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SUMMARY
표목차
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칼라
[목차]
In Vitro 표적장기 독성시험법 개발에 관한 연구 (I) 35
제출문 36
요약문 37
목차 45
제1장 서론 49
제1절 In vitro 신장독성 시험법 개발 50
제2절 In vitro 신경독성 시험법 개발 52
제3절 In vitro 간장독성 시험법 개발 54
제2장 실험방법 55
제1절 In vitro 신장독성 시험법 개발 55
1. 시험물질 55
2. 세포배양 및 약물처리 56
3. α-Methylglucose uptake의 측정 56
4. ATP assay 57
5. Enzyme assay 57
6. 단백질 정량 57
7. 랫드 신장으로부터의 근위세뇨관 세포의 1차 배양 58
제2절 In vitro 신경독성 시험법 개발 59
1. 섬유아세포배양 59
2. 소뇌과립세포배양 59
3. Astrocyte 배양 60
4. 시험물질 및 투여약물 조제 61
5. Colorimetric MTT assay 61
6. SRB assay 62
제3절 In vitro 간장독성 시험법 개발 62
1. 간세포 분리 및 배양 62
2. 시험물질 처치 63
3. LDH leakage assay 64
4. Glutathione 측정 64
5. 통계처리 및 분석 65
제3장 연구결과 및 고찰 65
제1절 In vitro 신장독성 시험법 개발 65
1. 세포형태 관찰 65
2. 효소유리 측정 66
3. α-Methylglucose uptake 측정 68
4. 세포내 ATP 양 측정 69
5. Na+-K+(이미지참조) ATPase 활성 측정 69
6. Alkaline Phosphatase의(Phophatase의) 활성 측정 70
제2절 In vitro 신경독성 시험법 개발 70
1. 소뇌과립세포(cerebellar granule cell) 배양 70
2. 신경교세포(astrocyte) 배양 71
3. SRB assay에 의한 섬유아세포의 생존율과 형태적 변화 72
4. MTT assay에 의한 소뇌과립세포의 생존율 측정 72
제3절 In vitro 간장독성 시험법 개발 75
1. 랫드 간장으로부터 간세포의 분리 및 1차배양 75
2. LDH leakage assay 75
3. Glutathione 측정 76
제4장 결론 77
제1절 In vitro 신장독성 시험법 개발 77
제2절 In vitro 신경독성 시험법 개발 78
제3절 In vitro 간장독성 시험법 개발 79
제5장 참고문헌[원문불량;p.56][내용누락;p.57~58] 80
In Vitro 국소독성시험법 개발에 관한 연구 (I) 100
제출문 101
요약문 102
목차 107
제1장 서론 110
제2장 연구내용 및 방법 114
제1절 시료 114
제2절 시험방법 116
1. In vitro 시험 116
2. In vivo 시험 118
3. 결과 분석 121
제3장 결과 122
제4장 고찰 124
제5장 참고문헌 126
In Vitro 생식독성시험법 개발에 관한 연구 (I) 137
제출문 138
요약문 139
목차 144
제1장 서론 146
제2장 연구추진방법(실험방법) 151
제1절 실험동물 151
제2절 태자중뇌세포의 일차배양 151
제3절 세포독성검사를 위한 고정 및 염색 154
제4절 세포분화도 검색을 위한 배양후 고정 및 염색 154
제5절 면역조직학적 염색 155
제3장 연구결과 및 고찰 156
제1절 일차중뇌세포 배양법 확립 156
제2절 배양된 중뇌세포에 대한 약물의 영향 159
제4장 결론 164
제5장 참고문헌 165
포유류 배양세포를 이용한 항돌연변이물질 검색법의 확립 (I) 183
제출문 184
요약문 185
목차 189
제1장 서론 193
제2장 실험 방법 198
제1절 실험재료 198
1. 시약 198
2. 실험기기 및 기구 198
3. 실험동물 199
제2절 In vitro 염색체이상시험 199
1. 사용세포 및 배양방법 199
2. 세포독성시험 200
3. In vitro 염색체이상시험 200
4. In vitro 염색체표본 제작방법 201
5. 결과의 판정 201
제3절 In vivo 염색체이상시험 203
1. 예비독성시험 203
2. In vivo 염색체이상시험 203
3. In vivo 염색체표본 제작방법 204
4. 결과의 판정 204
제3장 실혐 결과 및 고찰 206
제1절 In vitro 염색체이상시험 206
1. 세포독성시험 206
2. In vitro 염색체이상시험 206
제2절 In vivo 염색체이상시험 208
1. 예비독성시험 208
2. In vivo 염색체이상시험 212
제3절 고찰 216
제4장 결론 224
제5장 참고 문헌 226
In Vitro 광독성시험법 개발에 관한 연구 (I) 232
제출문 233
요약문 234
목차 239
제1장 서론 242
제2장 실험방법 246
제1절 시험세포 246
제2절 시험물질 247
제3절 UV 조사 247
제4절 MTT assay 248
제5절 Neutral red uptake assay 249
제6절 MTT 및 neutral red uptake assay에서 광독성의 결정 250
제3장 연구결과 및 고찰 251
제4장 결론 257
제5장 참고문헌 258
[title page etc.]
