표제지
목차
ABSTRACT 12
Ⅰ. 서론 14
1. 이론적 배경 14
1.1. 락토바실러스의 개요와 효능 14
1.2. 피부에 긍정적 영향을 미치는 락토바실러스 사례 16
1.3. 락토바실러스 관련 연구동향 18
1.4. 연구의 필요성과 목적 20
Ⅱ. 연구사 21
1. 유산균 동정 21
2. 유전자적 배경 23
2.1. TRP-1, TRP-2, MITF 23
2.2. HAS(Hyaluronan synthase) 24
2.3. MMPs(Matrix Metalloproteinases) 25
2.4. COL1A1(Collagen type I alpha 1 chain) 26
3. 항산화 27
3.1. 내재적 방어기전(Endogenous defense system) 29
3.2. 외재적 방어기전(Exogenous defense system) 29
4. 미백 30
5. 보습 32
5.1. 베타글루칸(Beta-glucan) 32
5.2. 히알루론산(hyaluronic acid) 34
5.3. 콜라겐(Collagen) 35
6. 주름 36
Ⅲ. 실험재료 및 방법 38
1. 실험재료 38
1.1. 재료 38
1.2. 사용시약 38
1.3. 세포배양 39
1.4. 사용기기 40
1.5. 통계 처리 40
2. 실험방법 41
2.1. 균주 선정 과정 41
2.2. DPPH radical 소거능 측정 43
2.3. ABTS radical 소거능 측정 43
2.4. 총 폴리페놀 함량 측정 43
2.5. Tyrosinase 저해 활성 44
2.6. MTT assay 44
2.7. Melanin 생성 억제능 측정 45
2.8. TRP-1, TRP-2, MITF 유전자 발현 측정 45
2.9. HAS-2 유전자 발현 측정 46
2.10. MMP-1 유전자 발현 측정 46
2.11. COL1A1 유전자 발현 측정 47
Ⅳ. 연구결과 48
1. 균주 동정 48
1.1. 균주 분리 및 동정 결과 48
1.2. 균주 선정 결과 50
1.3. 16S rRNA 유전자 염기서열 확인 51
1.4. 배지 적합성 실험결과 52
1.5. 분리 균주 생장 특성 53
1.6. 최적 배양조건에 따른 성장률 측정 결과 55
2. DPPH radical 소거능 측정 결과 56
3. ABTS radical 소거능 측정 결과 58
4. 총 폴리페놀 함량 측정 59
5. Tyrosinase 저해 활성 60
6. B16F0 세포에 대한 세포독성 61
7. Melanin 생성 억제능 측정 결과 62
8. TRP-1, TRP-2, MITF 유전자 발현 효과 64
9. HaCaT 세포에 대한 세포독성 68
10. HAS-2 유전자 발현 효과 69
11. HDF 세포에 대한 세포독성 70
12. MMP-1 유전자 발현 효과 71
13. COLA1 유전자 발현 효과 73
Ⅴ. 고찰 74
Ⅵ. 결론 77
참고문헌 79
국문초록 89
Table. 1. The composition of the culture media used. 39
Table. 2. Micrubial isolated from Anemonastrum narcissiflorum. 49
Table. 3. Plate count results for culture media types. 52
Fig. 1. Proposed metabolic pathways of Lactobacillus reuteri 16
Fig. 2. Pathway antioxidant system in the management of oxidativestress. 28
Fig. 3. Termella fuciformis, Glucan-HS. 33
Fig. 4. Growth curve of 5 type Lactobacillus isolated fromAnemonastrum narcissiflorum. 50
Fig. 5. Lactobacillus Kunkeei sequence. 51
Fig. 6. Culture media suitability experiment Results of Lactobacillus Kunkeei. 52
Fig. 7. Growth rate of Lactobacillus Kunkeei by temperature. 53
Fig. 8. Growth rate of Lactobacillus Kunkeei by pH. 54
Fig. 9. Results of measurement of growth rate according to optimal culture media conditions of Lactobacillus Kunkeei. 55
Fig. 10. The DPPH radical scavenging activity of LactobacillusKunkeei culture fluid. 57
Fig. 11. The ATBTS radical scavenging activity of Lactobacillus Kunkeei culture fluid. 58
Fig. 12. Effect of Lactobacillus Kunkeei on Tyrosinase inhibitory activity. 60
Fig. 13. Effect of Lactobacillus Kunkeei culture fluid on the cell viability of B16F0 cell. 61
Fig. 14. Effect of Lactobacillus Kunkeei culture fluid on the melanin production in B16F0 cell. 63
Fig. 15. Inhibitory effect of Lactobacillus Kunkeei culture fluid on the TRP-1 expression in B16F0 cell. 65
Fig. 16. Inhibitory effect of Lactobacillus Kunkeei culture fluid on the TRP-2 expression in B16F0 cell. 66
Fig. 17. Inhibitory effect of Lactobacillus Kunkeei culture fluid on the MITF expression in B16F0 cell. 67
Fig. 18. Effect of Lactobacillus Kunkeei culture fluid on the cell viability of HaCat cell. 68
Fig. 19. Effect of Lactobacillus Kunkeei culture fluid on the expression of HAS-2 mRNA in HDF cell. 69
Fig. 20. Effect of Lactobacillus Kunkeei culture fluid on the cell viability of HDF cell. 70
Fig. 21. Inhibitory Effect of Lactobacillus Kunkeei culture fluid on the MMP-1 production in UVB-irradiated HDF. 72
Fig. 22. Effect of Lactobacillus Kunkeei culture fluid on mRNA expressions levels of COL1A1 mRNA in HDF cell. 73