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표제지
목차
Abbreviations 7
I. 서론 11
II. 연구사 17
III. 실험 재료 및 방법 21
1. 실험 재료 및 시약 21
2. 홍경천 시료 제조 22
3. 생리조절 기능 23
1) Angiotensin Converting Enzyme (ACE) 억제 활성 탐색 23
2) Glutathion-S-Transferase (GST) 활성 탐색 23
3) α-glucosidase 억제 기능 탐색 24
4. 항암 활성 탐색 24
4-1. In vitro 24
1) 인간 정상세포에 대한 독성 측정 24
2) SRB assay를 이용한 항암 활성 측정 25
3) Bcl-2 단백질 정량을 통한 항암활성 26
4) p-53 단백질 정량을 통한 항암 활성 27
4-2. In vivo 28
1) S-180 복수암의 항암 효과 28
5. 면역 활성 탐색 29
5-1. In vitro 실험 29
1) 대식 세포에서의 nitric oxide 생성능 측정 29
2) 면역 세포의 생육 촉진 및 활성도 측정 30
3) Cytokine 분비량 측정 31
4) NK 세포의 활성화 측정 31
5) 세포의 분화도 31
5-2. In vivo 실험 32
1) 마우스를 이용한 항체 생성능 측정 32
2) 마우스를 통한 항스트레스 효과 측정 33
6. High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) 측정 36
7. Scanning Electron Microscope 관찰 36
8. 통계처리 36
IV. 실험 결과 및 고찰 37
1. 홍경천의 추출 수율 37
2. 생리조절 기능 39
1) Angiotensin Converting Enzyme (ACE) 억제 활성 탐색 39
2) Glutathion-S-Transferase(GST) 활성 탐색 41
3) α-glucosidase 억제활성 탐색 43
3. 항암 활성 탐색 45
3-1. In vitro 45
1) 인간 정상 세포의 세포 독성 실험 45
2) SRB assay를 이용한 항암 활성 47
3) Bcl-2 단백질 정량을 통한 항암 활성 52
4) p-53 단백질 정량을 통한 항암 활성 54
3-2. In vivo 56
1) S-180 복수암의 항암 효과 56
4. 면역 활성 탐색 58
4-1. In vitro 실험 58
1) 대식 세포에서의 nitric oxide 생성능 측정 58
2) 면역 세포의 생육 촉진 및 활성도 측정 60
3) Cytokine 분비량 측정 63
4) NK 세포의 활성화 측정 65
5) 세포의 분화도 측정 68
4-2. In vivo 실험 70
1) 마우스를 이용한 항체 생성능 측정 70
2) 마우스를 통한 항스트레스 실험 72
5. HPLC 분석 76
6. Scanning Electron Microscope (SEM) 관찰 78
V. 결론 80
VI. 참고문헌 84
VII. 영문요약 92
VIII/VII. 감사의 글 95
Fig. 1. Equipment of extraction (A : Ultra high pressure extractor, B : Ultrasonification extractor) 22
Fig. 2. Inhibition of Angiotensin Converting Enzyme (ACE) activity in adding R. Sacharinensis extracts. 40
Fig. 3. The enhancement of glutathione-S-transferase (GST) activity in adding R. sachalinensis extracts. 42
Fig. 4. Inhibition effect of α-glucosidase in adding R. sachalinensis extracts. 44
Fig. 5. Cytotoxicity of the crude extracts from R. sachalinensis on normal cell line, HEK293. 46
Fig. 6. Inhibition ratio of growth of A549 (bar chart, %) and selectivity (line chart) in adding the extracts from R. Sachlinensis. 48
Fig. 7. Inhibition ratio of growth of AGS (bar chart, %) and seletivity (line chart) in adding the extracts from R. Sachalinensis. 49
Fig. 8. Inhibition ratio of growth of MCF-7 (bar chart, %) and selectivity (line chart) in adding the extracts from R. Sachalinensis. 50
Fig. 9. Inhibition ratio of growth of Hep3B (bar chart, %) and selectivity (line chart) in adding the extracts from R. Sachalinensis. 51
Fig. 10. The representative (A) western blotting and (B) densitometric analysis of bcl-2, adding the extracts of R. sachalinensis. 53
Fig. 11. The representative (A) western blotting and (B) densitometric analysis of p-53, through adding the extracts of R. sachalinensis. 55
Fig. 12. The features of mice to inoculated after 20days A : standard control (no tumor cells). B : tumor cells) 56
Fig. 13. Effect of intraperitoneal administration of samples on the growth of Sarcoma-180 inoculated intraperitoneally. 57
Fig. 14. Stimulation of nitric oxide production by adding the extracts from R. sachalinensis. 59
Fig. 15. The effect of the extracts according to concentration from R. sachalinensis on the growth of human B cell (Raji). 61
Fig. 16. The effect of the extracts according to concentration from R. sachalinensis on the growth of human T cell (Jurkat). 62
Fig. 17. The NK cell growth (line chart) added the secretion of B cells treated with and without the extracts from R. sachalinensis. 66
Fig. 18. The NK cell growth (line chart) added the secretion of T cells treated with and without the extracts from R. sachalinensis. 67
Fig. 19. Comparison of the differentiaton of HL-60 cells by adding R. Sacharinensis extracts. 69
Fig. 20. Effect of R. sachalinensis on total serum IgG level in ICR mouse. 71
Fig. 21. The result of HPLC analysis of R. sacharinensis according to extract process (A: water extract at 60℃, B: ultrasonification treated for 30 minutes at 60℃ with... 77
Fig. 22. Scanning electron microphotographs of the surface of R. sachalinensis after treating high process for 5 and 15 minutes (A: ultraconification treated for 30 minutes at 6... 79
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