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보고서 초록
요약문
SUMMARY
CONTENTS
목차
제1장 연구개발과제의 개요 16
제2장 국내외 기술개발 현황 18
제3장 연구수행 내용 및 결과 22
제1절 단백질체 분석 시료 준비 22
제2절 단백질체의 분석 26
제3절 FADD-DED의 미생물내 역할 60
제4장 연구개발목표의 달성도 및 관련분야에의 기여도 68
제5장 연구개발결과의 활용계획 70
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 72
제7장 참고문헌 74
Table 1. List of proteins from E.coli cells expressing FADD-DED (Wild type and Mutant) resolved on pH 4-7 2-DE Gels and identified by MALDI-TOF-TOF MS 29
Table 2. Proteins expressed differently in wild type and mutant when FADD-DED is induced. 36
Table 3. Proteins identified membrane faction. 62
그림1. mFADD-DED (WT, mutants)의 발현에 따른 cell growth 비교.... 23
그림2. mFADD-DED (WT, L45P, F25S)의 발현에 따른 cell growth 비교(small volume Falcon tube).... 24
그림3. mFADD-DED (WT, L45P, F25S)의 발현에 따른 cell growth 비교(large volume baffled culture flask, IPTG 농도변화).... 25
그림4. A representative 2-DE map of proteins from E. coli expressing wild type and mutant FADD-DED.... 27
그림5. The region of the 2-DE gels showing altered expression of proteins in the range of pH4-7.... 28
그림6. Functional classification of protein identified from E. coli cells expressing FADD-DED.... 34
그림7. rpm 에 따른 trxA의 bacterial cell death에 대한 억제효과 비교. 150 rpm으로 shaking하여 aeration 시켰을 때 growth curve를 보여줌. trx + DED (filled circle), DED(open circle) 39
그림8. rpm에 따른 trxA의 bacterial cell death에 대한 억제효과 비교. 190 rpm으로 shaking하여 aeration 시켰을 때 growth curve를 보여줌. trx + DED (filled circle), DED (open circle) 40
그림9. Essentiality가 알려지지 않은 유전자들이 FADD-DED와 co-expression시 E. coli의 성장에 미치는 영향. (dsdA=SDHD) 42
그림10. Essential한 것으로 알려진 유전자들이 FADD-DED에 의한 사멸에 미치는 영향.... 43
그림11. FADD-DED를 co-expression했을 때의 단백질 발현.... 44
그림12. hns 및 slyD 단백질의 발현이 E. coli의 성장에 미치는 영향.... 47
그림13. 단백질 발현 양상.... 48
그림14. 분리된 vector에서의 hns_C와 slyD_N의 co-expression 효과.... 51
그림15. operator region을 포함한 hns와 slyD의 expression test 53
그림16. hns 발현에 대한 antisense hns mRNA vector의 발현 억제효과.... 54
그림17. slyD 발현에 대한 antisense slyD mRNA vector의 발현 억제효과.... 55
그림18. Anti-sense hns RNA가 E. coli 성장에 미치는 영향.... 56
그림19. hns와 slyD anti-sense RNA를 이용한 발현 억제에 따른 E. coli의 성장.... 58
그림20. SDS-PAGE analysis of membrane fraction of FADD-DED expressed cell.... 61
그림21. The effect of FADD-DED on cell growth.... 64
그림22. SDS-PAGE analysis of membrane fraction of FADUDED expressed cell.... 65
그림23. The effect of FADD-DED on E. coli cell death.... 66
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