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영문 목차
목차
제1장 연구개발과제의 개요 7
1. 연구개발 목적 7
2. 연구개발의 필요성 7
3. 연구개발 범위 7
제2장 국내외 기술 개발 현황 8
제3장 연구 수행 내용 및 성과 9
3.1. 1차년도 연구 개발 수행 내용 및 결과 9
3.1.1. Nanoinjection 시스템 구축 및 단일 세포 내 모델인자 전달 방법 확립 9
3.1.2. Gold nanoparticle 주입을 통한 정량적인 물질 전달을 위한 세포 내부 압력 조사 10
3.1.3. Nanoinjection을 통한 모델인자 세포내 전달 및 단백질 발현 10
3.1.4. (위탁) 역분화인자를 세포내로 전달할 수 있는 나노기술 선별 12
3.1.5. (위탁) 모델인자 전달을 위한 나노입자 제조 14
3.1.6. 단일 체세포에서 나노기술 기반 유전인자 도입 성공 14
3.1.7. Oct4-GFP 체세포를 이용한 역분화 초기의 마커변화를 확인 16
3.1.8. 조건화 배지 가능 인간세포 확보 19
3.1.9. 조건화 배지 내 생물화학적 조성 분석 20
3.2. 2차년도 연구개발수행 내용 및 결과 22
3.2.1. Nanoinjection 시스템을 이용한 단일 세포 내 정량적 유전자 전달 방법 최적화 22
3.2.2. 단일 세포 내 유전자 발현 효율 최적화 조건 확립 23
3.2.3. 형광강도 측정을 통한 단일 세포 내 유전자 발현량의 정량적 평가 24
3.2.4. 단일 세포 내 정량적 유전자 전달에 따른 세포 내 유전자 발현 지속능력 평가 24
3.2.5. 나노 인젝션 시스템의 생체 안전성 평가 25
3.2.6. 나노 인젝션을 통한 단일 세포 단위 다중 유전자의 동시 발현 확인 26
3.2.7. 나노 인젝션 시스템을 통한 정량적 역분화 인자 전달 방법 확립 27
3.2.8. (위탁) 다양한 역분화인자 전달을 위한 나노입자 제조 28
3.2.9. (위탁) 나노전달기술을 이용한 모델인자 및 역분화인자의 인간 체세포 내 전달 능력 평가 28
3.2.10. 나노인젝션을 이용한 단일세포내 유전자 주입조건 개선 30
3.2.11. 나노인젝션을 이용한 역분화 세포 제작 시도 31
3.2.12. 체세포에서 신호전달경로 억제물질 처리를 통한 역분화 기전연구 34
3.2.13. 조건화 배지 유효 시토카인 확인 35
3.2.14. 유호 시토카인이 인갇 역분화 줄기세포 증식에 미치는 기전 규명 38
3.3. 3차년도 연구개발수행 내용 및 결과 42
3.3.1. Poiseuille's Law의 실험적 검증 42
3.3.3. 정량적 유전자 전달에 따른 유전자 발현 확인 및 발현 효율 최적화 43
3.3.4. 단일 세포 내 발현 유전자의 정량적 평가 43
3.3.5. 정량적 유전자 전달량에 따른 형광 발현 지속률 확인 45
3.3.6. 다중 유전자의 상대적 비율에 따른 단일 체세포 내 동시 발현 양상 45
3.3.7. 나노 인젝션을 통한 단일 동물 체세포의 역분화 과정 유도 46
3.3.8. 단일 동물 체세포의 역분화 시 전능성 마커 발현 조사 46
3.3.9. 인간 태반 세포를 통한 역분화 줄기세포 제작 시도 48
3.3.10. (위탁) 나노전달기술을 이용한 인간 체세포 내 역분화인자 전달 능력 평가 49
3.3.11. 나노기술을 이용한 역분화 줄기세포주 구축 및 특성분석 51
3.3.12. 나노기술 기반 역분화 기전을 분석하기 위하여 단일세포의 유전자 발현 분석기술 확보 54
