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보고서 초록
요약문
SUMMARY
CONTENTS
목차
제1장 연구개발과제의 개요 12
제2장 국내외 기술개발 현황 14
제3장 연구개발수행 내용 및 결과 16
제1절 연구 개발 수행 내용 16
1. GFP 발현 유전자 분리와 증폭 16
가. 연구 목적 16
나. 실험방법 및 과정 16
(1) GFP 플라스미드에서 GFP 발현 유전자 분리 16
(2) 절단된 GFP 플라스미드의 전기영동 젤에서의 추출 과정 17
(3) GFP 발현 유전자 증폭 18
2. 양성자 빔 유발 GFP 발현 유전자 제조 18
가. 연구 목적 18
나. 실험방법 및 과정 19
(1) 양성자 빔 조사 조건 확립 19
(2) 양성자 빔 조사 19
3. 양성자 빔 유발 GFP 발현 유전자와 vector의 재조합 20
가. 연구 목적 20
나. 실험방법 및 과정 20
(1) 재조합 반응 조건 확립 20
(2) 재조합 반응 20
4. GFP 발현 조건의 최적화와 재조합된 양성자 빔 유발 함유 GFP 발현 21
가. 연구 목적 21
나. 실험방법 및 과정 21
(1) GFP 플라스미드의 형질전환 21
(2) 형질 전환된 GFP 플라스미드 확보과정 22
(3) GFP 플라스미드를 이용한 형질 주입 23
(4) GFP 발현 확인 25
제2절 연구 결과 26
1. 형질전환된 상업용 GFP 플라스미드를 이용한 GFP 발현 조건의 최적화 확인 26
2. 양성자 빔 Dose에 따른 GFP 발현률 차이 비교 27
3. GFP 센서를 이용한 양성자 빔 유발 DNA손상의 음성 오류 확인 27
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 29
제5장 연구개발결과의 활용계획 31
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 32
제7장 참고문헌 34
표1. GFP 플라스미드의 제한효소 반응 조건 17
표2. GFP 플라스미드의 GFP 발현 유전자 증폭을 위한 PCR 온도조절 18
표3. PCR 반응조건 18
표4. 양성자 빔 조사 조건 19
표5. 양성자 빔 유발 GFP 발현 유전자와 vector의 재조합을 위한 반응 조건 20
그림1. GFP가 발현되는 AcGFPl DNA 분리 과정 16
그림2. 양성자 빔 조사 19
그림3. GFP 플라스미드를 이용한 형질 전환 22
그림4. 형질 전환된 GFP 플라스미드 확보과정. 22
그림5. GFP 플라스미드를 이용한 형질주입 과정. 24
그림6. GFP 발현된 세포의 PI 염색 과정 25
그림7. 형광 현미경(A)과 유동세포계수기(B)로 확인한 상업용 GFP 플라스미드의 GFP 발현률 26
그림8. 양성자 빔의 Dose에 따른 대조군 GPP발현률과의 차이 27
그림9. 양성자 빔의 Dose에 따른 음성 오류 확인 27
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