표제지
목차
제1장 서론 10
1. 연구 배경 및 목적 10
1.1. 염모제(Hair dye) 10
1.2. 염모제 성분중 PPD에 대한 부작용 12
1.3. 천연항산화제로 인한 산화적 스트레스 개선 14
1.4. 장홍화 16
제2장 실험방법 23
1. 시약 23
2. 장홍화 꽃술 추출물의 제조 23
3. 장홍화 꽃술 추출물의 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량측정 24
4. 장홍화 꽃술 추출물의 항산화 in vitro 측정 24
5. 장홍화 꽃술 추출물의 피부 각질형성 세포에서의 효능평가 25
5.1. 세포배양 25
5.2. 산화적 스트레스 유도 및 시료의 처리 25
5.3. 세포 생존율 측정 시험 25
5.4. 형광현미경을 통한 세포 내 ROS 소거능 측정 26
5.5. qRT-PCR을 이용한 항산화 관련 인자의 mRNA 측정 26
5.6. Western blot 분석을 이용한 단백질 발현 측정 27
6. 통계처리 28
제3장 결과 및 고찰 29
1. 장홍화 꽃술 추출물의 총 폴리페놀과 총 플라보노이드 함량 29
2. 장홍화 꽃술 추출물의 in vitro 항산화 활성 30
3. H₂O₂에 의해 유발된 산화적 스트레스에 대한 장홍화 꽃술 추출물의 효과 31
3.1. 장홍화 꽃술 추출물의 세포독성 31
3.2. 세포사멸 회복 효과 32
3.3. 산화적스트레스에 대한 저해 기전 35
4. PPD에 의해 유발된 산화적 스트레스에 대한 장홍화 꽃술 추출물의 효과 38
4.1. PPD의 세포 독성 38
4.2. 세포사멸 억제효과 40
4.3. 세포내에서 ROS 소거 효과 42
4.4. 항산화 효소 발현 촉진효과 43
제4장 결론 48
참고문헌 50
ABSTRACT 58
Table 1. The primer sequence for quantitative Real-Time PCR(qRT-PCR) 27
Table 2. Scavenging activity of CSE DPPH and ABTS radical 31
Figure 1. Saffron flower and its stamens 17
Figure 2. The three main biologically active compounds of saffron 18
Figure 3. Cytotoxicity (cell viability) of CSE against HaCaT cell 32
Figure 4. Recovery effect of CSE in HaCaT cell suffered from oxidative stress induced with H₂O₂... 34
Figure 5. Recovery mechanism of CSE in HaCaT cell suffered from oxidative stress induced with H₂O₂... 36
Figure 6. Effects of CSE on mRNA expression related with antioxidative factors A=Nrf2, B=HO-1, C=Catalase and D=SOD in... 37
Figure 7. Recovery effect of CSE in HaCaT cell treated with PPD... 39
Figure 8. Effects of CSE on Bax and Bcl2 expression factors in HaCaT cell treated with PPD... 41
Figure 9. Effects of CSE on generation of ROS on HaCaT cell treated with PPD... 43
Figure 10. Effects of CSE on mRNA expression related with antioxidative factors (Nrf2 and HO-1) in HaCaT cell treated... 45
Figure 11. Effects of CSE on mRNA expression related with antioxidative factors (SOD and Catalase) in HaCaT cell treated... 47