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Granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF)

는 과립구 및 대식세포뿐만 아니라 상피세포의 증식과 분화를

자극하는 당단백질이며, 최근 생산된 벼세포 유래 재조합 GMCSF

(rrhGM-CSF)는 감염원으로부터 안전하고 당사슬이 매우

풍부하여 물질의 안정성 혹은 효과의 지속성을 높여 주는 것으로 알려졌다. 본 실험에서는 간 재생 능력이 우수한 흰쥐를 실험

모델로 하여 간의 78%를 제거한 후, 간 재생을 유도하는 과정에

서 rrhGM-CSF를 처리하고, 시간 경과에 따라 형태변화의 차이

와 더불어 단백질 발현 분석법과 면역조직화학법을 이용하여

PCNA 발현에 미치는 효과에 대해서 알아보고자 하였다. rrhGMCSF는

간 재생 속도를 뚜렷이 증가시키지는 못하였으나, 대조군

에 비해 실험군에서는 재생 초기에 간 세포판의 붕괴와 재구성 시

기를 다소 앞당기는 것으로 관찰되었다. 증식 중인 세포에서 증가

하는 것으로 알려져 있는 핵단백질인 proliferating cell nuclear

antigen (PCNA)의 간 조직에서의 분포와 발현 정도를 보면 부분

간절제 후 12시간과 24시간에서는 PCNA 단백질이 두 그룹에서

조금씩 발현되다가 간 절제 3일과 5일이 경과한 실험군에서 단

백질이 높게 발현되었다. 간 재생이 진행될수록 간 조직 전체에

서 고르게 PCNA 양성반응이 나타났으며, 대조군 보다 실험군에

서 반응성이 더 뚜렷한 것으로 나타났다. 이러한 결과들로 보아

부분 간절제 후 간 재생을 유도하는 과정에서 rrhGM-CSF가 세

포분열을 촉진시키는 인자들 중의 하나로 작용하여 간 재생에

효과를 나타낼 수 있을 것으로 사료된다.

Liver regeneration is a result of highly coordinated proliferation of hepatocytes and nonparenchymal liver cells. Partial

hepatectomy (PH) is the most often used stimulus to study liver regeneration because, compared with other methods that

use hepatic toxins, it is not associated with the tissue injury and inflammation, and the initiation of the regenerative stimulus

is precisely defined. Granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF), which is a cytokine able to regulate

the proliferation and differentiation of epithelial cells, was first identified as the most potent mitogen for bone marrow.

Particularly, rrhGM-CSF, which is highly glycosylated and sustained longer than any other types of GM-CSF in the blood

circulation, was specifically produced from rice cell culture. In this experiment, effects of rrhGM-CSF administration

were evaluated in the regenerating liver after 78% PH of rats. Morphological changes induced by PH were characterized

by destroyed hepatocyte plate around the central vein and enlarged nuclear cytoplasmic ratio and increased hepatocytes

with two nuclei. And then, proliferation of liver cells (parenchymal and nonparenchymal) and rearrangement of plates and

lobules seemed to be carried out during liver regeneration. These alterations in the experimental group preceded those of

the control. Since proliferating cell nuclear antigen (PCNA) is known to be a nuclear protein maximally elevated in the S

phase of proliferating cells, the protein was used as a marker of liver regeneration after PH in rats. PCNA levels by western

blot analysis and immunohistology were compared between the two groups. PCNA protein expression of two groups

at 12 hr and 24 hr after injury showed similar pattern. The protein expression showed the peak at 3 days in both groups,

however, the protein level of the experimental group was higher than that of the control. On immunohistochemical observations,

the reaction product of PCNA was localized at the nuclei of proliferating cells and the positive reaction in experimental

group at 3 days was clearly stronger than that in control group. The results by Western blotting and immunohistology

for PCNA showed similar pattern in terms of the protein levels. In conclusion, rrhGM-CSF administration during

liver regeneration after 78% PH accelerated breakdown and restoration of the hepatic plate and expression of PCNA.

These results suggest that rrhGM-CSF might play an important role during liver regeneration in rats.

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번호 참고문헌 국회도서관 소장유무
1 Use of proliferating cell nuclear antigen as a marker of liver regeneration after partial hepatectomy in rats 네이버 미소장
2 Regulation of myeloid development and function by colony stimulating factors. 네이버 미소장
3 REGENERATION OF MAMMALIAN LIVER. 네이버 미소장
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12 G-CSF Administration in a Small-for-Size Liver Model 네이버 미소장
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15 Liver regeneration 네이버 미소장
16 Autoantibody to a nuclear antigen in proliferating cells. 네이버 미소장
17 Mourella M, Rubalcava B: Regeneration of the liver after carbon tetrachloride. J Biol Chem 256 : 1656-1660, 1981. 미소장
18 Monoclonal antibodies to a nuclear protein (PCNA/cyclin) associated with DNA replication 네이버 미소장
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