[표지] 1
용역연구개발과제 최종보고서 2
제출문 4
목차 5
I. 총괄연구개발과제 요약문 8
1. 국문 요약문 8
2. Summary 10
II. 총괄연구개발과제 연구결과 12
제1장 총괄연구개발과제의 목적 및 필요성 12
1. 총괄연구개발과제의 목표 12
2. 총괄연구개발과제의 목표달성도 13
3. 총괄국내·외 기술개발 현황 14
4. 총괄연구개발과정에서 수집한 국외과학기술정보 18
제2장 총괄연구개발과제의 내용 및 방법 18
① 데이터베이스 개발 18
② STR 및 형태를 이용한 세포주 동정 및 오염(혼입) 검사 알고리즘 개발 18
③ 첨단바이오의약품 원료 표준시험법(안) 개발 18
④ 첨단바이오의약품 별 맞춤 원료 검증 시험법(안) 개발 및 시험 결과 18
제3장 총괄연구개발과제의 최종결과 및 고찰 19
제4장 총괄연구개발과제의 연구성과 26
1. 총괄활용성과 26
2. 총괄활용계획 27
제5장 총괄주요연구 변경사항 28
제6장 총괄첨부서류 28
III. 제(1)세부연구개발과제 연구결과 30
제1장 제(1)세부 연구개발과제 요약문 30
제2장 세부연구개발과제의 목적 32
1. 세부연구개발과제의 목적 32
2. 세부연구개발과제의 연구범위 32
3. 세부연구개발과제의 목표달성도 32
제3장 세부연구개발과제의 내용 및 방법 33
1. 첨단바이오의약품 원료 현황, 규제 현황 데이터베이스 개발 33
2. 신경줄기세포유전자치료제 원료 품질관리 기술개발 47
제4장 세부연구개발과제의 결과 및 고찰 49
1. 첨단바이오의약품 원료 현황, 규제 현황 데이터베이스 개발 49
2. 신경줄기세포유전자치료제 원료 품질관리 기술개발 105
제5장 세부참고문헌 106
III. 제(2)세부연구개발과제 연구결과 109
제1장 제(2)세부 연구개발과제 요약문 109
제2장 세부연구개발과제의 목적 113
1. 세부연구개발과제의 목적 113
2. 세부연구개발과제의 목표달성도 113
제3장 세부연구개발과제의 내용 및 방법 114
1. 세포주의 인증(authentication) 절차 중요성 114
2. 세포주 형태학적 데이터 확보 및 데이터베이스로 연계 116
3. 세포주 STR 데이터 확보 및 데이터베이스 구축과 데이터 검증 124
4. 세포주 오염방지를 위한 마이코플라즈마 오염 품질관리 139
5. 첨단바이오의약품 세포주 오염과 오인 방지를 위한 표준시험법 및 SOP 149
제4장 세부연구개발과제의 결과 및 고찰 152
1. 세포주 형태(cellular morphology) 데이터 생산 및 데이터베이스 구축 152
2. 인체 유래 세포주를 구분할 수 있는 STR(Short Tandem Repeat) 데이터 추가 생산 및 데이터베이스 구축 152
3. 데이터추출을 위한 알고리즘 구축 153
4. 첨단바이오의약품제조를 위한 세포주 오염과 오인 방지를 위한 표준절차서(SOP) 153
제5장 세부참고문헌 153
III. 제(3)세부연구개발과제 연구결과 155
제1장 제(3)세부 연구개발과제 요약문 155
제2장 세부연구개발과제의 목적 157
1. 세부연구개발과제의 목적 157
2. 세부연구개발과제의 목표달성도 158
제3장 세부연구개발과제의 내용 및 방법 159
I. 세포 검증(세포 확인 및 유전적 안정성) 160
II. 세포 혼입 확인 180
제4장 세부연구개발과제의 결과 및 고찰 196
I. 세포 검증 및 유전적 안정성 확인 197
II. 세포 혼입 확인 219
제4장 세부연구개발과제의 결과 및 고찰 239
제5장 세부참고문헌[내용없음] 239
III. 제(4)세부연구개발과제 연구결과 241
제1장 제(4)세부 연구개발과제 요약문 241
제2장 세부연구개발과제의 목적 244
1. 세부연구개발과제의 목적 244
2. 세부연구개발과제의 목표달성도 244
제3장 세부연구개발과제의 내용 및 방법 245
1. 내용 245
2. 연구 방법 247
제4장 세부연구개발과제의 결과 및 고찰 249
1. DNA 메틸화 분석(EPIC array) 249
2. NGS 기반 STR 분석 결과 260
3. NGS 기반 SNP 분석 결과 462
4. NGS 기반 Oncomine 분석 결과 728
5. SOP 815
6. 해석 및 고찰 845
제5장 세부참고문헌 846
III. 제(5)세부연구개발과제 연구결과 848
제1장 제(5)세부 연구개발과제 요약문 848
제2장 세부연구개발과제의 목적 851
1. 세부연구개발과제의 목적 851
2. 세부연구개발과제의 목표달성도 852
제3장 세부연구개발과제의 내용 및 방법 853
1차 년도(2020년) : iPSC 유래 세포치료제 원료세포의 특성분석 853
2차 년도(2021년) :세포 및 배지 혼입 분석 853
제4장 세부연구개발과제의 결과 및 고찰 858
(1) PBMC를 이용하여 iPSC로의 역분화를 유도하여 화자유래 iPSC 세포주 3종류 확립 858
(2) 심근분화 및 신경세포 분화 프로토콜 확립 858
(3) 확보한 원료 세포들의 순도 측정을 위한 다양한 시험법(qPCR, Immunoblot, 면역염색, FACS, NGS 기반 RNA-sequencing) 설계 및 진행 859
(4) 세포 분화 과정에서 유전형의 변화 유무 측정 862
(5) 개체간(환자간) 혼입을 측정할 수 있는 분석법 개발위한 혼합세포 제공 862
6) iPSC 및 분화 세포간의 혼입 측정 위해 세포간 조합 후 시험법 검증 863
7) 원료세포 제작시 사용된 배지의 혼입을 확인, 시험법 제작(LC-MS/MS) 865
제5장 세부참고문헌 866
III. 제(6)세부연구개발과제 연구결과 868
제1장 제(6)세부 연구개발과제 요약문 868
제2장 세부연구개발과제의 목적 870
1. 세부연구개발과제의 목적 870
2. 세부연구개발과제의 목표달성도 871
제3장 세부연구개발과제의 내용 및 방법 871
제4장 세부연구개발과제의 결과 및 고찰 881
제5장 세부참고문헌 882
[뒷표지] 884