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SUMMARY
CONTENTS
목차
제1장 연구개발의 개요 19
제1절 연구개발의 목적 및 필요성 21
제2절 연구개발의 범위 23
제2장 국내외 기술 개발 현황 27
제1절 국내·외 연구동향 29
제2절 연구결과의 국내·외 기술개발현황 위치 31
제3장 연구개발 수행 내용 및 결과 33
제1절 벼에서 병원균에 반응하는 MAPK 신호전달체계의 내병성 기능분석 35
제2절 Expression of an active tobacco mitogen-activated protein kinase kinase is involved in multiple defense responses in transgenic rice plants 43
제3절 Mitogen-activated protein kinase cascade in signaling polyamine biosynthesis in plant 58
제4절 염해 내성관련 유전자의 분리 및 기능분석 71
제5절 내재해성 유전자의 벼 형질전환 개체 육성 82
제6절 형질전환 벼의 병해 포장저항성 및 내염성 평가 90
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 95
제1절 연도별 연구목표 달성도 97
제2절 관련분야의 기술발전에의 기여도 100
제5장 연구개발결과의 활용계획 103
제1절 추가연구의 필요성 105
제2절 타 연구에의 응용 106
제3절 기업화 추진 방안 106
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 107
제1절 병원균에 대한 식물 방어 신호 전달 기작에 대한 기술 정보 109
제2절 Mu-TAIL에 의한 기능 유전체 응용에 대한 기술 정보 110
제7장 참고문헌 111
Table 1. Correlation between the inducibility of NtMEK2DD expression and HR like cell death in T0 transgenic rice plants(이미지참조)... 48
표 1. Agrobacterium 및 캘러스와 신초의 형성에 사용한 배지 조성 84
Table 2. PPT 와 Hygromycin을 이용한 저항성 캘러스 선발 86
표 3. BAP 2mg/L, NAA 1mg/L에서의 신초 및 뿌리의 형성 88
표 1. 형질전환벼 흰잎마름병 포장검정 91
표 2/3. 형질전환벼 계통별 수량 조사 92
표 3/4. 형질전환벼 염 농도별 저항성 검정(1-9) 94
그림 1. 클로닝된 OsMEK1, OsMEK2 그리고 OsMEK3의 아미노산 서열을 NtMEK2와 비교한 결과 36
그림 2. pTA7002에 subcloning된 NtMEK2DD 와 OsMEK1DD, OsMEK2DD, OsMEK3DD constructs을 Agrobacterium-mediated transient transformation 한 후 dexamethasone를 처리해 in planta 활성을 확인한 결과(이미지참조) 37
그림 3. NtMEK2DD 와 OsMEK1DD, OsMEK2DD, OsMEK3DD constructs을 Agrobacterium-mediated transient transformation한 후 DEX를 처리한 샘플에서 western으로 단백질을 확인한 결과 (윗 그림)(이미지참조).... 38
그림 4. OsMEK3의 지속적으로 활성을 가진 돌연변이체 유전자가 subcloning된 pET-28(a)+벡터 construct를 BL21(DE3)에 형질전환 후 IPTG로 유도한 다음 histagged 재조합 단백질을 nickel columns을 이용해서 순수분리 하여 SDS-PAGE한 결과(A).... 38
그림 5. OsMEK3WT, OsMEK3DD, OsMEK3KR constructs을 Agrobacterium-mediated transient transformation한 후 DEX를 처리한 샘플에서 western으로 단백질을 확인한 결과 (윗 그림)(이미지참조).... 39
그림 6. OsBWMK1, OsBIMK1 그리고 OsMAPK4의 불활성 돌연변이체를 이용한 벼의 upstream kinase인 OsMEK3와의 상호 관계를 확인한 결과 40
그림 7. 각 형질전환체로부터 genomic DNA PCR를 수행하여 PCR product를 확인 40
그림 8. Anti-flag 항체를 이용해 형질전환체로부터 외래단백질인 OsMEK3 단백질의 발현을 확인한 결과 41
그림 9. In-gel kinase 방법을 이용해 형질전환체로부터 OsMEK3 단백질의 발현에 의한 벼의 하위 MAPK 활성화를 확인한 결과 42
그림 10. DEX를 처리한 NtMEK2KR 와 NtMEK2DD 형질전환 벼에 흰잎마름병원균인 Xanthomonas oryzae pv. oryzae K3을 접종하여 내병성 여부를 확인한 결과(이미지참조).... 42
Supplementary Fig. 1. Construction of NtMEK2 transgenic rice plants callus from Dongjinbyeo (oryza sativa L.) were cocultured with A.... 48
Figure 1. Experssin of NtMEK2DD activates endogenous 48-kDa MBP kinase following DEX treatment in NtMEK2DD transgenic rice plants(이미지참조)... 51
Figure 2. Hydrogen peroxide production precedes the HR-like cell death induced by NtMEK2DD(이미지참조) in transgenic rice plants.... 53
Figure 3. Induction of NtMEK2DD(이미지참조) expression leads to the activation of downstream MAPKs and several groups of defense genes.... 56
Figure 4. A model depicting the tobacco MAPK kinase, NtMEK2, functionally activates the rice endogenous 48-kDa MBP kinase and leads to downstream defense responses. 57
제3절 Mitogen activated protein kinase cascade in signaling polyamine biosynthesis in plant 58
Fig. 1. Polyamine biosynthetic and catabolic pathway in plant. 59
Fig. 2. ACP-based DDRT-PCR and RT-PCR analysis of transgenic NtNEK2DD and NtNEK2KR tobacco plants(이미지참조).... 65
Fig. 3. RT-PCR analysis to evaluate the expression pattern of polyamine biosynthetic enzymes in tobacco leaves that were.... 67
Fig. 4. Elevated putresine and spermine levels in NTNEK2DD(이미지참조) transgenic plantsafter DEX treatment.... 69
Fig. 5. A model depicting the involvement of the NtMEK2-SIPK/WIPK cascade in regulation of polyamine biosynthetic genes in plants. 70
그림 1. 옥수수 SAT79와 AtSAT79 유전자의 아미노산 서열 비교.... 74
그림 2. 염해 처리 후 AtSAT79 유전자의 전사 양상 비교.... 75
그림 3. 염해스트레스에 대한 AtSAT79 과다발현 형질전환체들의 염해 내성 분석.... 76
그림 4. Experssion of stress-regulated genes in 35S :: AtSAT79-7 (79-7OX) 77
그림 5. AtSAT79 과다발현 형질전환체로부터 sucrose에 대한 뿌리 길이 조사.... 78
그림 6. Sucrose 처리 전·후, carbohydrate transporter (CT) 유전자의 전사 양상 비교.... 79
그림 7. EGFP :: AtSAT 79 형질전환체로부터 AtSAT79 단백질의 세포내 위치 분석.... 80
그림 1. 반투명비닐의 sealing film (윗 그림) 대신 micropore sealing tape (아랫 그림)을 사용하여 캘러스를 유기 및 증식한 결과 83
그림 2. PPT와 hygromycin를 조합하여 저항성 캘러스의 선별이 가능함을 보여주고 있는 결과 86
그림 3. 녹색의 캘러스로부터 신초들이 형성되면서 동시에 뿌리가 유기되어 나타난 결과 87
그림 4. 뿌리 형성이 된 형질전환체의 순화 및 경화 88
그림 1. 형질전환 벼에 벼흰잎마름병원균 (Xanthomonas oryzae pv. orzae)을 가위 접종을 한 후 이병성을 확인한 결과 92
그림 2. 내염성 조건을 확립하기 위해 염 농도별로 동진벼의 발아율 조사 93
원문구축 및 2018년 이후 자료는 524호에서 직접 열람하십시요.
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