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보고서 요약서
요약문
SUMMARY
CONTENTS
목차
제1장 연구개발과제의 개요 8
제1절 연구개발의 목적 8
1. 최종 연구 목표 8
2. 세부 연구 목표 8
제2절 연구 개발의 필요성 8
1. 연구개발의 과학기술, 사회경제적 중요성 8
제2장 국내외 기술개발 현황 14
제1절 국내·외 연구현황 및 기존연구의 문제점 14
1. 국내·외 연구현황 14
제3장 연구개발수행 내용 및 결과 18
제1절 연구개발 방법 18
1. 사업의 목표: 폐암 혈액 단백질 바이오마커를 활용한 폐암의 진단방법 개발 18
2. 단클론 항체의 개념과 활용 18
2. 단클론 항체제작 원리 및 방법론 21
3. 단클론 항체제작 원리 및 방법론 22
4. 폐암 진단용 바이오마커를 활용한 프로토타입 진단 키트개발 추진 전략 23
제2절 연구 내용 및 결과 23
1. Epitope Analysis 및 항원의 제작 23
2. 마우스면역 및 하이브라도마 세포의 제작 25
3. 클론의 선별 및 검증작업 26
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 36
제1절 연구개발의 최종목표 36
제2절 연차별 연구개발 목표 및 내용 36
제3절 세부 연구개발 목표 및 달성도 37
제4절 세부 연구개발 목표 및 중요도 37
제2절 관련분야의 기여도 38
1. 기술적 측면 38
2. 경제·산업적 측면 38
제5장 연구개발결과의 활용계획 39
제6장 참고문헌 41
연구개발결과 활용계획서 42
자체평가의견서 46
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I. 제목
혈액 단백질 바이오마커를 이용한 폐암 진단 방법 구축
II. 연구개발의 목적 및 필요성
프로테오믹스의 발전 이후 단백질 바이오마커의 발굴은 가장 활발히 연구되는 분야이다. 단백질은 신체내 상황을 가장 잘 반영하는 생체물질로 임상적 적용이 가장 용이한 혈액 단백질 바이오마커들이 많이 보고된 바 있다. 본 연구를 통하여 21C 프런티어사업, 프로테오믹스 이용기술개발사업의 지원을 통해 발굴한 바이오마커의 진단방법 개발을 위한 단백질 진단 시약인 단클론 항체를 개발 확보하는 것이 본 연구의 목표이다. 나아가 이후 이를 활용한 진단방법의 개발로 이어지도록 할 예정이다.
III. 연구개발의 내용 및 범위
연구 범위: 폐암 바이오마커의 단클론 항체개발
1. 폐암 진단 방법의 개발을 위한 진단시약 개념의 단클론 항체의 개발을 위해서 면역원에 해당 하는 고순도 단백질을 다량 확보.
2. 폐암 진단용 혈액 단백질 바이오마커 특이적인 항체 개발
: 생산된 면역원을 이용하여 마우스에 면역, 하이브리도마 세포생산, 항체의 정제 과정을 통해 각 폐암 진단용 혈액 단백질 바이오마커 특이 단클론 항체 개발
3. 개발된 항체 검증 실시
: 개발된 항체를 이용하여 western blot analysis, Direct ELISA 등의 방법을 통하여 임상시료에서 검증함.
IV. 연구개발결과
본 1년간의 연구는 프로테오믹스 이용기술개발 사업을 통해 발굴된 폐암 바이오마커 중 두 개인, PON1 (Serum Paraoxonase 1)과 QSOX1 (Quescin sulfhydryl oxidasel)을 대상으로 진행 되었다. 각각의 단백질의 Epitope analysis를 통해 면역원으로 사용할 peptide sequence를 선정하였다. PON1와 QSOX1 모두 6개의 펩타이드 종류를 사용하여 마우스를 면역을 실시 하였다. 면역된 마우스의 비장세포를 이용한 하이브리도마세포 제작을 통해 최종적으로 단클론 항체를 생산하는 하이브리도마 클론을 제작하였다. PON1과 QSOX1 각각의 단백질에 대해 반응을 보이는 클론을 선별하여 각 2개의 클론을 확보하고 이를 검증 완료하였다.
V. 연구개발결과의 활용계획
현재 암 치료의 패러다임이 암을 직접적으로 치료하는 항암제의 개발에서 조기발견을 유도, 그에 따른 효과적인 치료와 지속적인 모니터링을 가능하게 하는 방향으로 변하고 있다. 이에 가장 필요한 것이 혈액에서 간편하게 검사할 수 있는 고도화된 진단 방법이며 발굴되는 바이오마커는 이러한 고도화된 진단 방법에 가장 필요한 부분이라고 할 수 있다. 바이오마커를 활용한 진단법의 개발에 있어서 단백질 진단시약인 항체가 필수적이다. 개발된 항체를 활용하여 폐암바이오마커를 검증하는 단백질기반 폐암진단 방법을 개발할 수 있을 것이다.
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