표제지
목차
1. 서론 14
2. 재료 및 방법 18
2.1. 시험물질 18
2.2. 세포 배양 및 동물 사육 18
2.3. SAS의 물리화학적 특성 분석 19
2.4. SAS의 용해도 분석 21
2.4.1. OECD TG 105에 따른 water solubility 조건 21
2.4.2. ALF, SPF 및 세포배양액 조건 21
2.4.3. 위장관 조건 23
2.5. SAS의 정량분석을 위한 전처리법 26
2.6. ICP-AES 분석 27
2.7. Cloud Point Extraction 27
2.8. 인간 장 상피세포에서 SAS의 세포 내 유입 성상 연구 28
2.9. In vitro intestinal transport 모델을 이용한 장내 수송 성상 연구 28
2.10. 단회 경구투여 후 흡수 동태 연구 29
2.11. 28일 반복 경구투여 후 90일 관찰 시험을 통한 조직분포 연구 30
2.12. TEM-EDS를 이용한 SAS의 조직 내 성상(fate) 분석 30
2.13. SAS의 28일 반복 경구독성시험 31
2.13.1. 일반증상 31
2.13.2. 혈액학적 및 혈청생화학적 검사 32
2.13.3. 조직병리학적 검사 32
2.14. In vitro 대식세포에서 SAS의 세포독성 및 활성화 영향 연구 32
2.14.1. 단기 세포 성장 저해 시험(WST-1 assay) 32
2.14.2. 세포막 손상 확인 시험(LDH release assay) 33
2.14.3. 세포 내 활성산소종 분석(ROS generation assay) 34
2.14.4. 염증성 사이토카인 분석 34
2.15. In vivo SAS의 대식세포 내 유입 및 활성화 영향 연구 35
2.15.1. SAS의 세포 내 유입 35
2.15.2. 염증성 사이토카인 분석 36
2.16. 통계 분석 36
3. 결과 및 고찰 37
3.1. 제조방법에 따른 SAS의 구성입자 크기, 결정성 및 비표면적 37
3.2. 제조방법에 따른 SAS의 표면전하 및 수분산 입자크기 40
3.3. 식품첨가물 SAS의 정량분석법 확립 44
3.4. 제조방법에 따른 SAS의 용해도 분석 50
3.4.1. OECD TG 105 water solubility 조건 50
3.4.2. ALF, SPF 및 세포배양액 조건 52
3.4.3. 위장관 조건 54
3.5. 용해도 조건별 SAS의 수분산 입자크기 57
3.6. CPE를 이용한 SAS의 성상 분석법 확립 59
3.7. 인간 장 상피세포에서 SAS의 세포 내 유입 성상 연구 62
3.8. In vitro intestinal transport 모델을 이용한 장내 수송 성상 연구 64
3.9. 단회 경구투여 후 흡수 동태 연구 68
3.10. 28일 반복 경구투여 후 90일 관찰 시험을 통한 조직분포 연구 71
3.11. TEM-EDS를 이용한 SAS의 조직 내 성상 연구 75
3.12. SAS의 28일 반복 경구독성시험 79
3.12.1. 일반증상 79
3.12.2. 혈액학적 및 혈청생화학적 검사 83
3.12.3. 조직병리학적 검사 86
3.13. In vitro 대식세포에서 SAS의 세포독성 및 활성화 영향 연구 90
3.13.1. SAS의 세포독성 90
3.13.2. SAS의 염증성 사이토카인 유발 영향 92
3.14. In vivo 대식세포에서 SAS의 세포 내 유입 및 활성화 영향 연구 94
3.14.1. SAS의 세포 내 유입 94
3.14.2. SAS의 염증성 사이토카인 유발 영향 96
4. 결론 98
5. 참고문헌 102
ABSTRACT 111
Table 1. Composition of artificial lysosomal fluid (ALF). 22
Table 2. Composition of simulated digestion fluids of the in vitro... 25
Table 3. Particle fractions and hydrodynamic diameters of fumed SAS... 43
Table 4. Validation parameters of Si standard solution 45
Table 5. Validation parameters of fumed SAS. 46
Table 6. Validation parameters of precipitated SAS. 47
Table 7. Validation parameters of fumed SAS in liver tissue 48
Table 8. Validation parameters of precipitated SAS in liver tissue. 49
Table 9. Definitions of solubility terms suggested by the SCCS based... 51
Table 10. Recoveries and transport amounts (%) of precipitated SAS... 66
Table 11. Toxicokinetic parameters and oral absorption (%) after... 70
Table 12. Absolute organ weight of rats after oral administration of... 81
Table 13. Relative organ weight of rats after oral administration of... 82
Table 14. Hematological and coagulation time values of rats after oral... 84
Table 15. Serum biochemical values of rats after oral administration of... 85
Table 16. Histopathological findings of rats after oral administration of... 87
Figure 1. (A) SEM images, (B) TEM images, and (C) size distribution... 38
Figure 2. (A) XRD pattern and (B) BET specific surface areas of... 39
Figure 3. (A) Zeta potential and (B) hydrodynamic diameter of fumed... 42
Figure 4. Calibration curve for determination of Si standard solution by... 45
Figure 5. Calibration curve for determination of fumed SAS by... 46
Figure 6. Calibration curve for determination of precipitated SAS by... 47
Figure 7. Calibration curve for determination of fumed SAS in liver... 48
Figure 8. Calibration curve for determination of precipitated SAS in... 49
Figure 9. Dissolution properties of fumed SAS and precipitated SAS in... 51
Figure 10. Dissolution properties of fumed SAS and precipitated SAS... 53
Figure 11. Dissolution properties of fumed SAS and precipitated SAS... 56
Figure 12. Hydrodynamic diameters of fumed SAS and precipitated... 58
Figure 13. Recovery (%) of SAS particles, Si ion, and total Si levels... 60
Figure 14. Recovery (%) of SAS particles, Si ion, and total Si levels... 61
Figure 15. Intracellular uptakes and fates of SAS in Caco-2 cells... 63
Figure 16. Intestinal transports and fates of SAS using (A) Caco-2... 67
Figure 17. Plasma concentration-time profile of (A) fumed SAS and... 69
Figure 18. Tissue distribution for repeated 28 days oral administration... 72
Figure 19. Tissue distribution for repeated 28 days oral administration... 73
Figure 20. Tissue distribution of SAS in the liver after repeated 28... 74
Figure 21. TEM images of (A) liver tissue and (B) kidney tissue after... 77
Figure 22. EDS element analysis of day 28 (28 d) liver tissue after... 78
Figure 23. Changes in (A) body weight, (B) feed consumption and (C)... 80
Figure 24. Histopathological examination images of organs (liver,... 88
Figure 25. Histopathological examination images of organs (spleen,... 89
Figure 26. Effect of fumed SAS and precipitated SAS on (A) cell... 91
Figure 27. Production of pro-inflammatory cytokines in Raw 264.7 cell... 93
Figure 28. (A) Fumed SAS and (B) precipitated SAS uptakes by... 95
Figure 29. Production of pro-inflammatory cytokines in plasma... 97