표제지
목차
Part I. Cosmetic nutrients의 광감작 활성 및 riboflavin과의 상호작용 평가 14
1. 서론 15
2. 재료 및 방법 17
2.1. 실험재료 17
2.2. Cosmetic nutrients 17
2.3. 감광활성 평가 17
2.4. Reactive oxygen species (ROS) 측정 18
2.5. Riboflavin 광안정성 분석 18
2.6. Hydrogen peroxide (H₂O₂) 측정 19
2.7. 지질과산화물 측정 19
2.8. 통계처리 20
3. 결과 및 고찰 22
3.1. 형광등 조사에 의한 cosmetic nutrients의 광 반응성 평가 22
3.2. 형광등 조사에 하에 cosmetic nutrients에 의한 ROS 생성 34
Part II. 빛에 의한 세포 배양배지의 광활성화 현상 및 배양 조건에 따른 세포 광독성 유도 평가 43
1. 서론 44
2. 재료 및 방법 46
2.1. 실험재료 46
2.2. 세포 배양배지 46
2.3. 세포주 및 세포 배양 46
2.4. 조도 설정 47
2.5. DCFH를 이용한 감광활성 평가 47
2.6. 세포독성 평가 48
2.7. Hydrogenperoxide(H₂O₂) 측정 48
2.8. 통계 처리 49
3. 결과 및 고찰 51
3.1. 다양한 광원 하에서 세포 배양배지의 감광활성 평가 51
3.2. 빛 조사 시 세포 배양배지에서의 피부세포 광독성 유도 58
3.3. 서로 다른 세포 배양배지에서의 세포독성과 ROS 생성 수준 65
Part III. Riboflavin과 광분해산물의 감광활성 및 피부세포에 대한 광독성 평가와 chlorogenic acid의 보호 효과 71
1. 서론 72
2. 재료 및 방법 76
2.1. 실험재료 76
2.2. 세포주 및 세포 배양 76
2.3. 감광활성 평가 76
2.4. 지질과산화물 측정 77
2.5. Hydrogen peroxide (H₂O₂)생성량 측정 78
2.6. Fenton reaction 유도 78
2.7. 산화방지활성 분석 78
2.8. 세포독성 평가 79
2.9. 세포 내·외 ROS 측정 80
2.10. qRT-PCR 80
2.11. 통계처리 81
3. 결과 및 고찰 82
3.1. Riboflavin 및 광분해산물의 감광활성 평가 82
3.2. Riboflavin 및 광분해산물의 지질과산화 및 산화방지활성 변화 91
3.3. Riboflavin 및 광분해산물에 의한 피부세포 광독성 유도 102
3.4. 광 조사 시 riboflavin에 의한 염증반응 유도 110
3.5. Riboflavin의 감광활성에 미치는 chlorogenic acid의 영향 114
3.6. Chlorogenic acid의 광독성 보호효과 117
참고문헌 120
ABSTRACT 128
Table 1. The list of the cosmetic nutrients used in the present study 21
Table 2. Major constituent of the cell culture medium used in the present study. 50
Table 3. The PCR primers used for detecting inflammatory markers 81
Fig. 1. Evaluation of photosensitizing activity of cosmetic nutrients using the... 27
Fig. 2. Changes in formazan degradation response by riboflavin in the... 29
Fig. 3. Changes in formazan decolorization activity of riboflavin by... 30
Fig. 4. Effect of riboflavin on folic acid stability under light. 31
Fig. 5. Changes in photo-stability of riboflavin by pantothenic acid,... 33
Fig. 6. H₂O₂ generation from pantothenic acid, pyridoxine, and folic acid in... 38
Fig. 7. Modulation of ROS generation from riboflavin by pantothenic acid,... 40
Fig. 8. Effects of riboflavin with pyridoxine or folic acid on lipid... 42
Fig. 9. Evaluation of ROS levels generated in different media under different lights. 55
Fig. 10. Changes in ROS levels generated in DMEM media by riboflavin and... 57
Fig. 11. Changes in HaCaT viability by different media and by different... 62
Fig. 12. Effects of erythrosine B and protoporphyrin IX in different media on... 64
Fig. 13. Induction of HaCaT cytotoxicity in the blue LED-irradiated media. 67
Fig. 14. Changes in H₂O₂ levels in blue LED irradiated-media and in mixtures... 69
Fig. 15. Changes in cytotoxic properties of HaCaT cultured in light-irradiated... 70
Fig. 16. Structures of riboflavin (A), lumichrome (LC) (B), lumiflavin (LF) (C)... 75
Fig. 17. Evaluation of photosensitizing activity of riboflavin and its... 85
Fig. 18. Evaluation of ROS generation from riboflavin and its... 87
Fig. 19. Effects of riboflavin and its photo-degradation products on NBT... 89
Fig. 20. Effects of riboflavin and its photo-degradation products on H₂O₂... 90
Fig. 21. Effects of riboflavin and its photo-degradation products on lipid... 96
Fig. 22. Effects of riboflavin and its photo-degradation products on ABTS... 97
Fig. 23. Effects of riboflavin and its photo-degradation products on lipid... 99
Fig. 24. Changes in Fe2+ chelating activity of riboflavin, lumichrome, and...[이미지참조] 101
Fig. 25. Induction of HaCaT phototoxicity by riboflavin and its... 106
Fig. 26. Induction of HDF phototoxicity by riboflavin and its photo-degradation... 108
Fig. 27. Generation of ROS by riboflavin and its photo-degradation products in... 109
Fig. 28. Induction of pro-inflammatory cytokines in HaCaT by riboflavin under light. 113
Fig. 29. Changes in TTC formazan decolorization activity of riboflavin by... 115
Fig. 30. Effects of chlorogenic acid on riboflavin-induced ROS generation... 116
Fig. 31. Effects of chlorogenic acid on riboflavin induced-phototoxicity of HaCaT. 118
Fig. 32. Effects of chlorogenic acid on riboflavin induced-phototoxicity of HDF. 119