표제지
목차
ABSTRACT 10
제1장 배경 12
제1절 코로나바이러스감염증-19(COVID19) 12
1. SARS-CoV-2의 구조와 기능 12
2. SARS-CoV-2의 감염주기 16
3. COVID-19의 백신현황 18
제2절 베큘로바이러스 18
제2장 바이러스 백신시스템에 따른 생체분포분석 20
제1절 서론 20
제2절 실험 재료 및 방법 21
1. 세포 21
2. 재조합 바이러스 (AcHERV-COVID19, Ad-COVID19)의 생산 및 구축 21
3. 웨스턴 블랏 분석 23
4. 면역형광 분석 23
5. 실험동물 23
6. 마우스 모델에서의 접종 23
7. 채혈 및 조직 수확 24
8. SARS-CoV-2의 S 유전자를 검출하기위한 DNA 표준곡선 제작 24
9. 정량적 실시간 중합효소연쇄반응 분석(qRT-PCR) 24
10. 효소 결합 면역흡착 분석 (ELISA) 25
11. 통계분석 25
제3절 결과 26
1. SARS-CoV-2 스파이크 단백질의 전달 효율과 발현 26
2. SARS-CoV-2 S 유전자 정량화를 위한 표준화 30
3. 단일 근육 주사 후 AcHERV-COVID19와 Ad-COVID19 백신의 면역원성 32
4. 단일 근육주사 후 주사부위에서의 백신 지속성 34
5. 단일 근육 주사 후 백신의 생체분포 36
제4절 고찰 50
참고문헌 52
국문초록 58
Table 1. Primer sequences for identification and amplification 22
Table 2. Validation of the qRT-PCR method in each tissue 31
Fig. 1.1. Structure of the SARS-CoV-2. 14
Fig. 1.2. Genome structure of SARS-CoV-2. 15
Fig. 1.3. The Life Cycle of SARS-CoV-2 in Host Cells. 17
Fig. 2.1. Schematic diagrams of the two recombinant plasmids used to construct recombinant baculovirus AcHERV-COVID19 and recombinant... 27
Fig. 2.2. Western blot analysis of Spike protein expression in VeroE6 cells. 28
Fig. 2.3. Immunofluorescence analysis of Spike protein expression in VeroE6 cells. 29
Fig. 2.4. Immunogenicity in BALB/c mice vaccinated with AcHERV-COVID19 and Ad-COVID19. 33
Fig. 2.5. Time-dependent SARS-CoV-2 S gene persistence and IgG levels. 35
Fig. 2.6. Biodistribution on lymph node. 39
Fig. 2.7. Biodistribution on ovary. 40
Fig. 2.8. Biodistribution on spleen. 41
Fig. 2.9. Biodistribution on kidney. 42
Fig. 2.10. Biodistribution on liver. 43
Fig. 2.11. Biodistribution on thymus. 44
Fig. 2.12. Biodistribution on lung. 45
Fig. 2.13. Biodistribution on heart. 46
Fig. 2.14. Biodistribution on brain. 47
Fig. 2.15. Biodistribution on blood. 48
Fig. 2.16. Biodistribution of AcHERV-COVID19 and Ad-COVID19 vaccines following a single intramuscular injection. 49