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Title Page 2

Contents 5

List of Abbreviations 9

Abstract 10

1. Introduction 12

2. Materials and Methods 16

2.1. Materials 16

2.2. Extraction with CE 16

2.3. T.P. alopecia Model 17

2.4. Immunoassay with Enzyme-Linking (ELISA) 20

2.5. Preparation of Hair, Skin, Liver, and Kidney samples 20

2.6. Density and Width of Hair Types 20

2.7. Hematoxylin and Eosin (H&E) Staining 20

2.8. Western Blot 20

2.9. Quantitative Real-Time PCR 21

2.10. Ultra Performance Liquid Chromatography/High Performance Liquid Chromatography 22

2.11. 5α-Reductase Assay 22

2.12. Molecular Docking 22

2.13. Statistical analysis 23

3. Results 24

3.1. CE blocks hair regression in the T.P. AGA mouse model 24

3.2. CE inhibits Apoptotic effects 28

3.3. CE prevents hair loss by inhibition of androgen receptor 30

3.4. Non-toxicity in the kidney and liver of mice orally administered CE 33

3.5. Compounds present in CE indicate effective inhibition of androgenic alopecia 36

1) 5α-Reductase1 39

2) 5α-Reductase2 39

4. Discussion 46

References 50

논문요약(국문) 53

List of Tables 7

Table 1. List of Primer sequences used for quantitative real-time PCR 21

Table 2. UPLC of CE 38

Table 3. Docking Score of 5α-Reductase1 (upper table), 5α-Reductase2... 40

List of Figures 8

Figure 1. Preliminary experiment for dose determination 19

Figure 2. CE's effect on dorsal skin 27

Figure 3. Anti-apoptotic effect on hair growth 29

Figure 4. Anti-alopecia effect on the expression of protein and mRNA 32

Figure 5. Safety of oral injection; Liver and Kidney 35

Figure 6. Identification of active compounds in CE 45

Figure 7. Graphical abstract of CE and its compound inhibited AGA 49

초록보기

 남성형 탈모는 주로 5알파-환원효소와 디하이드로테스토스테론 간의 결합에 의해 발병한다. 남성형 탈모는 삶을 위협할 정도로 위험한 질병은 아니지만, 우울증이나 사회적 소외 등의 심리적 문제점을 야기할 수 있다. 피나스테리드는 2형 5알파-환원효소 억제제로써 기능하여 남성형 탈모에 사용된다. 하지만, 성욕 저하, 발기 부전 등과 같은 부작용을 초래할 수 있다. 동남아시아의 전통 약초인 코나루스세미데칸드로스는 항탈모효능 가능성을 보였다. 하지만, 그것의 경구 투여 효과와유효화합물에 대한 연구는 아직 진행된 바 없다. 이 연구는 코나루스 에탄올 추출물 경구 투여의 가능성을 확인하고 추출물 내 유효화합물을 찾는 것에 초점을 두었다. 추출물은 테스토스테론 프로파이오네이트로 유도된 남성형 탈모 모델을 사용하여 평가되었다. 마우스를 안락사 시킨 뒤, 추출물 경구 투여의 항 탈모 효능을 확인하기 위해 모발 비교를 통한 모발 종류 및 굵기 확인, ELISA, H&E staining, 웨스턴 블롯 및 qPCR 등의 방법이 사용되었다. 추출물 내 유효화합물을 분석하기 위해 분자 도킹과 5알파-환원효소 활성 확인 실험을 진행하였다. 추출물은 경구 투여시 피나스테리드 처리 군과 유사한 모발 회복력을 보였다. 특히, 굵기와 모발 종류에서의 향상된 효능을 보였다. 조직병리학적 관점에서 보았을 때, 모발 탈락이 감소되었고 세포사멸 인자들과 안드로겐 수용체의 발현량이 감소하였다. 더하여, 경구투여 시 간과 신장에서 독성을 보이지 않았다. 추출물 내 플라보노이드와 같은 화합물들은 안드로겐 수용체와 5알파-환원효소의 활성을 억제하였다. 특히, 미퀠리아닌의 경우 피나스테리드보다 높은 결합력을 보였으며, 약물 후보로써 가능성을 보였다. 추출물은 탈모를 억제하고 모발 회복성, 안드로겐 수용체와 DKK-1, TGF-β1 및 IL-6와 같은 하위 인자를 억제하였다. 또한, 간과 신장에 독성을 띄지 않으면서 경구 약물로 사용될 수 있는 가능성을 보여주었다. 미퀠리아닌으로 대표되는 추출물 내 화합물들은 추후 연구에서 평가를 통해 약물 가능성을 평가할 필요가 있다고 사료된다.

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