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작물 근권 토양으로부터 분리한 5,000여 길항 균주로부터 Erwinia 및 Pseudomonas등의 세균과 Trichoderma, Colletotrichum 등 곰팡이의 성장을 동시에 억제하는 Bacillus sp. N 32 균주를 선발 동정 하였다. 특히 Bacillus sp. N32 균주는 고추 탄저병균인 Colletotrichum gloeosporioides에 대하여 열에 저항성이 있는 단백질과 열에 민감한 단백질의 2종류의 항균 단백질을 동시에 생산함을 단백질 침전과 활성 검정을 통하여 확인하였다. 이 항균 단백질들을 FPLC를 이용한 gel filtration chromatography방법으로 분리한 후 SDS-PAGE와 bioautography로 항균력을 확인하였다. 또한 이 항균 단백질의 유전자들을 선발하기 위하여 기존의 알려진 그람양성 세균의 대표적인 열 저항성 항균 펩타이드 생합성 유전자 서열을 primer로 이용한 PCR 방법으로 fengycin의 생합성 유전자 단편을 분리하고 이 PCR 산물을 이용하여 Bacillus sp. N32 균주의 cosmid library로부터 fengycin의 생합성 유전자 cluster중 일부를 분리하여 염기서열을 분석 하였다. 또한 열에 민감한 항균 단백질 생산 유전자는 이 항균 단백질을 SDS-PAGE 및 electroblotting으로 분리한 뒤 N-terminal 부위의 15개의 아미노산 서열을 분석하고 이를 DNA 염기배열로 치환한 다음 probe로 이용하여 λ-ZAP library로부터 항균 단백질 생산 유전자가 포함된 다수의 clone을 선발 하였다.(2005년 10월 25일 접수, 2006년 3월 20일 수리)색인어 : 고추 탄저병균, 아미노산 서열, 항균 펩타이드, 포화도, fengycin 생합성 유전자, cosmid library, Rhizobacteria, λ-ZAP library.

An antagonistic bacterial isolate, that inhibits the growth of plant pathogens, was selected and identified from 5,000 isolates screened from the rhizosphere of various crop plants. An isolate Bacillus sp. N32, tested against Colletotrichum gloeosporioides causing anthracnose disease in hot pepper, produced both a heat resistant antifungal protein and a heat sensitive antifungal protein. The heat resistant protein was partially purified by Ammonium sulfate fractionation and gel filtration chromatography. The bioautography showed that the proteins possessed high antifungal activity. The biosynthetic gene cluster responsible for the heat resistant antifungal protein was cloned from cosmid library using DNA probe obtained from PCR product with the primers targeting the conserved nucleotide sequence of the synthetic genes reported earlier. Most of the clones obtained showed higher homology to fengycin antibiotic synthetic gene family reported earlier. On the other hand, the heat sensitive protein was isolated from SDS-PAGE and electroblotting to determine the N-terminal amino acid sequences. The heat sensitive antifungal protein gene was cloned from the λ-ZAP libraries using a DNA probe based on the N-terminal amino acid sequences of the heat sensitive protein. We are contemplating to clone and sequence the whole gene cluster encoding the heat sensitive protein for further analysis.

권호기사

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기사명 저자명 페이지 원문 목차
강원도 고랭지 Chlorpyrifos 포장저항성 배추좀나방(Plutella xylostella L.)의 저항성 특성 조준모, 김경주, 임춘근, 허장현, 김성수, 박홍열 pp.50-55

2-Mercaptobenzoxazole 및 2-Mercaptobenzimidazole의 새로운 합성법 정근회, 우재춘, 김대황, 고영관, 류재욱, 이동국, 구동완 pp.66-68

충북지역 산지 고추와 유동 고춧가루 중 잔류농약 모니터링 및 위해성 평가 김광일, 김흥태, 경기성, 정찬희, 안명수, 심석원, 윤상순, 김윤정, 이광구, 이기두, 이원재, 임정빈, 진충우 pp.15-21

Bacillus sp. N32 균주가 생산하는 항균 단백질 특성 이미혜, 이석찬, 정태영, 박인철, 윤상홍, 구본성, 여윤수, 김수진 pp.56-65

빨간집모기(Culex pipiens pallens) 유충에 대한 식물오일의 살충효과 강신호, 김길하, 김민기, 서동규 pp.43-49

고체상에 연결된 옥심 에스테르를 이용한 다이하이드로-1,4-다이옥신 및 다이하이드로-1,4-옥사타인 카르복스아닐라이드 유도체의 고체상 합성 한호규, 배수열, 남기달 pp.1-6

새로운 5-benzofuryl-2-[1-(alkoxyimino)alkyl]-3hydroxycyclo-hex-2-en-1-one 유도체들의 제초활성에 관한 비교분자 유사성지수 분석 성낙도, 정영호, 정기성, 정훈성 pp.7-14

고추 탄저병균에 대한 13종 살균제의 살균 활성 최용호, 조광연, 김흥태, 김진철, 최경자, 장경수 pp.36-42

인삼 가공중 잔류농약의 감소계수연구. 1 임무혁, 최동미, 장문익, 홍무기, 권광일, 박건상, 정지윤, 이경진, 윤원갑, 우건조 pp.22-27

Flucetosulfuron 수면부상형 입제의 최적화 및 제초효과 김도순, 김태영, 이종남, 황기환, 이용상 pp.28-35

참고문헌 (20건) : 자료제공( 네이버학술정보 )

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번호 참고문헌 국회도서관 소장유무
1 (2004) Structural and functional characterization of gene clusters directing nonribosomal synthesis of bioactive cyclic lipopeptides in Bacillus amyloliquefaciens strain FZB42, 미소장
2 (1991) A new family of plant antifungal proteins, 미소장
3 (1998) Molecular cloning and characterization of fengycin synthetase gene fenB from Bacillus subtilis, 미소장
4 (1998) Molecular biological access to the chemistry of unknown soil microbe a new frontier for natural products, 미소장
5 (1999) are responsible for conversion of Bacillus subtilis 168 to plipastatin production, 미소장
6 (1980) Biological control of crown gall through production of agrocin 84, 미소장
7 (1996) A non-ribpsomal system of peptide biosynthesis, 미소장
8 (1998) Characterization of a heat resistant antimicrobial peptide secreted by Bacillus subtilis A 405, 미소장
9 (1998) Rapid and efficient isolation of gene for biosynthesis of peptide antibiotics from gram-positive bacterial Strains, 미소장
10 (1995) Isolation and characterization of peptide antibiotics synthetase from Bacillus subtilis isolated from Korea soil, Myongji University 미소장
11 (1994) a special class of pore- forming lipopeptides, 미소장
12 (2005) Functional analyses of a fengycin synthetase fenD, 미소장
13 (1999) Functional and transcriptional analyses of a fengycin synthetase gene, fenC, from Bacillus subtilis., 미소장
14 Characterization of antimicrobial proteins produced by Bacillus sp, 미소장
15 National Institute of Agricultural Biotechnology 1Department of Genetic Engineering, In-Cheol Park Sungkyunkwan University 미소장
16 (1997) Sequence completion, identification and definition of the fengycin operon in Bacillus subtilis 168., 미소장
17 (1986) A novel antifungal lipopeptide antibiotic produced by Bacillus subtilis F-29-3, 미소장
18 (1970) Effect of zwitterionic buffer of small masses of protein with bicinichoninic acid, 미소장
19 (1998) Prokaryotes: the unseen majority, 미소장
20 (1993) 897~916 American Society for Microbiology, 미소장