[Contents]
Development of In Vitro Target Organ Toxicity Tests (I)[원문불량;p.56][내용누락;p.57~58] 35
In Vitro Alternatives to Skin Irritation Test (I) 100
Contents
Chapter 1. Introduction 110
Chapter 2. Experimental methods 114
Section 1. Test compound 114
Section 2. Methods 116
1. In vitro test 116
2. In vivo test 118
3. Statistics 121
Chapter 3. Results 122
Chapter 4. Discussion 124
Chapter 5. References 126
Development of In Vitro Reproductive Toxicity Test (I) 137
Chapter 1. Introduction 146
Chapter 2. Experimental Design 151
Section 1. Experimental Animals 151
Section 2. Primary Culture of Embryo Midbrain 151
Section 3. Fixation and Stain for Cytotoxicity Test 154
Section 4. Fixation and Stain for Cell Differentiation Assay 154
Section 5. Immunocytochemistry 155
Chapter 3. Results and Discussion 156
Section 1. Establishment of Primary Midbrain Micromass Culture Method 156
Section 2. Effects of Chemicals on the Cultured Cells 159
Chapter 4. Conclusions 164
Chapter 5. References 165
Development of Antimutagenicity Test Using Mammalian Cells (I) 183
Development of In Vitro Phototoxicity Test (I) 232
Chapter 1. Introduction(Intorduction) 242
Chapter 2. Experimental methods 246
Section 1. Target cells 246
Section 2. Test compounds 247
Section 3. UV irradiation 247
Section 4. MTT assay 248
Section 5. Neural red uptake assay 249
Section 6. Determination of phototoxicity in MTT and neutral red uptake assays 250
Chapter 3. Results and discussion 251
Chapter 4. Conclusion 257
Chapter 5. References 258
Table 1. The effect of cisplatin on enzyme leakage in LLC-PK₁a(이미지참조) 85
Table 2. The effect of cisplatin on a-MG uptake and ATP content in LLC-PK₁a(이미지참조) 86
Table 3. The effect of cisplatin on activities of Na+-K+ ATPase and ALP in LLC-PK₁a(이미지참조) 87
Table 4. Effect of neurotoxicants on fibroblast estimated by SRB assay in LE a(이미지참조) 88
Table 5. Effect of neurotoxicants on cerebellar granule cells estimated by MTT assay in LE a(이미지참조) 89
Table 6. The effect of CC14. on LDH leakage in hepatocytes a(이미지참조) 90
Table 7. The effect of acetaminophen on LDH leakage and GSH content in hepatocytes a(이미지참조) 91
In Vitro 국소독성시험법 개발에 관한 연구 (I) 108
Table／Tabl 1. Cytotoxicity of surfactants on human fibroblast cells 129
Table 2. In vitro skin irritation potential of surfactants. 130
Table 3. Correlation coefficient between in vivo and in vitro methods 131
In Vitro 생식독성시험법 개발에 관한 연구 (I) 142
Table 1. Concentrations of HU and RA Inducing 50% Decrease in Viability and Cell Differentiation of Midbrain Micromass Culture 182
포유류 배양세포를 이용한 항돌연변이물질 검색법의 확립 (I) 191
Table 1. Effect of β-carotene on the frequency of cells with chromosome aberration induced by MMC in vitro. 207
Table 2. Effect of rubrofusarin on the frequency of cells with chromosome aberration induced by MMC in vitro. 209
Table 3. Effect of β-carotene on the frequency of cells with chromosome aberration induced by BLM in vitro. 210
Table 4. Effect of rubrofusarin on the frequency of cells with chromosome aberration induced by BLM in vitro. 211
Table 5. Effect of treatment on the frequency of cells with chromosome aberration in vivo. 213
Table 6. Effect of β-carotene on the frequency of cells with chromosome aberration induced by MMC in vivo. 214
