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기사명 | 저자명 | 페이지 | 원문 | 기사목차 |
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대표형(전거형, Authority) | 생물정보 | 이형(異形, Variant) | 소속 | 직위 | 직업 | 활동분야 | 주기 | 서지 | |
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목차
표제지=0,1,1
제출문=0,2,1
보고서 초록/이종교=i,3,1
요약문=ii,4,3
SUMMARY(영문요약문)=v,7,2
CONTENTS(영문목차)=vii,9,3
목차=x,12,5
제1장 연구개발과제의 개요=1,17,1
제1절 연구개발의 목적=1,17,1
제2절 연구개발의 필요성=1,17,2
제3절 연구개발의 범위=2,18,2
제2장 국내외 기술개발 현황=4,20,6
제3장 연구개발수행 내용 및 결과=10,26,1
제1절 연구내용=10,26,1
1. 시험관체계 연구=10,26,1
가. HSV-1 TK의 효소학적 연구=10,26,1
(1) TK 유전자 발현을 위한 HSV-1 돌연변이 TK유전자의 클로닝=10,26,1
(2) recTK 단백질의 분리=10,26,1
(3) 돌연변이 TK의 TMPK활성=10,26,1
(4) TK저해제 탐색=10,26,1
나. LAT 유전자의 클로닝 및 염기서열 결정=10,26,1
2. 세포체계 연구=10,26,1
가. 세포체계 잠복감염 및 재활성 모델=11,27,1
(1) 마우스 일차 신경세포 배양=11,27,1
(2) 신경세포의 바이러스 잠복감염 유도 및 확인=11,27,1
(3) 잠복감염된 신경세포로부터 재활성 유도 및 확인=11,27,1
(4) 돌연변이주들의 잠복감염력 및 재활성력 비교=11,27,1
나. TK와 세포내 물질의 상호작용 연구=11,27,2
(1) 세포 추출물의 2D 전기영동=12,28,1
(2) 세포내 thymidine 및 유도체 분석=12,28,1
(3) HSV-1의 cell tropism=12,28,1
(4) HSV 감염세포의 TK 단백질의 localization=12,28,1
3. 동물체계 연구=12,28,1
제2절 실험재료 및 방법=12,28,1
1. 실험재료=12,28,1
가. 세포=12,28,1
나. 바이러스=12,28,1
다. 박테리아=12,28,2
라. 시험동물=13,29,1
마. plasmid DNA=13,29,1
바. 시험약물=13,29,1
2. 실험방법=13,29,1
가. 세포주배양=13,29,1
나. 마우스 신경세포의 일차배양=14,30,1
다. 바이러스의 증식=14,30,1
라. 바이러스 역가측정=14,30,1
마. 항바이러스약효검색=14,30,2
바. 세포독성 검색=15,31,1
사. MTT검색법=15,31,2
아. 단백질정량=16,32,1
자. SDS/polyacrylamide 전기영동=16,32,1
차. 단백질 염색=16,32,2
카. TK 단백질의 Western 분석=17,33,1
타. 대장균내 TK유전자 발현과 TK단백질 분리 정제=17,33,2
파. Thymidine kinase 활성측정=18,34,2
하. TMP kinase 활성측정=19,35,1
갸. 유전자 조작=19,35,1
냐. 바이러스 DNA분리=19,35,1
댜. 유전자의 PCR 증폭=20,36,1
랴. DNA 염기서열 결정=20,36,1
먀. Herpes simplex virus의 DNA 클로닝=20,36,1
뱌. 마우스 조직내 바이러스 유전자 검출=20,36,3
샤. 세포추출물의 이차원 전기영동=22,38,2
야. 바이러스 감염세포내 단백질의 radio-labeling=23,39,1
쟈. TK의 intracellular localization=23,39,2
챠. Herpes simplex virus의 동물피부감염모델=24,40,1
캬. Herpes simplex virus의 mouse비강감염 모델=24,40,1
탸. 마우스의 대뇌감염=24,40,1
제3절 연구결과=25,41,1
1. 시험관체계 연구=25,41,1
가. H5V-1 TK의 효소학적 연구=25,41,1
(1) TK 유전자 발현을 위한 HSV-1 돌연변이 TK 유전자의 클로닝=25,41,1
(2) recTK 단백질의 분리=25,41,4
(3) recTK의 TMPK활성=28,44,3
(4) TK저해제탐색=30,46,7
나. LAT 유전자의 클로닝 및 염기서열 결정=36,52,11
2. 세포체계 연구=47,63,1
가. 세포체계 잠복감염과 재활성 모델구축 및 활용=47,63,1
(1) 마우스 신경세포 배양=47,63,1
(2) PC-12 세포 배양=47,63,1
(3) 신경세포의 바이러스 잠복감염 유도 및 확인=47,63,8
(4) 잠복감염된 신경세포로부터 재활성 유도 및 확인=55,71,5
나. TK와 세포내 물질의 상호작용 연구=60,76,1
(1) HSV TK 단백질의 세포내 존재 위치=60,76,1
(2) HSV감염 후 세포내 TK의 발현조사=60,76,1
(3) 세포 추출물의 2D 전기영동=60,76,6
(4) 세포내 thymidine 및 유도체 분석=65,81,9
3. 동물체계 연구=74,90,1
가. 마우스 감염조직의 바이러스 역가=74,90,5
4. 결론=79,95,3
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도=82,98,1
(1) 연구개발의 최종목표=82,98,1
(2) 연차별 연구개발 목표 및 내용=82,98,4
제5장 연구개발결과의 활용계획=86,102,1
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보=87,103,1
제7장 참고문헌=88,104,14
영문목차
[title page etc.]=0,1,8
CONTENTS=vii,9,8
Chapter 1. Summary=1,17,1
Section 1. Objectives of the studies=1,17,1
Section 2. Necessity of the studies=1,17,2
Section 3. The scope of the studies=2,18,2
Chapter 2. States of Technical Developments=4,20,6
Chapter 3. Contents and Results of the Studies=10,26,1
Section 1. Contents of the studies=10,26,1
1. Studies in test tube=10,26,1
A. Enzymatic studies on HSV-1 TK=10,26,1
(1) Cloning of the HSV-1 TK genes for gene expression=10,26,1
(2) Isolation and purification of the recTK protein=10,26,1
(3) TMPK activity=10,26,1
(4) Search for TK inhibitors=10,26,1
