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목차

표제지=0,1,1

제출문=1,2,1

요약문=2,3,12

Summary=14,15,6

CONTENTS=20,21,7

목차=27,28,14

제1장 식물면역활성제를 이용한 기능성 콩나물의 재배=41,42,1

제1절 재료 및 방법=41,42,1

1. 실험재료 및 제조=41,42,1

가. 콩=41,42,1

나. Chitosan 용액 제조=41,42,1

다. β-glucan 용액 제조=41,42,2

라. Oligogalacturonide 제조=43,44,1

2. 실험방법=43,44,1

가. Isoflavone 분석=43,44,1

1) glycoside 추출액의 제조=43,44,1

2) aglycone=43,44,1

3) HPLC 분석과 flavonoid 정량=43,44,1

4) 콩나물 재배 조건=44,45,1

나. 다른 기능성 물질의 분석=44,45,1

1) 총 페놀 화합물 측정=44,45,1

2) 전자공여능에 의한 항산화측정=44,45,1

3) 아질산염 소거작용의 측정=45,46,1

4) 사포닌함량 측정=46,47,1

가) Crude glucoside mixture 추출=46,47,1

나) Lieberman-Burchurd 정색반응을 통한 사포닌 분석=46,47,1

다) Saponin의 HPLC 분석=46,47,1

다. β-glucan의 분석=47,48,1

1) Anthrone assay에 의한 β-glucan의 정량=47,48,1

2) β-glucan의 soybean cotyledon elicitor bio-assay=47,48,1

3) 일반성분 분석=47,48,1

4) 당분석=47,48,1

5) Gel-filtration Chromatography에 의한 분자량 측정=47,48,2

라. 병원균 감염에 의한 저항성 비교=48,49,1

1) 사용 균주=48,49,1

2) 배지조성=48,49,1

3) 병원균의 배양=48,49,1

4) Infection 조건=48,49,1

마. 콩나물에 존재하는 여러 방어물질 조사=49,50,1

1) 콩나물 조효소액 조제=49,50,1

2) Protease inhibitor activity 측정=49,50,1

3) β-1.3 glucanase activity 측정=49,50,1

4) Phenylalanine ammonia-lyase activity 측정=49,50,1

5) Total phenolic compound 측정=50,51,1

바. 콩나물 수확 후 유통기간에 미치는 elicitor의 효과=50,51,1

1) 부패율 측정=50,51,2

2) Chlorophyll 함량 측정=51,52,1

3) 색도 측정=52,53,1

4) 총균수 측정=52,53,1

사. 콩나물의 생장 특성 관찰=52,53,1

1) 콩나물 줄기의 길이 측정=52,53,1

2) 콩나물 줄기의 굵기 측정=52,53,1

3) 콩나물의 발아율 조사=53,54,1

4) 콩나물의 수율조사=53,54,1

5) 관능검사=53,54,1

제2절 결과 및 고찰=53,54,1

1. β-glucan의 최적 추출 조건=53,54,1

가. 추출시간에 따른 조건=53,54,2

나. 추출농도에 따른 조건=54,55,1

다. 산 종류에 따른 β-glucan의 함량 조사=54,55,2

라. Cotyledon assay를 통한 β-glucan의 활성 측정=55,56,1

마. 제조한 β-glucan의 일반성분=55,56,1

바. 제조한 β-glucan의 분자량=55,56,7

2. 처리 elicitor 종류에 따른 콩나물의 isoflavonoid 함량 변화조사=61,62,1

가. β-glucan을 처리하였을 때 isoflavone 함량 변화=62,63,1

나. Chitosan을 처리하였을 때 isoflavone 함량 변화=63,64,1

1) Chitosan 농도별 처리에 따른 효과=63,64,2

2) Chitosan 분자량 변화에 따른 효과=65,66,1

3) 수용성 chitosan 분자량 변화에 따른 효과=65,66,2

다. Oligogalacturonide를 처리했을 때 isoflavone 함량변화=67,68,1

3. 콩나물 재배시 elicitor 처리에 따른 생장특성과 기능성 성분함량 변화=68,69,1

가. 콩나물의 생장특성=68,69,1

1) 발아율=68,69,1

2) 콩나물의 길이 및 굵기 측정=69,70,2

나. 다양한 식물면역활성제 처리에 따른 isoflavone 함량=71,72,1

1) Elicitor 처리한 콩나물의 glycoside 함량=71,72,1

