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Mouse thymosin β-4 (TB4) 유전자를 Escherichia coli에서 intein-tag 융합 단백질로 발현시키고 정제하였다. 재조합 TB4-intein 융합 단백질의 분자량을 10% glycine SDS-PAGE로 확인한 결과, 세포내 soluble 분획에서 60 kDa의 단백질을 얻을 수 있었고, 유도발현 최적 조건은 0.1 mM IPTG, 25℃에서 3시간 동안 유도 발현할 때가 최적임을 확인하였다. TB4 만을 얻기 위해서 유도발현된 TB4-intein을 DTT를 이용해 self-cleavage를 일으킨 다음, chitin bead를 이용한 친화성 크로마토그라피로 정제 후 분자량을 확인 한 결과, 5 kDa으로 확인되었으며, 순도는 95% 이상 이었다. 정제한 recombinant TB4가 생물학적 기능을 보유하고 있는지 확인을 하기 위하여, TB4를 농도 별(1~1,000 ng/ml)로 하여 HT1080 cell을 이용한 cell migration을 측정한 결과, 모든 농도에서 recombinant TB4가 화학합성한 TB4 보다 약 20% 이상 높은 활성을 보였으며, recombinant TB4 1 ng/ml의 농도에서 cell migration 활성이 가장 높게 나타났다. Recombinant TB4를 마우스 상처 부위에 5일 동안 매일 처리한 결과(최종 처리 농도 0.5 mg/ml), 화학합성 TB4 보다 recombinant TB4의 상처치유 활성이 약 35% 더 높음을 알 수 있었다. 이상의 결과는 recombinant TB4가 화학합성 TB4보다 cell migration과 상처치유에 훨씬 높은 활성을 나타냄을 보여주고 있다.

Thymosin β-4 (TB4) is a small peptide composed of 43 amino acids. To obtain sufficient biologically active mouse TB4 economically, we cloned and overexpressed this gene in an Escherichia coli system. With the isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside induction of the E. coli transformant, TB4 fusion protein with intein- and chitin-binding domain was successfully expressed in the soluble fraction within the E. coli cell. The TB4-intein–chitin-binding domain fusion protein was purified from the soluble fraction of E. coli cell lysate. The affinity chromatography with chitin beads and dithiothreitol-mediated intein self-cleavage reaction releases the TB4 peptide into the stripping solution. Sodium dodecyl sulphate–polyacrylamide gel electrophoresis and Western blot analyses were used to confirm that the recombinant TB4 peptide was produced with the expected size of 5 kDa. We found that the recombinant TB4 stimulated cell migration in the transwell plate chamber assay. After 18 hr of the treatment of the recombinant TB4 with 1 ng/ml concentration, the migration of the HT1080 cell was increased by 20% compared with that of the chemically synthesized TB4. The recombinant TB4 was also observed to promote the healing of a wound area in C57BL/6 mice by as high as 35% compared with that of the chemically synthesized TB4. These results suggest that the recombinant TB4 has better biological activity for cell migration and wound healing than that of the chemically synthesized TB4 peptide.

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Efficacy verification of four hangover cure products for reducing blood alcohol and acetaldehyde concentrations in sprague-dawley rats = 국내 시판 숙취해소제 4종의 혈중 알코올 및 아세탈데히드 농도 감소 효능 비교 Min Ji Han, Yu Jung Jin, Se-Young Choung p. 79-85

Facilitation of glucose uptake by lupeol through the activation of the PI3K/AKT and AMPK dependent pathways in 3T3-L1 adipocytes = 3T3-L1 지방세포에서 PI3K/AKT 및 AMPK 경로의 활성화를 통한 루페올의 포도당 흡수촉진 효과 Hyun-Ah Lee, Ji-Sook Han p. 86-93

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THP-1 세포에서 거품세포 형성과 단핵구 분화 및 활성화에서 7-ketocholesterol의 역할 = Suppression of PMA-induced differentiation via foam cell formation in THP-1 cells by 7-ketocholesterol 이미선, 박시은, 김관회, 박영철 p. 142-147

