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보고서 요약서
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목차
1. 연구개발과제의 개요 6
2. 연구수행내용 및 성과 8
2-1. 1세부 과제: 생체모사환경 기반 혈액줄기세포 체외 배양 system 개발 8
가. 체내 구조적환경 재현을 위한 scaffold 제작 [1 세부] 8
나. 체내 미세 물리적 환경 재현을 위한 바이오리액터 제작 [1 세부] 19
다. 공배양 시스템 구축 [1 세부] 25
라. Scaffold, 바이오리액터, 공배양을 접목한 혈액줄기세포 배양 확인 [1 세부] 27
2-2. 2세부 과제: 생체 밖 증폭된 혈액줄기세포의 다분화능 연구 37
가. 혈액줄기세포 확보 [2 세부] 37
나. 정제한 CD34+ 세포의 ex vivo expansion에 미치는 다양한 인자들의 효과 [2 세부] 38
다. 혈액줄기세포를 채집한 blood의 동결 보존 및 해동 방법 연구 [2 세부] 38
라. 혈액줄기세포를 채집한 상태 그대로 압력(pressure)과 교반(shaking)이 있는 환경에서 배양 [2 세부] 40
마. 채집한 혈액줄기세포를 expansion media에 희석 후 압력(pressure)과 교반(shaking)이 있는 환경에서 배양 [2 세부] 42
바. In vivo repopulation 연구 [2 세부] 44
사. Ex vivo expansion한 PBMC 유래 CD34+ 세포의 in vitro 및 in vivo 분화능 실험 [2 세부] 46
아. Mid- to high-throughput assay가 가능한 in vitro 다분화능 실험 [2 세부] 47
2-3. 1세부 위탁: 사람혈액줄기세포의 자가증식능 증진을 위한 통합 오믹스 기반 Notch 활성증가 화합물 개발 48
가. 4종의 Notch 활성측정 시스템 개발 [1세부 위탁] 49
나. 천연물(natural compounds)에서 Notch 활성증가 화합물 2종(Luteolin과 Rutaecarpine) 발굴 및 검증 [1세부 위탁] 50
다. FDA 승인 화합물 library에서 Notch 활성증가 화합물 3종(trometamol, carfilzomib, borteozomib) 발굴 및 검증 [1세부 위탁] 54
라. 신규 Notch 활성증가 화합물의 특이성 연구 64
3. 목표 달성도 및 관련 분야 기여도 67
3-1. 목표 67
3-2. 목표 미달성 시 원인(사유) 및 차후대책(후속연구의 필요성 등) 67
4. 연구개발성과의 활용 계획 등 68
4-1. 활용방안 68
4-2. 기술적 기대효과 68
4-3. 사회, 경제적 기대효과 69
붙임: 참고문헌 70
별첨: 주관연구기관의 자체평가 의견서(내용없음) 5
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