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B형 간염 바이러스(HBV)에 의한 감염은 인류의 보건에 대단히 중요한 문제이며, 따라서 HBV에 대한 많은 연구가 수행되어져 왔다. 그러나 HBV 연구에 있어서의 주된 장애요인은 그 감염이 사람과 일부 영장류에 국한된다는 점이다. 본 연구에서는 마우스 간암 세포주인 Hepa-1c1c7 세포를 이용하여 HBV의 감염성 및 그에 따른 염증성 사이토카인인 TNF-a의 발현의 변화를 측정하였다. HBV의 표면항원(HBsAg) 분비는 microparticle enzyme immunoassay를 사용하여 측정하였고, TNF-a mRNA 발현 측정에는 quantitative competitive RT-PCR 방법을 사용하였다. HBV 발현 벡터를 Hepa-1c1c7 세포에 도입시켰을 경우뿐만 아니라 HBV 비리온을 갖고 있는 혈청을 사용하여 Hepa-1c1c7 세포를 감염시켰을 때에도 HBV mRNA 발현 및 HBsAg 분비가 측정되었다. 또한 두 상황 모두에서 TNF-a mRNA 발현이 증가됨을 알 수 있었다. 이러한 결과는 사람과 영장류에 특이적인 HBV가 마우스 간암 세포주인 Hepa-1c1c7 세포도 감염시킬 수 있다는 가능성을 제시한다. 또한 마우스 기원의 Hepa-1c1c7 세포에서도 HBV의 유전자 발현에 필요한 여러 인자들이 존재하며, TNF-a와 같은 사이토카인 유전자 발현을 조절하는 세포 내 기전에 HBV가 영향을 미친다고 할 수 있다. 따라서 마우스 간암 세포주인 Hepa-1c1c7 세포는 HBV 연구를 위한 시험관내 모델로서 사용되어질 수 있을 것으로 보인다.
Infection with hepatitis B virus (HBV) is a major health problem worldwide. Although a tremendous amount has been known about HBV, there have been obstacles in the study of HBV due to the narrow host range of HBV limited to humans and primates. In the present study, we investigated the susceptibility to HBV infection of mouse hepatoma cell line, Hepa-1c1c7. In addition, based on that human hepatocytes infected by HBV increase the expression of the pro-inflammatory cytokine TNF-a, the inducibility of TNF-a expression by HBV in the cells was determined. HBV surface antigen (HBsAg) secretion was measured by the microparticle enzyme immunoassay and steady state mRNA expression was analyzed by quantitative competitive RT-PCR. Transient transfection of Hepa-1c1c7 cells with HBV expression vector resulted in a dose-dependent induction of TNF-a expression. Infection of Hepa-1c1c7 cells with the serum of HBV carrier also increased TNF-a mRNA expression. Both in the transfected and infected cells, HBV mRNA was expressed and significant HBsAg secretion was detected. There was no significant variation in β-actin mRNA expression by HBV. These results demonstrate that HBV is infectious to Hepa-1c1c7 in vitro and the viral infection induces TNF-a expression, which suggests that Hepa-1c1c7, a mouse hepatoma cell line, may be a possible model system for analysis of various molecular aspects of HBV infection.
Infection with hepatitis B virus (HBV) is a major health problem worldwide. Although a tremendous amount has been known about HBV, there have been obstacles in the study of HBV due to the narrow host range of HBV limited to humans and primates. In the present study, we investigated the susceptibility to HBV infection of mouse hepatoma cell line, Hepa-1c1c7. In addition, based on that human hepatocytes infected by HBV increase the expression of the pro-inflammatory cytokine TNF-a, the inducibility of TNF-a expression by HBV in the cells was determined. HBV surface antigen (HBsAg) secretion was measured by the microparticle enzyme immunoassay and steady state mRNA expression was analyzed by quantitative competitive RT-PCR. Transient transfection of Hepa-1c1c7 cells with HBV expression vector resulted in a dose-dependent induction of TNF-a expression. Infection of Hepa-1c1c7 cells with the serum of HBV carrier also increased TNF-a mRNA expression. Both in the transfected and infected cells, HBV mRNA was expressed and significant HBsAg secretion was detected. There was no significant variation in β-actin mRNA expression by HBV. These results demonstrate that HBV is infectious to Hepa-1c1c7 in vitro and the viral infection induces TNF-a expression, which suggests that Hepa-1c1c7, a mouse hepatoma cell line, may be a possible model system for analysis of various molecular aspects of HBV infection.
