본문 바로가기 주메뉴 바로가기
22대 대한민국 국회 국회정보길라잡이 국회의원검색
회원가입 로그인
HOME

정보검색

소장정보 검색

국회도서관 홈으로 정보검색 소장정보 검색

결과 내 검색

동의어 포함

고급검색

인명/단체명

저자정보 상세정보
인명/단체명을 입력하세요.

키워드

  • 대표어

  • 외국어

-

목차보기

Title Page

ABSTRACT

Contents

PART ONE 14

Ⅰ. INTRODUCTION 14

Ⅱ. MATERIALS AND METHODS 16

A. Cells line 16

B. Design of non-thermal plasma treated solution 16

C. Oil Red O staining assay 17

D. Triglyceride contents assay 17

E. Immunofluorescence assay 17

F. Western blot 18

G. Quantitative real-time PCR analysis 18

H. Cell cytotoxicity analysis 19

I. Annexin V Apoptosis Detection 20

J. TUNEL assay 20

K. In vivo studies 20

L. Statistical analysis 21

Ⅲ. RESULTS 22

A. NTS demonstrates non-cytotoxicity in 3T3-L1 cells 22

B. Adipogenesis Suppression in 3T3-L1 Cells by NTS 22

C. NTS inhibits the expression of adipogenic transcription factors and adipocyte-specific genes. 23

D. NTS suppresses late-stage adipocyte differentiation in 3T3-L1 cells 24

E. NTS inhibits ER stress and UPR activation during adipocyte differentiation in 3T3-L1 cells 24

F. Effect of NTS on reduction of adipose tissue mass and cell size in vivo 25

Ⅳ. DISCUSSION 27

PART TWO 39

Ⅰ. INTRODUCTION 39

Ⅱ. MATERIALS AND METHODS 41

A. Cell and Reagents 41

B. Animal study 41

C. Western blot analysis 42

D. Real-time PCR & Conventional PCR 43

E. Immunocytochemistry 44

F. LysoSensor 45

G. Oil Red O stain 45

H. Transient transfection and RNA interference 45

I. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) 46

J. Statistical analysis 46

Ⅲ. RESULTS 47

A. GDF15 expression decreases during the early stages of adipocyte differentiation 47

B. GDF15 experiences a decline through autophagy-mediated lysosomal degradation 48

C. GDF15 suppresses the C/EBPα expression, resulting in a decrease in differentiation 49

D. GDF15 suppress C/EBPα by upregulating the expression of HOP2 50

Ⅳ. DISCUSSION 52

Ⅴ. REFERENCE 68

국문요약 (Abstract) 74

List of Tables

Table 1. Antibody list 42

Table 2. Primer sequences for quantitative Conventional PCR 44

List of Figures

PART ONE 11

Figure 1. The cytotoxic and apoptotic effects of NTS (4 kV for 1 ml/1 min) on growth medium (GM) and differentiation medium (DM) of 3T3-L1... 29

Figure 2. Suppression of Adipogenic Differentiation by NTS 31

Figure 3. The NTS-mediated suppression of key adipogenic transcription factors in 3T3-L1 pre-adipocytes. 33

Figure 4. NTS inhibition at late stages of adipogenic differentiation. 35

Figure 5. NTS regulates adipocyte differentiation through inhibition of ER stress and UPR activation in 3T3-L1. 36

Figure 6. Assessing the impact of NTS on adipogenesis and body weight in C57BL/6 mice subjected to a high-fat diet. 38

PART TWO 12

Figure 1. GDF15 expression decreases in the early stages of adipocyte differentiation. 56

Figure 2. GDF15 is reduced by lysosomal degradation via the autophagic pathway. 58

Figure 3. GDF15 reduces adipogenic differentiation due to decreased C/EBPα. 60

Figure 4. GDF15 reduces C/EBPα α through increased expression of HOP2. 62

List of Supplementary Figures

Supplementary Figure S1. (A) During the 8-week in vivo experiment, the body weight of the mice was measured every other day; ***P 〈0.001. (B) Mouse food... 64

Supplementary Figure S2. (A) Impact of lysosomal activation on adipogenesis. After changing media from ADSCs to DM, we cultured them for 24 hours and... 65

Supplementary Figure S3. (A) Changes in HOP2 mRNA levels associated with GDF15 expression. After GDF15 transfection, the mRNA level of HOP2 was... 67

초록보기

 과도한 지방세포 분화 및 축적은 비만, 당뇨병, 고지혈증 등의 대사 장애 발병에 기여합니다. 지방분화는 여러 호르몬과 다양한 전사인자들의 상호작용을 통하여 매우 복잡하게 이루어진다. 이중 지방세포의 분화조절은 퍼옥시좀 증식자 활성화 수용체 감마(PPARγ), CCAAT/인핸서 결합 단백질 (C/EBPs) 전사인자가 지방세포의 분화에 있어서 중추적인 역할을 담당하고 있다.

첫번째 연구에서 우리는 비열플라즈마 처리액(NTS)이 지방생성을 억제하는 효과가 있는지 조사하고 그 메커니즘을 규명하였다. 우리의 결과는 NTS 가 Oil Red O 염색 및 트리글리세리드 축적 확인을 통하여 지방 전구세포의 지방세포로의 분화를 유의미하게 억제한다는 것을 보여주었다. 또한 NTS 처리는 주요 지방생성전사인자 및 지방세포 특이적 유전자의 mRNA 및 단백질 발현 수준을 억제했다. 지방분화를 억제하는 메커니즘으로 우리는 지방 분화 과정에서 증가하는 ER 스트레스 관련 마커들이 NTS 에 의해 하향 조절하는 것을 확인하였다. In vitro 연구와 일관되게, 식이 유발 비만 마우스 모델을 사용한 in vivo 연구에서도 NTS 치료가 음식 섭취량의 변화 없이 체중과 지방을 감소시키는 것으로 나타났다. 이러한 발견은 NTS 가 지방 생성분화를 억제하고 지방 생성에 대한 NTS 의 억제효과에 대한 메커니즘을 설명한다. 종합적으로 우리의 결과는 NTS 가 이미 알려져 있는 어려 생체의학 분야뿐만 아니라 비만 및 비만 관련 질병을 치료하는데 유용할 수 있음을 시사한다.

두번째 연구에서는 성장 분화 인자 15(GDF15)와 지방세포 분화의 관계에 대해서 확인하였다 GDF15 는 에너지 항상성과 관련된 스트레스 반응 사이토카인으로 간주되며, 이는 수용체인 GDNF 계열 수용체 알파 유사(GFRAL) 메커니즘을 통해 에너지 소비를 증가시키고 음식 섭취량과 체중을 억제함으로써 이루어진다. 그 효과에도 불구하고 GDF15 혈청 수준은 비만 쥐와 인간에게서 증가한다. 인간 지방생성 초기단계 동안 GDF15 단백질 전환 메커니즘과 GDF15 과발현에 의해 매개되는 하류 신호전달 경로는 평가되지 않았다. 여기에서 우리는 부고환 백색 지방조직(eWAT)의 GDF15 단백질과 혈청 GDF15 수준이 정상적인 식단에 비해 단기 HFD 공급을 받는 쥐에서 상당한 감소를 보인다는 것을 발견하였다. 유사하게, 지방생성 분화 배지를 사용하여 인간 지방 유래 줄기세포(ADSCs)에서 지방세포로의 분화를 유도하는 동안, GDF15 단백질은 초기 지방생성에서 감소하였다. 기계적으로 GDF15 는 초기 지방생성 과정에서 자가포식 리소좀 경로(ALP)를 통해 주로 분해된다. 지방전구세포에서의 GDF15 과발현은 지방생성 분화 배지에서 CCAAT 인핸서 결합 단백질 알파(CEBPα)의 유도를 차단함으로써 지방생성을 억제한다. 다음으로 우리는 HOP2 가 지방생성 동안 감소하는 것으로 알려져 있지만, 상승된 GDF15 조건에서 증가된다는 것을 발견했다. 더욱이, GDF15 가 과발현되었을 때 C/EBPα의 감소가 관찰되었지만, HOP2 가 녹아웃 되었을 때 이러한 감소는 발생하지 않았다. 이러한 발견은 지방세포 분화를 억제하는 데 있어 GDF15 의 역할을 밝히고 이러한 억제의 기본 메커니즘에 대한 통찰력을 제공한다.

결론적으로, 우리의 결과는 GDF15 가 이전에 보고된 바와 같이 체중 감량제 역할을 할 뿐만 아니라 지방세포 분화 억제를 하여 체중 증가 조절제로서의 잠재력을 제공할 수 있음을 시사합니다.

추천서가 (다양한 추천 자료를 만나보세요)

권호기사보기

권호기사 목록 테이블로 기사명, 저자명, 페이지, 원문, 기사목차 순으로 되어있습니다.
기사명 저자명 페이지 원문 기사목차

권호

기사명 원문보기 기사목차
닫기