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The cyclic undecapeptide cyclosporin A (CyA), one of the
most valuable immunosuppressive drugs, is produced
nonribosomally by a multifunctional cyclosporin synthetase
enzyme complex by the filamentous fungus Tolypocladium
niveum. To increase CyA productivity by wild-type T. niveum
(ATCC 34921), random mutagenesis was first performed
using an antifungal agar-plug colony assay (APCA) selection
approach. This generated a mutant strain producing
more than 9-fold greater CyA than the wild-type strain.
Additionally, a foreign bacterial gene, Vitreoscilla hemoglobin
gene (VHb), was transformed via protoplast regeneration
and its transcription was confirmed by RT-PCR in the
UV-irradiated mutant cell. This led to an additional 33.5%
increase of CyA production. Although most protoplastregenerated
T. niveum transformants tend to lose CyA
productivity, the optimized combination of random
mutagenesis and protoplast transformation described here
should be an efficient strategy to generate a commercially
valuable, yet metabolite low-producing, fungal species,
such as CyA-producing T. niveum.*표시는 필수 입력사항입니다.
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