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참고문헌 (29건) : 자료제공( 네이버학술정보 )
| 번호 | 참고문헌 | 국회도서관 소장유무 |
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| 1 | (1994) CTL access to tissue antigen is restricted in vivo, | 미소장 |
| 2 | (1990) In vitro infection of human hepatoma cells with hepatitis B virus, | 미소장 |
| 3 | (1981) A prospective study of 22 707 men in Taiwan, | 미소장 |
| 4 | (1998) Mechanisms of hepatic toxicity, | 미소장 |
| 5 | (1996) models of viral immunobiology and pathogenesis, | 미소장 |
| 6 | (1993) A reagent for the single-step simultaneous isolation of RNA DNA and proteins from cell and tissue samples, | 미소장 |
| 7 | (1997) Major differences between WHV and HBV in the regulation of transcription, | 미소장 |
| 8 | (1955) A multiple comparison procedure for comparing several treatments with a control, | 미소장 |
| 9 | (1997) Hepatitis B virus X antigen in the pathogenesis of chronic infections and the development of hepatocellular carcinoma, | 미소장 |
| 10 | (1987) The molecular biology of hepatitis B viruses, | 미소장 |
| 11 | (1990) Competitive PCR for quantitation of mRNA A guide to methods and applications, Academic Press Inc | 미소장 |
| 12 | (1994) Cytotoxic T lymphocytes inhibit hepatitis B virus gene expression by a noncytolytic mechanism in transgenic mice, | 미소장 |
| 13 | (1996) To kill or to cure options in host defense against viral infection, | 미소장 |
| 14 | (1995) High level hepatitis B virus replication in transgenic mice, | 미소장 |
| 15 | (1998) The hepatitis B virus X protein up-regulates tumor necrosis factor alpha gene expression in hepatocytes, | 미소장 |
| 16 | (1992) Host and tissue tropism of hepatitis B virus, | 미소장 |
| 17 | (1996) The epidemiology of hepatitis viruses B, | 미소장 |
| 18 | (1996) Apoptosis observed in peripheral T lymphocytes from patients with chronic hepatitis B, | 미소장 |
| 19 | (1998) Viral stategies of immune evasion, | 미소장 |
| 20 | (1987) Production of hepatitis B virus particles in HepG2 cells transfected with cloned hepatitis B virus DNA, | 미소장 |
| 21 | (1989) In vitro propagation of human hepatitis B virus in a rat hepatoma cell line, | 미소장 |
| 22 | (1981) Tumourigenicity in nude mice of a human hepatoma cell line containing hepatitis B virus DNA, | 미소장 |
| 23 | (1985) Comparative sequence analysis of duck and human hepatitis B virus genomes, | 미소장 |
| 24 | (1982) Replication of the genome of a hepatitis B-like virus by reverse transcription of an RNA intermediate, | 미소장 |
| 25 | (1997) Receptor-mediated entry of hepatitis B virus particles into liver cells, | 미소장 |
| 26 | (1986) In vitro experimental infection of primary duck hepatocyte cultures with duck hepatitis B virus, | 미소장 |
| 27 | (1986) Experimental infection of the woodchuck, | 미소장 |
| 28 | (2000) Receptor recognition by a hepatitis B virus reveals a novel mode of high affinity virus- receptor interaction, | 미소장 |
| 29 | (1993) Construction of recombinant RNA templates for use as internal standards in quantitative RT-PCR, | 미소장 |
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