2) Elicitor 처리한 콩나물의 aglycone 함량=72,73,1

3) Phytoalexin 함량 변화 조사=72,73,2

다. 다른 기능성 성분의 분석=73,74,1

1) 총 페놀성 화합물의 측정=73,74,2

2) 항산화효과 측정=74,75,2

3) 아질산염 소거능=75,76,2

4) 사포닌 함량=76,77,1

가) 키토산 처리 농도에 따른 조 사포닌 함량=77,78,2

나) β-glucan 처리 농도에 따른 사포닌 함량=78,79,2

다) Oligogalacturonide 처리 농도에 따른 사포닌 함량=79,80,2

4. 콩나물 수확 후 유통기간에 미치는 식물면역활성제의 효과=80,81,1

가. 콩나물 유통기간 동안의 미생물 수의 변화=80,81,2

나. 부패율 측정=81,82,2

다. Elicitor 처리에 따른 기능성 성분의 변화=82,83,1

1) Isoflavone 함량변화=82,83,2

2) Total phenolic compound 변화=84,85,2

3) DPPH에 의한 전자공여능(항산화능)변화=86,87,2

4) Chlorophyll 함량과 색도 변화=88,89,3

5. 콩나물 재배 시 elicitor처리에 따른 병원균감염에 의한 저항성 비교=90,91,1

가. 박테리아,곰팡이 병원균에 대한 저항성 증가 효과=90,91,3

나. 콩나물에 존재하는 여러 방어단백질 발현 조사=92,93,1

1) β-1,3-glucanase activity 변화=92,93,1

2) Protease inhibitor activity 변화=93,94,1

3) Phenylalanine ammonia-lyase activity(PAL)변화=93,94,1

4) Total phenolic compounds의 분석=93,94,5

6. 콩나물 공장에서의 실증 실험=97,98,1

가. 수율=98,99,1

나. 발아율=98,99,1

다. Isoflavonoid 함량에 미치는 효과=98,99,1

라. 관능 평가=99,100,5

제2장 기능성콩나물의 3개월 연속 투여에 따른 안전성 평가=104,105,1

제1절 연구목적=104,105,1

제2절 재료 및 방법=104,105,1

1. 시험물질=104,105,2

2. 시험동물 및 동물사육조건=105,106,1

3. 관찰항목=106,107,1

가. 임상증상 및 체중 측정=106,107,1

나. 사료섭취량 및 음수량=106,107,1

다. 혈액학적 검사=106,107,1

라. 혈청생화학적 검사=106,107,1

마. 장기중량=107,108,1

바. 병리조직학적 검사=107,108,1

4. 통계학적 분석=107,108,1

제3절 결과=107,108,1

1. 사망동물 및 임상증상의 관찰=107,108,1

2. 체중변화=107,108,1

3. 사료소비량의 변화=108,109,1

4. 음수량에 미치는 영향=108,109,1

5. 혈액학적 검사=108,109,1

6. 혈청생화학적 검사=108,109,1

7. 장기중량측정=108,109,1

8. 육안적 병변=108,109,1

9. 병리조직학적 소견=109,110,1

제4절 결론=109,110,15

제3장 식물면역활성제(Elicitor)를 이용한 기능성 콩 재배기술 개발=124,125,1

제1절 연구목적=124,125,1

제2절 재료 및 방법=125,126,1

1. 시험재료=125,126,1

2. 발아 및 유묘생장 시험=125,126,2

3. 시험 및 재배방법=126,127,1

4. Elicitor 처리방법=126,127,1

5. 한발 처리 및 전착제 혼합처리 시험=126,127,2

6. 생육 및 수량조사=127,128,1

7. 이소플라보노이드(isoflavonoid)함량분석=127,128,2

8. 병저항성 조사=128,129,1

제3절 결과 및 고찰=128,129,1

1. Elicitor 처리에 따른 포장 출아율 및 유묘생장의 차이=128,129,7

2. Elicitor 종류 및 처리방법에 따른 콩 생육특성 변화=135,136,8

3. Elicitor 처리에 따른 콩 종실 함유 isoflavonoid 함량 변화=142,143,8

4. 한발스트레스하에서 elicitor의 효과=149,150,4

5. 전착제 혼용시 elicitor의 효과=152,153,4

6. Elicitor 처리에 따른 병 저항성 조사=156,157,16

영문목차

[title page etc.]=0,1,2

Summary=2,3,18

CONTENTS=20,21,21

Chapter 1. Development of cultivation method for high puality soybean sprout using elicitors=41,42,1