B. Cloning and sequence analysis of the LAT gene=10,26,1
2. Cell-based studies=10,26,1
A. Establishement of latency and reactivation model of HSV-1 in cell culture system=11,27,1
(1) Mouse primary neuronal cell culture=11,27,1
(2) PC-12 cell culture=11,27,1
(3) Induction and confirmation of viral latency in neuronal cell culture=11,27,1
(4) Induction and reactivation of reaction from latently infected neuronal cells=11,27,1
B. Interaction of TK with cellular materials=11,27,2
(1) Expression of the TK gene in HSV-1-infected cells=12,28,1
(2) 2D gel electrophoresis of cell lysates=12,28,1
(3) Quantification of thymdine and it's metabolites in cells=12,28,1
(4) Cell tropism of HSV-1=12,28,1
3. Animal study=12,28,1
Section 2. Materials and Methods=12,28,1
1. Materials=12,28,1
A. Cells=12,28,1
B. Viruses=12,28,1
C. Bacteria=12,28,2
D. Animals=13,29,1
E. plasmid DNAs=13,29,1
F. Test reagents=13,29,1
2. Methods=13,29,1
A. Culture of cell lines=13,29,1
B. Primary culture of mouse neuronal cells=14,30,1
C. Virus amplification=14,30,1
D. Virus titration=14,30,1
E. Antiviral evaluation=14,30,2
F. Cytotoxicity assay=15,31,1
G. MTT assay=15,31,2
H. Protein assay=16,32,1
I. SDS/ polyacrylamide gel electrophoresis=16,32,1
J. Protein staining=16,32,2
K. Western analysis=17,33,1
L. Expression of the TK gene in E. coli and purification of the TK proteins=17,33,2
M. Assay for TK activity=18,34,2
N. Assay for TMPK activity=19,35,1
O. Gene manipulation=19,35,1
P. Isolation of the viral DNAs=19,35,1
Q. PCR amplification of DNAs=20,36,1
R. Analysis of DNA sequences=20,36,1
S. Cloning of the HSV-1 viral genes=20,36,1
T. Detection of the viral genes in tissues from the virus-infected mice=20,36,2
U. 2D gel electrophoresis=22,38,2
V. Radiolabeling of proteins in the virus-infected cells=23,39,1
W. TK의 intracellular localization=23,39,2
X. Mouse cutaneous infection model for HSV-1=24,40,1
Y. Mouse intranasal infection model for HSV-1=24,40,1
Z. ouse intracerebral infection model for HSV-1=24,40,1
Section 3. Results=25,41,1
1. Stuides in test tube=25,41,1
A. Enzymatic studies on HSV-1 TK=25,41,1
(A) Cloning of the HSV-1 TK genes for gene expresstion=25,41,1
(B) Isolation and purification of the recTK protein=25,41,4
(C) TMPK activity=28,44,3
(D) Search for TK inhibitors=30,46,7
B. Cloning and sequence analysis of the LAT gene=36,52,11
2. Cell-based studies=47,63,1
A. Establishement of latency and reactivation model of HSV-1 in cell culture system=47,63,1
(A) Mouse primary neuronal cell culture=47,63,1
(B) PC-12 cell culture=47,63,1
(C) Induction and confirmation of viral latency in neuronal cell culture=47,63,8
(D) Induction and reactivation of reaction froln latently infected neronal cells=55,71,5
B. Interaction of TK with cellular materiats=60,76,1
(A) Localization of the TK protiens in HSV-1 infected cells=60,76,1
(B) Expression of the TK gene in HSV-1-iHected cells=60,76,1
(C) 2D gel electrophoresis of cell lysates=60,76,6
(D) Quantification of thymdine and it's metabolites in cells=65,81,9
3. Animal study=74,90,1
A. Virus titers of the tissues of HSV-1 infected mice=74,90,8
Chapter 4. Achievement and contribution=82,98,1
Section 1. Achievement=82,98,1
Section 2. Contribution=82,98,4
Chapter 5. Future plans=86,102,1
Chapter 6. Foreign information in science and technology received through the studies=87,103,1
Chapter 7. References=88,104,14
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