중증 급성 호흡기 증후군 코로나바이러스 2(SARS-CoV-2)로 인한 COVID-19 대유행은 전 세계적인 공중 보건 문제가 된다. SARS-CoV-2의 게놈이 숙주 세포에서 발현될 때, pp1a와 pp1ab이라고 불리는 단백질들은 바이러스 게놈에서 유래된 단백질 분해 효소에 의해 처리되어 16개의 비구조 단백질을 생성한다. 코로나바이러스 NSP13으로 알려진 이러한 단백질 중 하나는 수퍼패밀리 1B 헬리케이즈에 속하며 NTP 의존적인 방식으로 5'에서 3' 방향으로 DNA 또는 RNA를 풀 수 있다. RNA 바이러스는 바이러스 RNA의 적절한 복제 및 전사를 보장하기 위해 바이러스 게놈에서 유래된 RNA 헬리케이즈에 크게 의존하며, 바이러스 생활사 주기의 다양한 단계에서 바이러스를 치명적으로 만든다. 본 논문에서는 NSP13의 구조와 기능을 연구하기 위해 코로나바이러스간 NSP13의 구조, 활성 및 억제제를 비교했다. 그리고 SARS-CoV-2 NSP13 단백질을 발현 및 정제하여 FRET 기반 효소 분석법을 개발하였다. NSP13 헬리케이즈 활성은 기질 dsDNA, ATP 및 NSP13의 농도에 따라 dsDNA의 풀림 활성을 통해서 모니터링하였다. 분석 결과는 농도 의존적이며 재현 가능한 활성을 제공한다. 또한, 본 연구에서는 선형 및 stem-loop 구조의 dsDNA간의 풀림 활성을 비교했다. Stem-loop 구조가 있는 dsDNA에 대해서는 극적으로 헬리케이즈 활성이 저해되는 것을 관찰할 수 있었다. 2차 구조 RNA, 예를 들어, stem-loop 혹은 hairpin 구조는 RNA 게놈의 복제와 전사에 영향을 끼친다. NSP13에 관하여 개발된 FRET 기반 분석법을 화학 라이브러리에서 헬리케이즈의 억제제를 스크리닝할 수 있으며, 헬리케이즈 활성의 촉매 메커니즘을 자세히 연구할 수 있다. SARS-CoV-2 NSP13 헬리케이즈에 대한 포괄적인 이해는 SARS-CoV-2의 복제과정에서 NSP13의 본질적인 역할을 설명하는 데 도움이 될 것이다.