표제지
목차
ABSTRACT 12
Ⅰ. 서론 13
Ⅱ. 실험 재료 및 방법 17
A. 유산균 및 시료조제 17
B. 세포배양 18
1. YD-38 18
2. 구강 병원성 세균 18
C. Minimum Inhibitory Concentration 측정 19
D. 생물막 분석 20
E. Gingipain 활성 억제 측정 21
1. P. gingivalis 막 결합 gingipain (CAG)과 분비 gingipain (CFG) 효소액 제조 21
2. 시약 21
3. Gingipain 활성 억제측정 22
F. F. nucleatum의 부착유전자 fadA와 radD 발현 억제활성 23
1. F. nucleatum의 total RNA 분리 23
2. cDNA 합성 23
3. Quantitative real time PCR 23
G. Quantitative real time PCR (qRT-PCR)을 이용한 전염증성 cytokine의 유전자 발현분석 26
1. YD-38 세포에 F. nucleatum의 감염 및 total RNA 분리 26
2. cDNA 합성 26
3. Quantitative real time PCR 26
H. ELISA assay에 의한 IL-8 정량 29
Ⅲ. 결과 30
A. WC402와 LP412의 구강병원성 세균에 대한 항균효과 30
B. WC402와 LP412의 S. mutans의 생물막 형성 억제 효과 32
C. P. gingivalis의 독성인자 gingipain 효소 억제 효과 34
D. F. nucleatum의 부착인자 FadA와 RadD의 유전자 발현 억제 효과 37
E. F. nucleatum에 의해 유도된 IL-8의 유전자 발현 억제 효과 39
F. F. nucleatum으로 유도한 IL-8 단백질 합성 억제 효과 41
Ⅳ. 토의 43
Ⅴ. 결론 47
Ⅵ. 참고문헌 48
Ⅶ. 국문초록 52
Tabel 1. Primer sequences for adhesin genes for qRT-PCR analysis 25
Tabel 2. Primer sequences for IL-8 qRT-PCR analysis 28
Tabel 3. Minimum inhibitory concentration (MIC) of WC402 and LP412 against oral pathogens 31
Figure 1. Inhibition of biofilm formation of S. mutans by WC402 and LP412 (* p<0.01 , ** p<0.05) 33
Figure 2. Inhibition of Kgp activity by WC402 and LP412. Kgp : Lysine specific gingipain, CAG : cell associated gingipain, CFG : cell free gingipain... 35
Figure 3. Inhibition of Rgp activity by WC402 and LP412. Rgp : Arginine specific gingipain, CAG : cell associated gingipain, CFG : cell free gingipain... 36
Figure 4. Inhibition of F. nucleatum adhesin FadA and RadD mRNA expression by WC402 and LP412 (■FadA □RadD)[이미지참조] 38
Figure 5. Inhibition of IL-8 mRNA expression by WC402 and LP412 40
Figure 6. Inhibition of IL-8 production by WC402 and LP412 42