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국문초록

목차

List of Abbreviations 10

Ⅰ. 서론 11

Ⅱ. 실험재료 및 방법 13

1. 세포주 및 세포배양 13

2. 재조합 CTHRC1 및 anti-CTHRC1 항체 생산 14

3. TCGA 분석 14

4. 세포 내 CTHRC1 발현조절 14

5. 세포증식 측정법(Cell proliferation assay) 15

6. 웨스턴 블롯팅(Western blotting) 15

7. 효소 결합 면역 흡착 분석법(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 16

8. 실시간 중합 효소 연쇄 반응(Real time polymerase chain reaction, RT-PCR) 17

9. 세포 이동능 및 침윤능 분석(Cell migration & invasion assay using Transwell) 17

10. 통계분석 18

Ⅲ. 결과 19

1. 특정 분자 아형의 세포주에서 CTHRC1의 특이적 발현 확인 19

2. CTHRC1에 의한 Claudin-low 아형 세포주의 세포증식 및 이동능 증가 확인 24

3. CTHRC1 knockdown에 의한 claudin-low 아형 세포주의 세포증식 및 이동능 감소 확인 30

4. Anti-CTHRC1 항체의 효과적인 세포증식과 이동능, 침윤능 감소 확인 35

Ⅳ. 논의 40

참고문헌 42

Abstract 45

그림목차

Figure 1. CTHRC1 is highly expressed in claudin-low subtype cell lines. 23

Figure 2. In the claudin-low subtype, the mobility of cells changes through recombinant CTHRC1. 27

Figure 3. Subtypes other than claudin-low types do not change cell mobility through rCTHRC1. 29

Figure 4. In the claudin-low subtype, the cell proliferation changes through CTHRC1 transient knockdown. 32

Figure 5. In the claudin-low subtype, the migration and invasion of cells changes through CTHRC1 stable knockdown. 34

Figure 6. Anti-CTHRC1 antibodies reduce cell proliferation of the claudin-low subtype of the cell line. 36

Figure 7. Anti-CTHRC1 antibodies reduce cell migration and invasion of the claudin-low subtype of the cell line. 39

초록보기

 최근 암종들의 분자 아형에 관한 연구가 활발히 일어나면서 개인의 유전적 발현 특성을 파악할 수 있고 맞춤형 의료에 한발 다가서게 되었다. Breast cancer는 여성에게 가장 흔하게 진단되는 암으로 2020년에 전 세계적으로 진단받은 환자는 230만 명이며, 68만 5천 명이 사망했다고 보고되었다. 유방암의 분자 아형은 수용체(estrogen receptor, progesterone receptor, HER2)의 발현에 따라 크게 Luminal A, Luminal B, HER2-enriched, Basal-like로 분류할 수 있다. 그중에서도 Basal-like 아형은 주요 3개의 수용체 발현이 낮은 아형으로 삼중 음성 유방암이라고도 불리며, 전체 유방암 중 10~15%를 차지하고 있다. 삼중 음성 유방암은 현재 흔하게 쓰이는 유방암 치료제 중 Trastuzumab과 같은 표적 치료제를 사용할 수 없다는 큰 문제점이 있다. 유방암에서 과발현된다고 보고된바 있는 CTHRC1 (Collagen Triple Helix Repeat Containing 1)은 세포외기질의 발현이나 세포 이동에 관여하는 분비 단백질이다. 우리는 삼중 음성 유방암 내에서도 밀착연접에 관여하는 claudin의 발현이 낮은 claudin-low 아형에서 CTHRC1의 발현이 높다는 것을 확인했고, 이에 주목하여 연구를 진행하였다. 유방암 내에서도 다른 아형에 비해 claudin-low 아형에서 특이적으로 높게 발현하는 CTHRC1의 역할에 대해 규명하고, CTHRC1을 억제하는 항체를 이용하여 세포 수준에서의 항체 치료의 효능을 확인함으로써 더 나아가 유방암 환자의 진행 및 전이를 억제할 수 있을 것이라는 가능성을 제기한다.

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