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[표지]
제출문
보고서 요약서
국문 요약문
영문 요약문〈SUMMARY〉
목차
제1장 연구개발과제의 개요 7
1. 연구개발의 목적 7
2. 연구개발의 필요성 8
3. 연구개발의 범위 11
제2장 국내외 기술 개발 현황 13
제1절 선진국 기술개발 현황 13
제2절 국내 기술개발 현황 16
제3장 연구 수행 내용 및 성과 17
제1절 유용 유전자 도입을 위한 벡터의 설계 및 제작 17
1. Transient 및 episomal 벡터의 설계 및 제작 17
2. Transient 및 episomal 벡터에 의한 유전자 발현과 유지 능력의 비교 17
3. Homing 능력 향상을 위한 유용 유전자들의 선별 및 발현 18
제2절 염색체 변형을 유도하지 않는 유전자 도입 기술 개발 20
1. Minicircle 벡터의 제작 및 정제 20
2. Minicircle 벡터에 의한 Transgene 발현 효율 24
3. Minicircle 벡터에 의한 Transgene 발현의 지속성 증가 27
4. Firefly luciferase 발현 minicircle을 이용한 소동물에서 중간엽 줄기세포 이미징 28
제3절 다기능성 나노컴플렉스를 이용한 유전자 도입 기술 개발 31
1. 다기능성 나노컴플렉스를 이용한 비삽입/지속형 플라스미드의 transfection 31
2. 히알우론산에 의한 노화된 중간엽줄기세포의 세포 접착 능력 회복 확인 32
3. 다기능성 나노 컴플렉스를 이용한 세포 내로의 타겟 유전자 도입 33
제4절 유용 전사인자 도입을 통한 중간엽줄기세포 분화 유도 36
1. 근육 분화를 위한 Engineered 전사인자(MyoD) 제작 36
2. Engineered MyoD를 이용한 중간엽줄기세포의 근육 분화 유도 37
제5절 당사슬 리모델링을 통한 homing 능력 향상 기술 개발 39
1. E-selectin 리간드 형성을 위한 당사슬 리모델링 기술 개발 39
2. 세포 표면의 당사슬 분석을 위한 효과적인 방법 개발 41
3. 근적외선 형광을 이용한 중간엽줄기세포의 손상조직으로의 이동 능력 분석 43
4. 나노컴플렉스 MagFL-PEN을 이용한 중간엽줄기세포의 이동 추적 44
5. Minicircle을 이용한 P/E-selectin 리간드 PSGL1의 발현 45
6. PSGL1 발현된 hAT-MSC에 sLeX 당사슬 형성을 통한 이동 능력 증가 확인 45
7. PSGL1의 발현과 sLeX 당사슬 형성을 통한 이동 능력 증가 확인 46
제6절 Small RNA를 이용한 중간엽줄기세포의 전분화능의 향상 47
1. miRNA를 이용한 중간엽줄기세포의 전분화능 향상 기술 개발 47
2. siRNA를 이용한 중간엽줄기세포의 전분화능 향상 기술 개발 48
제7절 하이드로 겔을 이용한 중간엽줄기세포의 골 조직 재생 50
1. in vivo 조건에서 하이드로 겔을 이용한 중간엽줄기세포의 골재생능 확인 50
2. 고분자 하이드로겔(하이도르겔-3)을 이용한 중간엽줄기세포의 골분화 조건 확립 51
제8절 Minicricle microporation을 이용한 이동 능력 향상 기술 개발 52
1. Minicircle microporation 기반의 비바이러스성 유전자 전달기술 개발 53
2. CXCR4 발현 minicircle을 이용한 중간엽 줄기세포의 손상조직으로 이동능력 향상 확인 54
3. 중간엽줄기세포의 이동에 의한 손상 조직의 빠른 재생 확인 56
제9절 생체주입형 하이드로젤을 이용한 증식/분화 능력 제어 57
1. 다양한 하이드로젤을 이용한 중간엽줄기세포의 골 재생능 확인 57
2. 고분자 하이드로겔-3를 이용한 중간엽줄기세포의 골 분화 조건 확립 57
제4장 목표 달성도 및 관련 분야 기여도 63
1. 목표 달성도 63
2. 관련 분야 기여도 63
제5장 연구개발성과의 활용계획 64
제1절 연구개발결과의 활용방안 64
제2절 기대효과 65
(1) 기술적 측면 65
(2) 경제 산업적 측면 65
제6장 연구 과정에서 수집한 해외 과학기술 정보 66
1. 임상적으로 안전한 역분화 줄기세포 제작을 위해 염색체 비삽입형 벡터 사용 66
2. 세균유래 서열의 제거로 최소화된 진핵세포 발현 카세트인 minicircle 66
3. 세포 내 전달 효율을 높이기 위한 endosomal escape 효율 향상 연구 67
제7장 연구개발성과의 보안등급 68
제8장 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 68
제9장 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전 조치 이행 실적 68
제10장 연구개발과제의 대표적 연구 실적 69
제11장 기타 사항 69
제12장 참고문헌 70
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