표제지
요약
목차
Abbreviations 11
Ⅰ. 서론 12
Ⅱ. 재료 및 방법 15
1. 암세포 배양 및 시료의 처리 15
2. MTT assay에 의한 세포 성장억제 조사 15
3. Flow cytometry를 이용한 세포주기 분석 16
4. Reverse transcriptase-polymerase chain reaction(RT-PCR) 분석 16
5. 단백질의 분리,전기영동 및 Western blotting 19
6. Hematocytometer를 이용한 세포 생존률의 측정 22
7. DAPI staining을 통한 세포핵의 형태 관찰 22
8. DNA fragmentation의 분석 23
9. Prostaglandin E₂ 생성율의 측정 24
Ⅲ. 결과 및 고찰 25
1. 蟾?의 本草學的고찰 25
2. 蟾?의 항암작용에 대한 고찰 26
3. T24인체방광암세포의 증식에 미치는 蟾? 추출물의 영향 27
4. 세포주기 분포에 미치는 蟾? 추출물의 영향 29
5. Cyclins및 Cdks의 발현에 미치는 蟾? 추출물의 영향 32
6. p53및 Cdkinhibitors의 발현에 미치는 蟾? 추출물의 영향 36
7. Wee1및 Cdc25C의 발현에 미치는 蟾? 추출물의 영향 38
8. T24인체방광암세포의 생존율에 미치는 蟾? 추출물의 영향 40
9. T24인체방광암세포의 apoptosis유발에 미치는 蟾? 추출물의 영향 42
10. T24인체방광암세포의 sub-G1빈도에 미치는 蟾? 추출물의 영향 44
11. Bcl-2 family의 발현에 미치는 蟾? 추출물의 영향 46
12. Caspases,PARP및 β-catenin의 발현에 미치는 蟾? 추출물의 영향 49
13. cIAP family의 발현에 미치는 蟾? 추출물의 영향 52
14. Cyclooxygenase의 발현에 미치는 蟾? 추출물의 영향 54
Ⅳ. 결론 57
참고문헌 59
Abstract 75
감사의 글 77
Table Ⅰ. Gene-specific primers for RT-PCR 17
Table Ⅱ. Gene-specific primers for RT-PCR 18
Table Ⅲ. Antibodies used in the present study 20
Table Ⅳ. Antibodies used in the present study 21
Table Ⅴ. Fractions of each cell cycle phase of T24 human bladder carcinoma cells cultured in the presence or absence of various concentration of EBV for 48 h 31
Fig.1 Anti-proliferative effect and morphological changes in T24 human bladder carcinoma cells following incubation with extract of Bufonis Venenum(EBV) 28
Fig.2 DNA-flourescence histogram of T24 human bladder carcinoma cell nuclei after treatment with EBV 30
Fig.3 Effects of EBV treatment on the levels of cyclin A and cyclin B1 in T24 human bladder carcinoma cells 34
Fig.4 Effects of EBV treatment on the levels of Cdc2 and Cdk 2 in T24 human bladder carcinoma cells 35
Fig.5 Induction of Cdk inhibitor p21 by EBV treatment inT24 human bladder carcinoma cells 37
Fig.6 Down-regulation of Cdc25C expression by EBV treatment in T24 human bladder carcinoma cells 39
Fig.7 Effects of EBV on the viability and morphology of T24 human bladder carcinoma cells 41
Fig.8 EBV induces apoptosis in T24 human bladder carcinoma cells 43
Fig.9 EBV increases sub-G1 cell populations in T24 human bladder carcinoma cells 45
Fig.10 Induction of Bax,and inhibition of Bcl-2 and Bcl-XS/L by EBV treatment in T24 human bladder carcinoma cells 48
Fig.11 Effects of EBV on the levels of caspase-3, caspase-9, PARP and β-catenin expression in T24 human bladder carcinoma cells 51
Fig.12 Effects of EBV in the levels of cIAP family members in T24 human bladder carcinoma cells 53
Fig.13 Down-regulation of COX-2 expression by EBV treatment in T24 human bladder carcinoma cells 55
Fig.14 Inhibition of PGE₂ production by EBV treatment in T24 human bladder carcinoma cells 56