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SUMMARY
CONTENTS
목차
제1장 연구개발과제의 개요 및 성과목표 9
1절 말의 제엽염 9
1. 운동기계 대표질병인 발굽 질환인 제엽염 9
2. 불명확한 기전과 낮은 치료 효과 9
3. 높은 제엽염 발생에 따른 경제적 손실 9
4. 임상 증상 및 혈액학적 소견에 의존한 비특이적 진단법 9
2절 운동 스트레스 10
1. 연구 배경 10
2. 운동에 의한 스트레스 진단 및 생체지표 발굴의 필요성 10
3절 질병 진단지표로써 microRNA의 활용 가능성 11
1. MicroRNA 11
2. 기존 검사법과 비교한 microRNA 검사법의 장점 11
4절 연구 제안 11
제2장 국내외 기술개발 현황 13
1절 국내 연구 현황 13
1. 병리학적 연구 13
2. 생리학적 연구 13
3. miRNA 및 다른 small RNA 관련 연구 13
2절 국외 연구 현황 14
1. 병리학적 연구 14
2. 생리학적 연구 14
3. miRNA 및 다른 small RNA 관련 연구 15
3절 국내·외 기술개발현황에서 차지하는 본 연구의 위치 15
제3장 연구개발수행 내용 및 결과 17
1절 정상 말의 전체 및 장기 특이적 microRNA 동정과 발현 양상 조사 및 정량적 RT-PCR법 확립 17
1. 말 각종 장기로부터 전체 miRNA 염기서열 분석 17
2. microRNA의 정량적 RT-PCR법 확립 20
2절 정상 말의 혈장 내 microRNA 동정과 발현 양상 조사 21
가. 말의 혈액/혈장 추출 및 전체 RNA 및 Quality 분석 21
나. Small RNA cDNA library 제작 및 NGS(Next Generation Sequencing) 21
다. Small RNA annotation 21
라. Identification of microRNAs 21
3절 말 제엽염에 의한 miRNA 발현 변화 및 생체지표 miRNA 발굴 23
가. 말 제엽염 모델 개발 23
나. 제엽염 유발에 의한 말 혈장, 제엽 및 주요 장기 내 miroRNAs 발현 양상 23
다. 제엽 특이적 제엽염의 생체지표 miRNA 발굴 23
4절 정상 말의 혈장 및 각종 장기 내 piRNA 동정과 제엽염 진단을 위한 생체지표 piRNA 발굴 24
가. Identification of piRNAs 25
나. 제엽염 진단을 위한 생체지표 piRNA 발굴 25
5절 정상 말의 운동 스트레스와 관련된 혈액 내 microRNA 및 mRNA 발현 조사 27
1. 말의 혈장 백혈구 유래 microRNAs 27
2. 말의 혈장 백혈구 유래 mRNAs 29
3. 말의 혈장 백혈구 유래 microRNA 및 mRNAs의 통합 분석 32
6절 말의 microRNA microarray 제작 및 검정 34
1. 제엽염에 걸린 질병 상태의 말을 대상으로 microarray를 이용한 microRNA의 발현 조사 34
2. MicroRNA 시료의 분석을 통한 선별 microRNA 유용성 재확보 및 검증 35
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 37
1절 목표 달성도 37
1. 말의 miRNA library 확립 37
2. 말 질병 진단에 유용한 miRNA 선별 및 기초기술 확립 37
3. miRNA microarray을 통한 miRNA 발현 조사 37
4. NGS를 이용한 생체지표 발굴 37
2절 관련 분야에의 기여 44
제5장 연구개발 성과 및 성과활용 계획 45
1절 연구 개발 성과 45
2절 연구 활용 계획 45
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 46
1절 miRNA 및 piRNA 선별 46
2절 miRNA target 예측 46
3절 Taqman assay를 통한 miRNA qRT-PCR 46
4절 Tuxedo 프로토콜 47
제7장 연구시설·장비 현황 49
제8장 연구실 안전관리 이행실적 50
가. 연구실 안전 점검 체계 및 실시 50
나. 교육 훈련 51
다. 연구활동종사자 보험가입 51
라. 실험실 안전사고시 처리 흐름도(서울대학교) 51
제9장 참고문헌 52
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