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[표지]
제출문
보고서 요약서
국문 요약문
영문 요약문〈SUMMARY〉
목차
제1장 연구개발과제의 개요 8
1. 연구개발 목적 8
2. 연구개발의 필요성 8
3. 연구개발 범위 10
제2장 국내외 기술 개발 현황 11
1. 국내 관련 분야 기술개발현황 11
2. 국외 관련 분야 기술개발현황 11
제3장 연구 수행 내용 및 성과 12
1. 역분화 유도를 위한 PBAE 합성 및 유전자 전달 시스템 분석 17
(1) PBAE 합성 및 세 종류의 디아민기로 말단작용기 개질 17
(2) gWIZ-GFP reporter 또는 MC-LGNSO 전달 시스템의 조건 셋업 17
2. gWIZ- GFP reporter를 이용한 transfection 효율 분석 18
3. MC-LGNSO 전달을 위한 조건 최적화 19
4. 역분화가 유도된 세포의 분석 20
5. High- throughput 기술을 통한 분화 유도 지지체 개발 21
(1) High-throughput 기술 개발에 사용할 poly urethane acrylate 기반의 재료 21
(2) High-throughput 유도 지지체 형판 21
(3) 분화를 최적화하기 위한 세포외기질 단백질 도입 22
(4) 분화를 최적화하기 위한 단백질의 농도 22
(5) 지형적 지지체 개발 23
6. 유도 만능줄기세포의 분화 효율 분석 24
7. DNA methylation을 통한 후생학적 변화 확인 25
8. RT- PCR, 면역염색법 분석을 이용한 분화 학인 26
9. Poly urethane acrylate 기반의 고분자 레진을 이용한 세포모양을 모방한 지지체 개발 27
10. 근육세포모방 지지체에서의 성체줄기세포의 반응확인 28
11. 근육세포모방 지지체에서의 성체줄기세포의 근골격계 분화 프로토콜 확립 29
12. Poly ethylene glycol과 히알루론산, chondoritin sulfate기반의 고분자 하이드로겔을 RGD 펩타이드와 함께 이용한 세포지지체 확립 30
13. 3차원 고분자 하이드로겔을 이용한 세포 배양 31
14. 3차원 고분자 하이드로겔 지 지체에서의 연골 세포의 반응확인 32
15. 자성나노입자를 이용한 세포 스페로이드 형태의 복합적 형체 확립 33
(1) 자성나노입자 농도에 따르 세포의 생존율 33
(2) 자성나노입자로 생성된 세포 스페로이드의 형태 확인 34
16. 줄기세포 스페로이드의 연골세포로의 분화 확인 35
17. 스페로이드의 외부 자극으로 인한 세포 영향 연구 36
18. 외부적인 힘인 전기자극을 도입하여 근골격계 분화조건 확립 37
(1) 전기자극을 도입하기 위한 조건 확립 37
(2) 전기자극을 이용하여 근골격계 분화조건 확립 38
19. 전기자극을 도입한 3차원적인 생체적합한 하이드로겔에 포함되어 있는 세포의 분화 39
(1) 생체유래 재료로 만든 하이드로겔의 세포분화 능력 39
(2) 전기자극이 도입된 하이드로겔 안에서 분화 39
20. 생체유래 하이드로겔의 물성을 자극시켜 근골격계 세포로의 분화 유도 41
21. 유도 만능줄기세포 유래 간엽줄기세포 확립 42
22. 유도 만능줄기세포 유래 간엽줄기세포의 골분화 43
(1) In vitro 상에서의 골분화 능력 43
(2) In vivo 상에서의 골 조직 재생 능력을 두개골 결함 동물모델로 확인 44
23. 세포 표면 개질을 통한 효율적인 생체 내 세포 이미징 및 약물전달 시스템 개발 45
(1) 세포 표면 개질 조건 확립 45
(2) 세포 표면 개질을 이용한 나노 입자 코팅 및 약물 전달 조건 확립 45
(3) 생체고분자와 나노 입자 동시 코팅을 통한 생체 내 세포 이미징 및 약물 전달 46
24. 제대정맥혈관내피세포에서부터 골세포로의 직접교차분화 47
(1) 혈관내피세포로 전분화능 Oct4 유전자 전달 및 BMP-4 성장인자 처리 47
(2) 혈관내피세포의 골세포로의 골분화 확인 47
25. graphene oxide가 함유된 하이드로겔의 줄기세포 골분화 유도 기술 확립 48
(1) polyethylene glycol – graphene oxide conjugate 합성 및 지방유래줄기세포 배양 48
(2) GO 하이드로겔의 골분화 유도능 확인 49
26. 자성 나노 입자 도입한 하이드로겔 기반의 LBL(layer- by- layer) 시스템 구축 50
(1) 전기적 상호작용에 의한 LBL(layer by layer) 코팅 50
(2) 패턴의 임베디드 및 세포 얼라인 유도 51
(3) 하이드로겔의 조직 부착성 확인 52
27. 구축된 하이드로겔 기반의 LBL 시스템에 자성나노입자 임베딩 53
제4장 목표 달성도 및 관련 분야 기여도 54
1. 목표 달성도 54
(1) 연구개발의 최종목표 54
(2) 연차별 연구개발 목표 및 내용 54
(3) 계획대비 달성도 56
(4) 위 연구목표 56
2. 관련 분야 기여도 56
제5장 연구개발성과의 활용계획 57
1. 목표 달성도 57
2. 다른 연구에의 응용 및 기업화 추진방안 57
제6장 연구 과정에서 수집한 해외 과학기술 정보 58
제7장 연구개발성과의 보안등급 59
제8장 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 60
제9장 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전 조치 이행 실적 61
제10장 연구개발과제의 대표적 연구 실적 62
제11장 기타 사항 63
제12장 참고문헌 64
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