Z-DNA binding protein 1 (ZBP1)은 최근 cytosolic DNA sensor로서 작용함이 알려졌으며, DNA-dependent activator of IFN regulatory factors (DAI)로도 불린다. ZBP1은 mice에서 IRF3와 NF-kB를 활성화시킴으로써 type I interferon (IFN)의 생성을 유도할 수 있음이 보고된 바 있는데, 이러한 ZBP1의 cytosolic DNA sensor로서의 기능은 몇몇 mouse 및 인간 세포에서 작동하지 않는 것으로 보고되었다. 따라서 이번 연구에서 인간 세포에서의 NF-kB 신호전달 과정에 ZBP1이 어떠한 영향을 미치는지 알아보았다. Co-immunoprecipitation 분석을 통해 human embryonic kidney (293T)와 hepatocellular carcinoma (HepG2) 세포에서 ZBP1과 receptor-interacting protein kinase 1 (RIP1)이 상호결합 함을 확인하였다. 이러한 상호결합은 RIP homotypic interaction motifs (RHIM)를 통해 이루어짐을 알 수 있었다. 또한 indirect immunofluorescence assay (IFA)를 통해 ZBP1과 RIP1이 colocalization 함을 확인할 수 있었는데 이러한 colocalization도 역시 RHIM에 의존적이었다. Reporter assay를 통해 293T 세포에서 ZBP1이 dose-dependent 하게 NF-kB를 활성화시키는 것을 확인하였고, 이러한 ZBP1에 의한 NF-kB 활성화는 ZBP1과 RIP1을 함께 발현시킬 경우 상승효과를 보임을 확인하였다. 하지만 RIP1 ΔRHIM mutant를 사용할 경우 이러한 효과를 관찰할 수 없었다. B-DNA를 처리하여 세포에 자극을 준 경우 ZBP1-RIP1 동시발현은 RHIM 의존적으로 NF-kB를 매우 높은 수준으로 활성화시킴을 확인하였다. HepG2 세포에서도 유사한 reporter assay를 수행해 본 결과, 293T 세포와는 다르게 transient한 ZBP1 발현은 NF-kB를 활성화시키지 못하였으며 ZBP1과 RIP1을 함께 발현시켰을 때도 NF-kB 활성에는 아무런 영향을 주지 못했다. 또한 세포에 B-DNA를 처리하거나 Herpes simplex virus type-1 (HSV-1)을 감염시켜 자극을 준 상황에서도 ZBP1이나 RIP1의 과발현은 NF-kB 활성에 아무런 영향을 주지 않았다. 본 연구의 결과로부터 293T와 HepG2 cell에서 ZBP1은 RIP1과 RHIM을 통해 상호결합 하는 것을 알 수 있었다. 하지만 이들 결합은 293T 세포에서는 NF-kB의 활성화에 관여하지만 HepG2 세포에서는 크게 영향을 주지 않는 것을 알아냄으로써 인간세포에서 ZBP1-RIP1에 의한 NF-kB 활성화가 세포 type에 특이적으로 일어남을 알 수 있었다. .