표제지
목차
ABSTRACT 9
제1장 서론 11
제2장 실험 재료 및 방법 15
1. 분해 균주 발굴 및 분해 활성 확인을 위한 고체배지 제조 15
2. 선별된 균주의 분해 활성 확인을 위해 사용되는 필름의 제조 15
3. 선별 균주의 분해 활성 확인을 위한 고체 및 액체 배양 16
4. 16S rRNA 미생물 동정 16
5. 액체 배양 이후 분석 기기를 통한 분해 활성 확인 17
6. P-Nitrophenyl esters를 통한 에스터레이스 활성 확인 18
7. 최적 기질 선정을 위한 통계분석 진행 18
8. 분해에 따른 생분해성 플라스틱 필름 물성 변화 측정 18
제3장 연구 결과 및 분석 20
제1절 Polybutylene succinate (PBS) 최적 분해 균주 발굴 및 분해 조건 최적화 20
1. 해양 샘플로부터 PBS 분해 균주 발굴 및 최적 분해 균주 선정 20
2. Terribacillus sp. JY49 균주를 활용한 PBS 분해 조건 최적화 24
3. 분해 후 PBS 필름의 물성 변화 확인 30
4. 다른 종류의 바이오 플라스틱 분해 활성 확인 35
제2절 바이오플라스틱 분해 미생물 발굴을 위한 새로운 스크리닝 방법 제시 37
1. 기존 바이오 플라스틱 분해 및 비분해 균주의 플라스틱 분해 활성 확인 37
2. 생분해성 플라스틱 분해 및 비분해 균주의 에스터레이스 활성 비교 및 최적 기질 선정 40
3. 분해균주 스크리닝을 위한 에스터레이스 활성 시험 적용 47
4. 새로운 스크리닝 방법을 통해 발굴된 균주의 분해 활성 확인 49
제4장 결론 55
참고문헌 57
국문 초록 67
Table 1. PBS-degrading strains isolated from marine samples and identified via 16s rRNA sequencing 21
Table 2. Characterization of Terribacillus sp. JY49 using hydrolysis and antibiotic resistance test 23
Table 3. Changes in molecular weight of PBS films, analyzed using Gel permeation chromatography 34
Table 4. Various bioplastic-degrading strains which were screened in previous studies. 38
Table 5. Confirmation of degradation activities of various plastic-degrading strains through clear zone test 39
Table 6. Changes in the molecular weight of each bioplastic film, as analyed by GPC. 54
Figure 1. Scheme of comparison between conventional and novel methods for screening strains. 14
Figure 2. Comparing PBS-degrading strains using solid and liquid culture 22
Figure 3. Optimizing the conditions of degrading PBS according to temperature. 25
Figure 4. Optimization the conditons for degaading PBS according to additional carbon sources and NaCl 27
Figure 5. Confirming the degree of PBS degradation based on cultivation period. 29
Figure 6. Changes in the surface and functional group of PBS film after degradation. 33
Figure 7. Degradation ability of Terribacillus sp. JY49 on other bioplastics. 36
Figure 8. Confirmation of color changes via p-nitrophenyl esters in 96-well plates 42
Figure 9. Difference in absorbance values between degrading and non-degrading strains observing PCA analysis. 46
Figure 10. Application of esterase assay for screening degrading strains 48
Figure 11. Confirmation of biodegradability of strains screened via esterase assay 51
Figure 12. Changes in the surface observed upon analysis degradation in liquid culture. 53