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배경: 액체 크로마토그래피-탠덤 질량분석법(Liquid chromatogra- phy-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)은 전혈 내 면역억제 제 정량법 중 높은 정확도와 다중검사 가능으로 인해 선호되는 검 사법이다. 그러나 임상검사실에서의 도입은 분석법 개발 및 검증의 복잡성 때문에 특히 기술 전문성이 제한된 기관에서는 어려움이 따를 수 있다. LC-MS/MS 기반 검사의 보다 폭넓은 도입을 촉진하 기 위해, 대한임상화학회 임상질량분석위원회는 국내 검사실에서 사용중인 LC-MS/MS 기반 면역억제제 분석법의 검사지침서를 수 집 및 분석하였다.
방법: LC-MS/MS 기반 면역억제제 검사를 독자적으로 개발하고 검증한 7개 기관의 검사지침서를 수집하여 분석하였다. 주요 항목 으로는 검체 채취, 시약, 검체 전처리, 액체 크로마토그래피 및 질 량분석법 관련 조건이 포함되었다.
결과: 타크로리무스 , 사이클로스포린 A, 시롤리무스, 에베로리무 스 등 4종의 면역억제제를 모두 분석하는 기관은 4개였으며, 나머 지 기관은 2-3종을 측정하였다. 모든 기관은 EDTA로 항응고 처리 된 전혈을 사용하였으며, 단백질 침전을 위해 ZnSO4와 유기용매 를 활용하였다. 역상 크로마토그래피법으로 C18 칼럼과 그래디언 트 용출 방식을 가장 일반적으로 사용하였다. 모든 기관이 시판 보 정물질 및 정도관리물질을 사용하였으며, 내부표준물질은 기관마 다 달랐으나 사이클로스포린 D와 ascomycin이 가장 많이 사용되 었다. LC-MS/MS 장비 및 분석 조건은 기관 간 상이하였으나, 모두 전자분무 이온화법(electrospray ionization)을 사용하고, 다중반 응 모니터링법으로 암모늄 부가이온을 분석하였다.
결론: 본 연구 결과는 면역억제제 치료 약물 모니터링을 위한 현재 LC-MS/MS 분석법을 종합적으로 요약한 것으로 , 향후 LC-MS/MS 기반 면역억제제 정량검사를 도입하거나 기존의 검사법을 개선하 고자 하는 임상검사실에 실질적인 참고자료로 활용될 수 있을 것 이다.*표시는 필수 입력사항입니다.
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