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표제지

목차

I. 서론 7

II. 재료 및 방법 10

1. 실험곤충 10

2. 실험 Bacillus thuringiensis 균주 10

3. Bacillus thuringiensis균주와 Tannic acid 준비 11

4. 생물활성 검정 12

1) 실내실험 12

2) 야외 포장 실험 12

3) 반수치사농도(LC50) 및 살충율 분석(이미지참조) 12

5. SDS-PAGE 13

1) 파밤나방의 중장액 처리 13

2) Trypsin처리 14

6. Zymogram 14

III. 결과 및 고찰 15

1. 파밤나방 중장액에 대한 protease inhibitor의 저해효과 15

2. 파밤나방 중장액과 Tannic acid에 의하여 분해되는 Bacillus thuringiensis 독소 단백질 21

3. Bacillus thuringiensis KB100균주와 Tannic acid의 혼합처리에 의한 파밤나방의 살충효과 24

4. 농가 파포장에서의 혼합처리 효과 27

5. 중장액과 Bacillus thuringiensis의 시간에 따른 SDS-PAGE 분석 30

6. Bacillus thuringiensis KB100 균주와 Trypsin 활성에서 Tannic acid의 억제 효과 37

7. 파밤나방 중장액의 zymogram 분석 42

IV. 참고문헌 44

ABSTRACT 49

초록 51

초록보기

 국내 토양으로부터 파밤나방에 활성있는 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki KB100균주를 분리 동정하였다. 난방제 해충인 파밤나방에 대한 B. thuringiensis의 살충력을 강화시키기 위해 몇 개의 protease inhibitor를 조사하였으며, 이 중 단백질 분해 억제 능력이 가장 좋은 tannic acid을 선발하였다(Abstract에 추가요망). B. thuringiensis의 배양액에 tannic acid을 혼합 처리하여 파밤나방 2령 유충을 대상으로 생물활성을 조사한 결과, B. thuringiensis 단독처리는 54.4%의 사충율을 보인 반면 B. thuringiensis와 4mM tannic acid을 혼합하여 처리하면 64.0% 그리고 B. thuringiensis + 40mM tannic acid는 95.5%의 높은 상승효과를 각각 나타냈다. 그러나 B. thuringiensis+80mM tannic acid 에서는 53.3%로 단독처리의 경우 보다 사충율이 낮게 나타났다(Abstract에 추가요망). 3령 유충에서도 B. thuringiensis 단독처리는 60.0%였으며 B. thuringiensis+40mM tannic acid는 93.3%로 사충율이 증가하는 상승효과를 보였다. 야외포장 실험에서 B. thuringiensis 단독처리는 1회, 2회, 3회 누적 처리에서 각각 61.8%, 80.4% 그리고 47.3%의 사충률을 나타낸 것에 비해 B. thuringiensis와 40mM tannic acid의 혼합 처리구에서는 83.9%, 89.4%와 66.8%로 사충율이 증가되었다.

중장액 속에서 tannic acid의 농도차에 따라 결정성 독소 단백질의 반응결과는 SDS-PAGE로 조사되었다. B. thuringiensis와 tannic acid를 혼합처리 했을 때, B. thuringiensis 단독처리보다 상승효과를 나타냈다. 살충활성 검정에서 가장 높은 상승효과를 나타낸 중장액 + B. thuringiensis KB100 toxin + 40mM tannic acid의 SDS-PAGE 결과, 60kDa의 살충활성 밴드가 계속해서 유지됨을 확인 하였다.

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