Table 7. Effect of rubrofusarin on the frequency of cells with chromosome aberration induced by MMC in vivo. 215
Table 8. Effect of β-carotene on the frequency of cells with chromosome aberration induced by BLM in vivo. 217
Table 9. Effect of rubrofusarin on the frequency of cells with chromosome aberration induced by BLM in vivo. 218
In Vitro 광독성시험법 개발에 관한 연구 (I) 240
Table 1. Phototoxicity of different concentrations of test chemicals using a MTT assay.... 264
Table 2. Phototoxicity of different concentrations of test chemicals using a neutral red uptake assay.... 265
In Vitro 국소독성시험법 개발에 관한 연구 (I) 109
Fig 1. Percentage of LDH leakage from fibroblasts after 3 hr exposure to surfactants 132
Fig 2. Percentage of MTT mitochondrial reduction from fibroblasts after 3 hr exposure to surfactants 133
Fig 3. Relationship of potency rank for LDH leakage and human patch test 134
Fig 4. Relationship of potency rank for MTT reduction test and human patch test 135
Fig 5. Photomicrographs of human skin fibroblasts (A) : Normal fibroblasts (B) : Fibroblasts exposed to surfactant 136
In Vitro 생식독성시험법 개발에 관한 연구 (I) 143
Fig. 1. Microdissection line to remove mesencephalon 171
Fig. 2. Procedure of immunocytochemical staining used for the detection of neurofilament of neurons. 172
Fig. 3. Biphasic contrast microscopy of micromass midbrain cells cultured for 5 days. ×100. 173
Fig. 4. Rat embryo midbrain cells(A) after 5 days culture. ×25. (B): A magnification of (A) showing well developed processes between micromasses. ×100, HematoxyIin stain. 174
Fig. 5. Rat embryo midbrain cells(A) after 5 days culture. ×25. (B): A magnification of (A) showing positive reaction to the anti-neurofilament antibody in cell body and neurites ×400. ABC stain. 175
Fig. 6. The effects of HU on cytotoxicity and cell differentiation in midbrain micromass culture on day 5. 176
Fig. 7-1. The effects of HU (0.1, 10, 100㎍／ml) on cell growth (A, B). ×100. 177
Fig. 7-2. The effects of HU (100㎍／㎖) on cell growth (C). ×100. 178
Fig. 8. The effects of HU (1, 10㎍／㎖) on cell differentiation (A:×100, B:×400). ABC stain. 179
Fig. 9. The effects of RA on cytotoxicity and cell differentiation on day 5. 180
Fig. 10. The effects of RA on cell differentiation. (A): DMSO vehicle control, (B): RA 0.1㎍／㎖. ×25, ABC stain. 181
포유류 배양세포를 이용한 항돌연변이물질 검색법의 확립 (I) 192
Fig. 1. Chemical structure of mitomycin C 195
Fig. 2. Chemical structure of bleomycin 195
Fig. 3. Chemical structure of β-carotene 197
Fig. 4. Chemical structure of rubrofusarin 197
In Vitro 광독성시험법 개발에 관한 연구 (I) 241
Figure 1. In vitro phototoxicity of chlorpromazine as evaluated with the MTT and neutral red uptake assays.... 266
Figure 2. In vitro phototoxicity of piroxicam as evaluated with the MTT and neutral red uptake assays.... 267
Figure 3. In vitro phototoxicity of chlortetracycline as evaluated with the MTT and neutral red uptake assays.... 268
Figure 4. In vitro phototoxicity of 8-methoxypsoralen as evaluated with the MTT and neutral red uptake assays.... 269
Figure 5. In vitro phototoxicity of nalidixic acid as evaluated with the MTT and neutral red uptake assays.... 270
Figure 6. In vitro phototoxicity of promethazine as evaluated with the MTT and neutral red uptake assays.... 271
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