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보고서 초록
요약문
SUMMARY
CONTENTS
목차
제1장 연구개발과제의 개요 9
제1절 연구개발의 필요성 9
1. 연구개발의 과학기술, 사회경제적 중요성 9
제2절 연구개발의 목표 및 범위 10
1. 연구개발의 최종목표 10
2. 연구개발목표의 성격 : 아이디어 개발 10
3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 11
4. 기술경로도 12
제2장 국내외 기술개발 현황 13
제1절. 세계동향 13
1. 주요국의 연구개발 동향 및 수준 13
2. 주요 경쟁기업 및 최근 업체 동향 13
제2절. 국내동향 및 수준 14
제3절. 추진과제의 기술수준 14
1. 국외의 기술 동향 및 수준 14
2. 국내의 기술 동향 및 수준 15
제4절. 환경변화 15
제5절. 국내외 기술수준 비교 16
제6절. 특허분석 16
가. 특허분석 개요 16
나/마. 특허맵 분석 19
다/나. 정량적 분석 20
라/다. 정성분석 24
마/라. 기술반전도 27
제7절. 논문분석 28
가. 논문분석 개요 28
나. 논문맵 현황 29
다. 전체논문 현황 30
라. 기술별 동향 31
제8절. 향후 추진계획 33
가. 로드맵/ 특허맵 / 논문맵 33
나. 기술현황분석보고(State of art report) 34
다. 특허맵과 논문맵의 분석결과 향후연구방향 계획 34
제3장 연구개발수행 내용 및 결과 35
제1절 연구범위 및 접근 방법 35
1. 2-D gel electrophoresis 및 MALDI-TOF 35
2. Random mutagenesis를 통해 ptsN을 통한 신호전달을 매개하는 단백질을 탐색 36
3. Ligand Fishing 37
4. Surface Plasmon Resonance(SPR) technique 37
제2절 연구 내용 및 결과 38
1. nitrogen-metabolic PTS에 의한 branched chain 아미노산 합성 유전자 발현 조절 38
2. 2-D 및 MALDI-TOF를 이용하여 mutant에서의 protein 발현양 변화를 분석 43
3. random mutagenesis를 통해 ptsN을 통한 신호전달을 매개하는 단백질을 탐색 44
4. Dephospho-form의 Enzyme IIANtr(EIIANtr)에 의한 K+ transporter TrkA 조절(이미지참조) 48
5. 대장균 내부의 K+(이미지참조) 농도에 따른 branched chain 아미노산 합성 유전자 발현 조절 51
6. YgdP에 의한 leucine sensitivity의 조절 55
7. YgdP에 의한 EIIANtr(이미지참조) expression 조절 58
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 59
제1절 목표달성도 59
1. 2단계·연차별 연구개발 목표, 결과 및 달성도 59
2. 정량적 달성도 59
제2절 관련분야에의 기여도 60
1. 대표적 연구개발성과 60
2. 국제적 저명 학자에 의해(의한) 본 연구개발성과의 질적 우수성 및 기여도 평가 60
제5장 연구개발결과의 활용계획 63
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 64
제1절 기술수준 비교 64
제2절 기술동향 64
제3절 본 연구를 통해 취득한 기술수준 65
제7장 참고문헌 66
표. 본 연구관련 기술수준 비교표 16
Table 1. 야생종과 ptsN결손 균주에서 발현량이 차이가 나는 단백질 43
Table 2. ptsN-suppressor mutant의 Tn5 insertion 위치 45
Figure 1. EZ-Tn5™〈KAN-2〉 transposome system 36
Figure 2. Arbitarary primer를 이용한 sequencing 37
Figure 3. nitrogen-metabolic PTS의 phosphorylation 39
Figure 4. nitrogen-metabolic PTS 결손 균주의 성장에 미치는 Ala-Leu dipeptide의 영향... 40
Figure 5. ptsN결손 균주의 leucine에 대한 toxicity에 dephospho-PtsN이 미치는 영향... 41
Figure 6. 다양한 배지에서 야생종과 ptsN결손 균주의 AHAS 효소 활성 비교 42
Figure 7. ilvBN ilvIH operon의 발현에 미치는 dephospho-PtsN 영향 42
Figure 8. AHAS 효소 활성에 미치는 RpoS의 영향... 45
Figure 9. rpoS 발현량에 미치는 dephospho-ptsN의 영향... 46
Figure 10. ptsN결손 균주에서의 cAMP level... 47
Figure 11. TrkA와 EIIANtr(이미지참조)의 interaction 48
Figure 12. TrkA와 EIIANtr(이미지참조)의 in vivo interaction 49
Figure 13. TrkA와 EIIANtr(이미지참조)의 phosphorylation-dependent interaction 50
Figure 14. 내부 K+농도(이미지참조) 분석... 51
Figure 15. ptsN 결손 균주의 성장에 미치는 K+(이미지참조)의 영향... 52
Figure 16. K+-depleted 배지에서 ptsN결손 균주의 성장 회복...(이미지참조) 52
Figure 17. trtA deletion에 의한 Ala-Leu dipeptide sensitivity의 회복... 53
Figure 18. K+이 AHAS activity에 미치는 영향 54
Figure 19. K+이 AHAS activity에 미치는 영향 54
Figure 20. Ala-Leu dipeptide의 ygdP결손 균주 성장에 미치는 영향... 55
Figure 21. leucine, isoleucin과 serine이 ygdP결손 균주의 성장에 미치는 영향... 56
Figure 22. YgdP와 YgdP(E56AE57A)의 효소 활성 57
Figure 23. YgdP효소 활성과 leucine 독성... 57
Figure 24. 야생종과 YgdP결손(이미지참조) 균주의 AHAS 효소활성 비교 58
Figure 25. EIIANtr(이미지참조) 발현량에 미치는 YgdP의 영향 58
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