Section 1. Meterials & Methods=41,42,1

1. Material and prepartation=41,42,1

a. Soybean=41,42,1

b. Preparation of chitosan solution=41,42,1

c. Preparation of β-glucan=41,42,2

d. Preparation of oligogalacturonid=43,44,1

2. Methods=43,44,1

A. Isoflavone analysis=43,44,1

1) Extrction of hlycosides=43,44,1

2) Aglycone=43,44,1

3) Determination of flavonoid contents=43,44,1

4) Cultivation conditions of soybean sprout=44,45,1

B. Analysis of other functional substances=44,45,1

1) Determination of total phenolic compounds=44,45,1

2) Antioxidantive activities based on electron-donating ability=44,45,1

3) Determination of nitrite-scavenging activity=45,46,1

4) Saponin=46,47,1

a) Extraction of crude glucoside mixture=46,47,1

b) Analysis of saponin using Lieberman-Burchurd colorimeteric assay=46,47,1

c) HPLC analysis=46,47,1

C. β-glucan analysis=47,48,1

1) Determination of β-glucan using anthrone=47,48,1

2) soybean cotyledon elicitor bio-assay=47,48,1

3) Analysis of general compounds=47,48,1

4) Sugar analysis=47,48,1

5) Molecular weight determination using Gel-filtration Chromatography=47,48,2

D. artificial infection using plant pathogens=48,49,1

1) Pathogens=48,49,1

2) Media=48,49,1

3) Cultivation of pathogens=48,49,1

4) Infection=48,49,2

E. Defence - related substances=49,50,1

1) Preparation of crude proteins=49,50,1

2) Protease inhibitor activity=49,50,1

3) β-1,3 glucanase activity=49,50,1

4) Phenylalanine ammonia-lyase activity=49,50,1

5) Total phenolic compounds=50,51,1

F. Effects of elicitor treatments on shelf-life of soybean sprout=50,51,1

1) Decay rate=50,51,2

2) Chlorophyll content=51,52,1

3) Colorimetric analysis=52,53,1

4) Determination of total microorganisms=52,53,1

G. Growth characteristics of soybean sprout=52,53,1

1) Stem length=52,53,1

2) Stem diameter=52,53,1

3) Germination rate=53,54,1

4) Yield=53,54,1

5) Sensory evaluation=53,54,1

Section 2. Results & Discusion=53,54,1

1. Extraction of β-glucan=53,54,1

a. Extraction time=53,54,2

b. Effect of acid concentration=54,55,1

c. Effect of acid type=54,55,2

d. Cotyledon assay for elicitor activity determination=55,56,1

e. General component analysis=55,56,1

f. determination of molecular weight=55,56,7

2. Effect of various elicitors on isoflavonoid contents of soybean sprout=61,62,1

a. Effect of β-glucan=62,63,1

b. Effect of chitosan=63,64,1

1) Effect of concentration=63,64,2

2) Effect of molecular weight=65,66,1

3) Effect of water-soluble chitosan=65,66,2

c. Effect of oligogalacturonidec=67,68,1

3. effect of elicitors on growth characteristics and functional substances=68,69,1

A. Growth characteristics=68,69,1

1) Germination rate=68,69,1

2) Stem length and diameter=69,70,2

B. Various elicitors and isoflavonoid content=71,72,1

1) glycoside content=71,72,1

2) Aglycone content=72,73,1

3) Phytoalexin content=72,73,2

C. Analysis of other funtional substances=73,74,1

1) Total phenolic content=73,74,2

2) Antioxidative activity=74,75,2

3) Nitrite-scavenging activity=75,76,2

4) Saponin content=76,77,5

4. Effect of elicitors on shelf-life of soybean sprout=80,81,1

A. Change of tatal microorganism number=80,81,2

B. Decay rate=81,82,2

C. Changes of functional substances=82,83,1

1) Isoflavone=82,83,2

2) Total phenolic compounds=84,85,2

3) Antioxidative activity=86,87,2

4) Chlorophyll content=88,89,3

5. Analysis of resistance against phytopathogens using artificial infection=90,91,1

A. Enhanced resistance against phytopathogens=90,91,3

B. Defence-related substances=92,93,1

1) β-1.3-glucanase activity=92,93,1

2) Protease inhibitor activity=93,94,1

3) Phenylalanine ammonia-lyase activity (PAL)=93,94,1

4) Total phenolic compounds=93,94,5

6. Experiments in soybean sprout company=97,98,1

a. Yield=98,99,1

b. