본문 바로가기 주메뉴 바로가기
22대 대한민국 국회 국회정보길라잡이 국회의원검색
회원가입 로그인
HOME

정보검색

소장정보 검색

국회도서관 홈으로 정보검색 소장정보 검색

결과 내 검색

동의어 포함

고급검색

인명/단체명

저자정보 상세정보
인명/단체명을 입력하세요.

키워드

  • 대표어

  • 외국어

-

목차보기

Title Page 2

Abstract 5

Contents 6

Introduction 9

Materials and Methods 13

Cells and culture 13

Cloning and design of CAR constructs 14

Construction of the membrane-bound cytokine (mbIL-2, mbIL-15) cassette 14

Retrovirus production and transduction of NK cells 15

Generation of fluorescent labeled target cells 16

Flow cytometry analysis of CAR surface expression, HER2 level and cytokine receptors 17

Europium based NK cell cytotoxicity assay 17

ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Release Assay) 18

Flow cytometric analysis of intrinsic Erk and NFκB, S6 and STAT5 phosphorylation signaling 18

NK cell cytotoxic degranulation assay 19

Intracellular IFN-γ staining assay 20

Proliferation assay 20

Apoptosis assay (Annexin V and 7-AAD staining) 21

3D Tumor spheroid formation and cytotoxicity assay 21

Statistical analysis 22

Results 23

Generation of CAR that target HER2 and display antigen-specific cell killing activity 23

IgG4 Hinge show that the most efficient antitumor effect among hinge variants 24

IgG4Hinge NK CAR with long length showed the most powerful efficacy against HER2 expressing target cells 25

Evaluation of antitumor activity of long form IgG4Hinge CAR in NK92 cell lines 26

Engineering membrane bound form cytokine combined with CAR constructs in NKL cell lines 27

Evaluation of membrane-bound form IL-2 CAR-NK92 cells for enhanced clinical applicability 29

Membrane-bound form cytokine CAR-NK92 cells exhibit enhanced antitumor activity following cytokine starvation 30

Membrane-bound cytokine CAR-NK92 exhibit superior antitumor activity in 3D tumor spheroid models in vitro 30

Discussion 32

References 53

국문요약 61

List of Figures 8

Figure 1. Construction and functional evaluation of HER2-specific CAR-NKL and Flow... 35

Figure 2. Evaluation of hinge region variants in HER2-specific CAR-NKL constructs 37

Figure 3. Functional analysis of CAR-NKLs with varying IgG4 hinge lengths targeting... 40

Figure 4. Functional evaluation of HER2-specific CARs with IgG4 (L) hinge in the NK92... 42

Figure 5. Membrane-bound form IL-2, IL-15 Cytokine CAR-NKL constructs to enhance... 45

Figure 6. Membrane-bound form IL-2 Cytokine CAR-NK92 constructs to enhance... 49

Figure 7. Membrane-bound form IL-2 cytokine CAR-NK92 cells maintain superior... 51

초록보기

 키메라 항원 수용체(CAR)는 합성 수용체로, T 세포를 기반으로 제작하여 임상에서 성공적인 반응을 이끌어내었다. 특히 CD19을 타겟으로 한 CAR 치료가 큰 성과를 거두었으나, 고형암에서는 비표적 독성, 사이토카인 폭풍 증후군(CRS), 신경독성 등의 한계로 인해 그 효과가 제한적이다.

이러한 한계를 극복하기 위해, 우리는 선천적 세포독성을 지니고 이식편대숙주병 위험이 낮은 NK 세포를 이용해 HER2를 표적하는 CAR-NK세포를 개발해 동종 "off-the-shelf" 치료제의 가능성을 열었다. 우리는 항-HER2CAR를 설계하고, NK 세포 특이적 활성화 기전을 반영한 시그널 전달 도메인과 결합되는 힌지 도메인을 최적화하여 기능을 향상시켰다. 여러 힌지 도메인 중에서, 긴 IgG4 힌지를 포함한 CAR가 HER2 양성 암세포에 대한 시험관(in vitro) 항종양 활성이 가장 우수함을 확인하였다. 또한, NK 세포 유래 시너지 신호 전달 도메인을 도입한 CAR가 T 세포 유래 시그널 도메인을 사용한 CAR보다 다양한 HER2 양성 종양 모델에서 우월한 기능성을 나타냈다.

세포의 지속 생존력과 외부 사이토카인 의존성을 줄이기 위해, 우리는 막결합형 사이토카인을 동시 발현하는 CAR-NK 세포를 제작하였다. 이 사이토카인 일체형 CAR-NK 세포는 증식이 증가하고, 세포자멸이 감소하며, 세포독성이 강화되었다. 3차원 종양 스페로이드 모델에서도 이들 세포는 종양 침투력과 살상 효율이 우수함을 보여주었다.

종합적으로, 본 연구는 힌지 도메인 최적화 및 내재적 사이토카인 지지 구조를 갖춘 CAR-NK 세포가 고형암 면역치료에 있어 안전하고 효과적인 전략이 될 수 있음을 보여주며, 차세대 세포 치료의 새로운 패러다임을 제시한다.

추천서가 (다양한 추천 자료를 만나보세요)

권호기사보기

권호기사 목록 테이블로 기사명, 저자명, 페이지, 원문, 기사목차 순으로 되어있습니다.
기사명 저자명 페이지 원문 기사목차

권호

기사명 원문보기 기사목차
닫기