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1 Belsky, J. B., Rivers, E. P., Filbin, M. R., Lee, P. J. and Morris, D. C. 2018. Thymosin beta 4 regulation of actin in sepsis. Expert Opin. Biol. Ther. 18, 193-197. 미소장
2 Bock-Marquette, I., Saxena, A., White, M. D., DiMaio, J. M. and Srivastava, D. 2004. Thymosin β4 activates integrinlinked kinase and promotes cardiac cell migration, survival and cardiac repair. Nature 432, 466-472. 미소장
3 Carpintero, P., Anadon, R., Dı́az-Regueira, S. and Gomez-Marquez, J. 1999. Expression of thymosin β 4 messenger RNA in normal and kainate-treated rat forebrain. Neuroscience 90, 1433-1444. 미소장
4 Cha, H. J., Jeong, M. J. and Kleinman, H. K. 2003. Role of thymosin β4 in tumor metastasis and angiogenesis. J. Natl. Cancer Inst. 95, 1674-1680. 미소장
5 Dai, B., Sha, R. N., Yuan, J. L. and Liu, D. J. 2021. Multiple potential roles of thymosin β4 in the growth and development of hair follicles. J. Cell Mol. Med. 25, 1350-1358. 미소장
6 Esipov, R. S., Makarov, D. A., Stepanenko, V. N. and Miroshnikov, A. I. 2016. Development of the intein-mediated method for production of recombinant thymosin β4 from the acetylated in vivo fusion protein. J. Biotechnol. 228, 73-81. 미소장
7 Freeman, K. W., Bowman, B. R. and Zetter, B. R. 2011. Regenerative protein thymosin β-4 is a novel regulator of purinergic signaling. FASEB J. 25: 907-915. 미소장
8 Gómez-Márquez J., Dosil, M., Segade, F., Bustelo, X. R., Pichel, J. G., Dominguez, F. and Freire, M. 1989. Thymosinbeta 4 gene, preliminary characterization and expression in tissues, thymic cells, and lymphocytes. J. Immunol. 143, 2740-2744. 미소장
9 Kaur, H. and Mutus, B. 2012. Platelet function and thymosin β4. Biol. Chem. 393, 595-598. 미소장
10 Kaveh-Baghbaderani, Y., Blank-Shim, S. A., Koch, T. and Berensmeier, S. 2018. Selective release of overexpressed recombinant proteins from E. coli cells facilitates one-step chromatographic purification of peptide-tagged green fluorescent protein variants. Protein Expr. Purif. 152, 155-160. 미소장
11 Kim, S. H. and Kwon, J. K. 2014. Thymosin beta 4 improves dermal burn wound healing via downregulation of receptor of advanced glycation end products in db/db mice. Biochim. Biophys. Acta. 1840, 3452-3459. 미소장
12 Kobayashi, T., Okada, F., Fujii, N., Tomita, N., Ito, S., Tazawa, H. and Hosokawa, M. 2002. Thymosin-β4 regulates motility and metastasis of malignant mouse fibrosarcoma cells. Am. J. Pathol. 160, 869-882. 미소장
13 Kozaczuk, A., Selmi, A. and Bednarek, R. 2013. Bacterial expression, purification and angiogenesis-promoting activity of human thymosin β4. Protein Expr. Purif. 90, 142-152. 미소장
14 Li, T., Ma, S. Y., Tang, X. C., Nie, L. Y. and Huang, H. 2013. Production and characterization of highly purified recombinant thymosin beta 4 in Escherichia coli. Protein Expr. Purif. 90, 90-95. 미소장
15 Li, X., Zheng, L., Peng, F., Qi, C., Zhang, X., Zhou, A. and Wu, S. 2007. Recombinant thymosin beta 4 can promote fullthickness cutaneous wound healing. Protein Exp. Purif. 56, 229-236. 미소장
16 Lv, S., Cai, H., Xu, Y., Dai, J., Rong, X. and Zheng, L. 2020. Thymosin-β 4 induces angiogenesis in critical limb ischemia mice via regulating Notch/NF-κB pathway. Int. J. Mol. Med. 46, 1347-1358. 미소장
