkaline phosphatase (SEAP) 유전자를 이용한 MMP-9 리포터 벡터의 제조 125
제4절 pMMP9P-SEAP transfected HT1080세포주에서 alkaline phosphatase 활성 측정 129
제4장 결론 131
제3세부과제명 : 생체내 (in vivo) 중기 발암성 시험법 연구 132
제1장 서론 132
제2장 재료 및 방법 137
제1절 실험동물 137
제2절 실험설계 및 시험물질 투여 137
제3절 병리 조직학적 관찰 138
제4절 GST-P 의 면역 조직 화학적 검색 139
제5절 Pg 1 의 면역 조직 화학적 검색 139
제6절 aberrant crypt foci 의 검색 140
제7절 자료의 통계처리 141
제3장 결과 141
제1절 체중의 변화 141
제2절 장기 무게의 변화 142
제3절 육안적 소견 142
제4절 aberrant crypt foci의 정량 분석 소견 142
제5절 현미경적 소견 143
1. 소화기계 143
2. 비뇨기계 143
제6절 GST-P 양성 중식소 및 중식성 결절의 수와 면적 144
제7절 pepsinogen 1 변이 유문선 (PAPG)의 변화 144
제4장 고찰 145
제4세부과제명 : 발암물질 대사효소(P450)의 분자독성학적 연구 151
제1장 서론 151
제2장 재료 및 실험방법 156
1. 실험동물 156
2. 실험재료 156
3. Microsome의 분리 157
4. 발암물질 대사효소(P450)의 측정 158
5. Western immunoblotting 159
6. Total cellular RNA의 분리 160
7. Northern 및 slot blotting 161
8. P450 probe 161
9. 비장세포의 증식능 측정 162
10. 통계처리 163
제3장 결론 163
[title page etc.]
SUMMARY
Contents
I. Subject 36
II. Objectives and Justification of the Project 36
1. (Studies on the Development of in Vitro Toxicity Test) 36
2. (Development of a New Screening Method for Metaastasis - Preventing Agents Using Matrix Metalloproteinases) 39
3. (Studies on the Medium-term in Vivo Bioassay) 40
4. (Molecular Toxicological Studies on Carcinogen-Metabolizing P450 Enzymes) 41
III. Scope and Contents of the Project 43
1. (Studies on the Development of in Vitro Toxicity Test) 43
2. (Development of a New Screening Method for Metaastasis - Preventing Agents Using Matrix Metalloproteinases) 48
3. (Studies on the Medium-term in Vivo Bioassay) 49
4. (Molecular Toxicological Studies on Carcinogen-metabolizing P450 Enzymes) 52
IV. Results and Proposal for Applications 53
1. (Studies on the Development of In Vitro Toxicity Test) 53
2. (Development of a New Screening Method for Metastasis-Preventing Agents Using Matrix Metalloproteinases) 62
3. (Studies on the Medium-term in Vivo Bioassay) 63
4. (Molecular Toxicological Studies on Carcinogen-Metabolizing P450 Enzymes) 65
(Studies on the Development of In Vitro Toxicity Test)(제목없음) 70
Chapter 1. Introduction 73
1. Development of target organ toxicity test in vitro 74
2. In vitro alternatives to skin irritation 76
3. Studies on the development of in vitro methods of reproductive toxicology 78
4. Development of antimutagenicity test using mamalian cells 79
5. Studies on the development of in vitro Phototoxicity test 80
Chapter 2. Results 82
1. Development of target organ toxicity test in vitro 82
1. Nephrotoxicity test in vitro 82
a. Primary culture of proximal tubular cells from rats 82
b. Enzyme leakage test 83
c. Determination of α-methylglucose uptake 83
d. Intracellular ATP contents assay 84
e. Na+-K+ ATPase assay(이미지참조) 84
f. Alkaline phosphatase assay 85
2. Neurotoxicity test in vitro 85
a. Culture of cerebellar granule cell 85
b. Culture of astrocyte 85
c. SRB assay 86
d. MTT assay 86
3. Hepatotoxicity test in vitro 86
a. Primary culture of hepatocyte isolated from rats 86
b. LDH leakage test 86
c. GSH contents 88
2. In vitro alternatives to skin irritation 89
1. In vitro cytotoxicity 89
2. Correlation of results from in vitro and in vivo tests 89
3. Studies on the development of in vitro methods of reproductive toxicology 90
4. Development of antimutagenicity test using mamalian cells 92
1. In vitro chromosome aberration test 92
2. In vivo chromosome aberration test 93
5. Studies on the development of in vitro phototoxicity test 95
Chapter 3. Conclusion 96
1. Development of target organ toxicity test in vitro 96
1. Nephrotoxicity test in vitro 96
2. Neurotoxicity test in vitro 97
3. Hepatotoxicity test in vitro 98
2. In vitro alternatives to skin irritation 99
3. Studies on the development of in vitro methods of reproductive toxicology 99
4. Development of antimutagenicity test using mamalian cells 100
1. In vitro chromosome aberration test 100
2. In vivo chromosome aberration test 101
5. Studies on the development of in vitro phototoxicity test 101
Chapter 4. Research proposal 102
1. Development of target organ toxicity test in vitro 102
1. Nephrotoxicity test in vitro 102
2. Neurotoxicity test in vitro 102
3. Hepatotoxicity test in vitro 103
2. In vitro alternatives to skin irritation 103
3. Studies on the development of in vitro methods of reproductive toxicology 104
4. Development of antimutagenicity test using mamalian cells 104
5. Studies on the development of in vitro phototoxicity test 104
(Development of a New Screening Method for Metastasis - Preventing Agents Using Matrix Metalloproteinases) 106
Chapter 1. Introduction 110
Chapter 2. Materials and Methods 115
1. Cell lines and Growth condition 115
2. Northern (RNA) Blot Analysis 115
3. Transfection of HT1080 cells with v-H-ras cDNA 117
4. Construction of pMMP9P-SEAP reporter vector 118
a. Restriction enzyme digestion 118
b. DNA elution 118
c. DNA ligation 119
5. Stable transfection of HT1080 cells with pMMP9P-SEAP 119
6. Determination of alkaline phosphatase activity in pMMP9P-SEAP transfected HT1080 cell line 119
Chapter 3. Results and Discussion 120
1. Northern blot analysis of MMP-2, MMP-9, and v-H-ras 120
2. Effects of ras oncogene on expressions of MMPs 123
3. Construction of pMMP9P-SEAP reporter vector 125
4. Determination of alkaline phosphatase activity in pMMP9P-SEAP transfected HT1080 cell line 129
Chapter 4. Conclusions 131
이용현황보기
가상서가
원문구축 및 2018년 이후 자료는 524호에서 직접 열람하십시요.
도서위치안내: / 서가번호:
우편복사 목록담기를 완료하였습니다.
* 표시는 필수사항 입니다.
* 주의: 국회도서관 이용자 모두에게 공유서재로 서비스 됩니다.
저장 되었습니다.
로그인을 하시려면 아이디와 비밀번호를 입력해주세요. 모바일 간편 열람증으로 입실한 경우 회원가입을 해야합니다.
공용 PC이므로 한번 더 로그인 해 주시기 바랍니다.
아이디 또는 비밀번호를 확인해주세요
