이자섬에서 carbonic anhydrase (CA) 동위효소의 발현 여부를 관찰하고자 흰쥐 이자를 대상으로 CAI, CAII, CAIV, CAIX 동위효소에 대한 항체 및 글루카곤 항체를 사용하여 면역조직화학 염색을 시행하였고, 이들 조직에서 각각의 CA 동위효소 단백 발현을 Western blotting 분석을 시행하여 확인하였다.
Western blotting 분석에서 흰쥐 이자는 CAI, II, IV가 발현되었으나 CAIX는 발현되지 않았다.
이자섬에 대한 면역조직화학반응에서 섬세포는 CAI 및 CAII는 음성이었다. CAIV는 이자섬의 주변부 세포에서 매우 강한 양성 반응을 보였으며 중심부 세포는 음성이었다. 글루카곤에 대한 면역조직화학 반응에서 글루카곤 항체에 양성 반응을 보이는 세포는 CAIV 면역조직화학 반응 소견과 양성 부위가 일치하였다. CAIX는 양성 반응을 보이는 세포들이 상당 수 출현하였는데 이자섬 주변부 세포는 대부분 약한 양성 반응을 보였으며 중심부 세포는 음성 또는 미약한 양성 반응을 보였다.
이자 외분비부에서 CAI은 혈관에서, CAII는 이자 도관세포 및 꽈리세포에서 발현되었다.
이상의 관찰로 흰쥐 이자섬에 발현되는 CA 동위효소는 CAIV와 IX임을 확인하였으며, CAIV가 발현되는 세포는 A세포일 것으로 추측되었다.The distribution of carbonic anhydrase (CA) isoenzymes I, II, IV, and IX was investigated in pancreatic islet of the rat using Western blotting analysis and immunohistochemistry.
Western blotting analysis demonstrated strong CAI and II expression, but weak CAIV and no CAIX expression.
Immunohistochemical reaction of pancreatic islet revealed no staining for CAI and II. CAIV was detected in the peripheral cells of the islet. CAIX was detected in the peripheral cells and occasional in the centrally located cells.
Signals for CAIV were observed at the plasma membrane and/or in the cytoplasm of islet cells. Location of CAIV in the A cells was confirmed by subjecting serial sections of pancreas to staining for CAIV and glucagon, which showed colocalization in the A cells.
Immunohistochemical staining of pancreatic acinus revealed abundant staining for CAI in interacinar blood vessels and CAII in ductal and acinar cells.
These results demonstrate the differential distribution of CA isoenzymes in pancreatic islet, and suggest that A cells of pancreatic islet might contain both CAIV and IX.