17 Malinda, K. M., Goldstein, A. L. and Kleinman, H. K. 1997. Thymosin beta 4 stimulates directional migration of human umbilical vein endothelial cells. FASEB J. 11, 474-481. 미소장
18 Malinda, K. M., Sidhu, G. S., Mani, H., Banaudha, K., Maheshwari, R. K., Goldstein, A. L. and Kleinman, H. K. 1999. Thymosin β4 accelerates wound healing. J. Invest. Dermatol. 113, 364-368. 미소장
19 Martinez, A., Knappskog, P. M., Olafsdottir, S., Doskeland, A. P., Eiken, H. G., Svebak, R. M., Bozzini, M., Apold, J. and Flatmark, T. 1995. Expression of recombinant human phenylalanine hydroxylase as fusion protein in Escherichia coli circumvents proteolytic degradation by host cell proteases. Isolation and characterization of the wild-type enzyme. Biochem. J. 306, 589-597. 미소장
20 Otto, A., Müller, C., Huff, T. and Hannappel, E. 2002. Chemotherapeutic drugs change actin skeleton organization and the expression of β-thymosins in human breast cancer cells. J. Cancer Res. Clin. Oncol. 128, 247-256. 미소장
21 Philp, D., Goldstein, A. L. and Kleinman, H. K. 2004. Thymosin β 4 promotes angiogenesis, wound healing, and hair follicle development. J. Coloproctol. 125, 113-115. 미소장
22 Qiu, P., Kurpakus-Wheater, M. and Sosne, G. 2007. Matrix metalloproteinase activity is necessary for thymosin beta 4promotion of epithelial cell migration. J. Cell. Physiol. 212, 165-173. 미소장
23 Renga, G., Oikonomou, V., Stincardini, C., Pariano, M., Borghi, M., Costantini, C., Bartoli, A., Garaci, E., Goldstein, A. L. and Romani, L. 2018. Thymosin β4 limits inflammation through autophagy. Expert Opin. Biol. Ther. 18, 171-175. 미소장
24 Skosyrev, V. S., Kulesskiy, E. A., Yakhnin, A. V., Temirov, Y. V. and Vinokurov, L. M. 2003. Expression of the recombinant antibacterial peptide sarcotoxin IA in Escherichia coli cells. Protein Expr. Purif. 28, 350-356. 미소장
25 Sosne, G. 2018. Thymosin beta 4 and the eye: the journey from bench to bedside. Expert Opin. Biol. Ther. 18, 99-104. 미소장
26 Stoeckli, M., Chaurand, P., Hallahan, D. E. and Caprioli, R. M. 2001. Imaging mass spectrometry: a new technology for the analysis of protein expression in mammalian tissues. Nat. Med. 7, 493-496. 미소장
27 Tsuji, Y., Kitahara-Tanabe, N., Noguchi, K., Gatanaga, T., Mizuno, D. and Soma, G. 1989. Production in Escherichia coli of human thymosin beta 4 as chimeric protein with human tumor necrosis factor. Biochem. Int. 18, 501-508. 미소장
28 Wang, X., Yang, G., Li, S., Gao, M., Zhao, P. and Zhao, L. 2013. The Escherichia coli-derived thymosin β4 concatemer promotes cell proliferation and healing wound in mice. Biomed. Res. Int. 2013, Article ID 241721. 미소장
29 Xu, T. J., Wang, Q., Ma, X. W., Zhang, Z., Zhang, W., Xue, X. C., Zhang, C., Hao, Q., Li, W. N., Zhang, Y. Q. and Li, M. 2013. A novel dimeric thymosin beta 4 with enhanced activities accelerates the rate of wound healing. Drug Des. Devel. Ther. 7, 1075-1088. 미소장
30 Yu, R., Cao, S., Liu, Y., Si, X., Fang, T., Sun, X., Dai, H., Xu, J., Fang, H. and Chen, W. 2018. Highly effective biosynthesis of N-acetylated human thymosin β4 (Tβ4) in Escherichia coli. Artif. Cells Nanomed. Biotechnol. 46, S95-S104. 미소장
31 Zhou, Q., Jiang, S., Ma, K. and Li, C. 2014. Expression of a novel recombinant fusion protein BVN-Tβ4 and its effects on diabetic wound healing. J. Biosci. Bioeng. 118, 341-343. 미소장

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