표제지
목차
국문 초록 12
Ⅰ. 서론 14
Ⅱ. 재료 및 방법 19
A. 시험재료 및 추출 19
B. Caco-2 세포 배양 20
C. 세포독성시험(MTT assay) 21
D. Caco-2 세포의 투과성 확인(TEER) 22
E. Caco-2 RNA 분리 및 Real time-PCR 23
F. Caco-2 단백질 분리 및 Western blotting 25
1) Tight junction protein (Claudin-2) 25
2) Pore pathway protein (t-STAT6, p-STAT6) 26
G. 실험동물 및 대장염유도 27
H. 군 구성 및 실험 개요 28
I. 체중 측정 29
J. Disease activity index (DAI) 측정 30
K. 장기 무게 측정 31
L. 대장 조직 내 MPO, IL-5, IL-13 ELISA 측정 32
M. 대장 조직으로부터 단백질 분리 및 STAT-6 Western blotting 33
N. 대장 조직 Claudin-2 관찰(IHC) 34
O. 통계분석 35
Ⅲ. 결과 36
A. Caco-2 세포에 대한 Laurus nobilis (LN) 세포 독성 확인 36
B. Caco-2 세포에서의 Laurus nobilis (LN)의 투과성 개선 확인 38
C. Laurus nobilis (LN)의 TJs 개선 확인 40
D. Laurus nobilis (LN)의 Pore pathway 억제 효과 확인 42
E. OXA유도모델에서의 Laurus nobilis (LN)의 체중 변화 및 Disease Activity Index (DAI)에 미치는 영향 44
F. Laurus nobilis (LN)의 대장 무게 및 염증 개선 효과 46
G. Laurus nobilis(LN)가 IL-5, IL-13 분비량에 미치는 영향 48
H. Laurus nobilis (LN)가 STAT-6 활성화 조절에 미치는 영향 50
I. Laurus nobilis (LN)가 Claudin-2 발현에 미치는 영향 52
Ⅳ. 고찰 54
Ⅴ. 참고 문헌 60
Ⅵ. ABSTRACT 66
Table 1. Primer sequences for real time PCR analysis (5'-3') 24
Figure 1. Effect of Laurus nobilis (LN) on cell viability in Caco-2 cells. Caco-2 cells were treated with different LN (12.5, 25, 50, 100 μg/mL)... 37
Figure 2. Effect of TEER values of Laurus nobi lis (LN) in IL-13-treated caco-2 cells. 39
Figure 3. Effect of Laurus nobi lis (LN) on mRNA expression levels of genes related to TJ in Caco-2 cells treated with IL-13. 41
Figure 4. Reduction of Claudin-2 through STAT-6 inhibition of Laurus nobilis (LN) in Caco-2 stimulated with IL-13. 43
Figure 5. Effect of Laurus nobilis (LN) on body weight and disease activity index (DAI). 45
Figure 6. Effect of Laurus nobilis (LN) on colon weight and MPO levels in colon tissue. 47
Figure 7. Effect of Laurus nobilis (LN) on IL-5 and IL-13 secretion in colon tissue. 49
Figure 8. Effect of Laurus nobi lis on the regulation of phosphorylated STAT-6 (pSTAT-6) expression. 51
Figure 9. Effect of Laurus nobilis (LN) on Claudin-2 expression in colon tissue 53
Scheme 1. Experimental protocol 28