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Summary
목차
제1장 연구개발과제의 개요 11
제2장 국내외 기술개발 현황 13
2. 국내외 연구동향 13
가. 양송이의 바이러스병 13
1) 라프랑스병 (La France Disease) 13
① 원인 바이러스 13
② 라프랑스병의 감염경로 14
③ 방제대책 14
④ 국내의 발생 사례 14
2) 바이러스 X 15
① 원인 바이러스 15
② 바이러스 X의 전염경로 16
③ 방제대책 16
④ 국내의 발생사례 17
나. 느타리속 버섯의 바이러스병 17
① 원인 바이러스 17
② 전염경로 18
③ 방제대책 19
④ 외국의 발생사례 19
다. 팽이 및 기타버섯의 바이러스병 19
라. 표고버섯의 바이러스병 19
제3장 연구개발수행 내용 및 결과 21
제1 세부과제 : 바이러스 진단용 ELISA 키트 개발 21
1. 표고버섯으로부터의 LeSV의 분리 및 동정 21
1) 바이러스 입자의 분리 21
2) 바이러스 입자의 전자 현미경 관찰 21
3) 바이러스 핵산분리 및 동정 21
4) 바이러스 외피 단백질의 분석 22
5) 복클론 항체(polyclonal antibody)의 생산 22
6) 단클론 항체 제작 22
7) Western blot analysis 23
8) Triple Antibody Sandwich Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay(TAS-ELISA) 24
2. 표고버섯으로부터의 LeHV의 분리 및 동정 27
1) 바이러스 입자의 분리 27
2) 바이러스 입자의 전자 현미경 관찰 27
3) 바이러스 핵산 분리 및 동정 27
4) 바이러스 외피 단백질의 분석 28
5) 복클론 항체(polyclonal antibody)의 생산 28
6) 단클론 항체 제작 28
7) Western blot analysis 29
8) Triple Antibody Sandwich Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay(TAS-ELISA) 29
제2 세부과제 : 바이러스 genome organization 구명 및 특이 primer 개발 33
1. LeSV 유전체 분석 33
1) cDNA 합성 33
2) cDNA cloning과 sequencing 33
3) 염기서열 분석 33
2. LeHV 유전체 분석 36
1) cDNA 합성 36
2) cDNA 클로닝과 염기서열 결정 36
3) 염기서열 분석 36
제3 세부과제 : 표고버섯 바이러스 전이경로 구명 및 무바이러스 종균 개발 39
1) 표고버섯 바이러스 LeSV, LeHV의 RdRp 유전자를 이용한 특이 primer 제작 39
2) 사용 버섯 및 배지 39
3) 단 포자 분리 39
4) 균사에서 total RNA 추출 39
5) 역전사 PCR(Reverse Transcription polymerase chain reaction) 39
6) 역전사 PCR 산물 클로닝과 염기서열 결정 40
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 46
1. 목표달성도 46
2. 관련분야에의 기여도 47
기술적 측면 47
경제·산업적 측면 47
사회·문화적 측면 47
제5장 연구개발결과의 활용계획 48
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 49
제7장 참고문헌 50
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