3.3.13. 역분화 줄기세포의 안전성 분석을 위한 역분화 줄기세포의 유전적 안정성 분석기술 확보 56
3.3.14. 조건화 배지 조성 기준 확립 57
3.3.15. 표준화된 조건화 배지 생산을 위한 SOP 확립 58
3.4. 4차년도 연구개발수행 내용 및 결과 60
3.4.1. 체세포의 역분화 과정분석 60
3.4.2. 정량적 역분화 인자 전달에 따른 유전자 별 강도 및 유지율 60
3.4.3. 체세포의 형태변화 및 역분화 과정 확인 61
3.4.4. 정량적인 역분화 인자 전달을 통한 신경줄기세포로 직접 교차분화 유도 61
3.4.5. 정량적인 역분화 인자 전달을 통한 신경줄기세포로 직접 교차분화 유도 63
3.4.6. 정량적인 역분화 인자 전달을 통한 신경줄기세포로 직접 교차분화 유도 63
3.4.7. (위탁) 나노전달기술을 통해 리포펙타민과 역분화인자의 조합 최적화 64
3.4.8. (위탁) 나노전달 기술을 통한 역분화 인자 전달 시 전달기전 분석 64
3.4.9. (위탁) 역분화 인자 전달 후 형성된 유도만능줄기세포의 특성 파악 65
3.4.10. 체세포의 형태변화 및 역분화 줄기세포 제작 시도 66
3.4.11. 나노기술을 이용하여 직접 교차 분화법으로 줄기세포 제작 시도 69
3.4.12. 나노기술을 이용하여 제작된 신경줄기세포의 특성 및 제작기전 분석 71
3.4.13. 조건화 배지에서 인간 역분화 줄기세포 배양 74
3.4.14. 조건화 배지 배양 인간 역분화 줄기세포의 생물학적 특징 및 기전 검증 74
3.5. 5차년도 연구개발수행 내용 및 결과 80
3.5.1. 정량적 인자 전달을 통한 신경아교세포의 직접교차분화 과정 관찰 80
3.5.2. 정량적 차이에 따른 성상아교세포의 직접교차분화 경로 관찰 81
3.5.3. 단일인간체세포의 직접 교차분화를 위한 전달 조건 최적화 82
3.5.4. 단일인간체세포의 직접 교차분화 과정 확인 82
3.5.4. 단일인간체세포의 직접 교차분화 기전 분석 84
3.5.5. (위탁) 효율적이고 안전한 역분화를 위한 동물체세포 내 역분화 인자 나노전달 기술 최적화 84
3.5.6. 나노기술을 이용한 신경아교세포로의 분화조건 확립 86
3.5.7. 나노기술을 이용한 신경아교세포 유도과정의 특성 확인 87
3.5.8. 나노기술을 이용하여 제작된 신경아교세포의 특성 확인 90
3.5.9. 나노기술을 이용하여 제작된 신경아교세포의 생체 내 이식 92
3.5.10. 조건화 배지를 통한 인간 역분화 줄기세포주 수립 및 특징 검증 94
3.5.11. 조건화 배지 생산 인간 역분화 줄기세포의 신경세포 분화 검증 96
제4장 목표 달성도 및 관련 분야 기여도 100
1. 목표 달성도 100
2. 관련 분야 기여도 100
제5장 연구개발성과의 활용계획 101
제6장 연구 과정에서 수집한 해외 과학기술 정보 102
제7장 연구개발성과의 보안등급 103
제8장 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 103
제9장 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전 조치 이행 실적 103
제10장 연구개발과제의 대표적 연구 실적 103
제11장 기타 사항 107
제12장 참고문헌 108
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가상서가
원문구축 및 2018년 이후 자료는 524호에서 직접 열람하십시요.
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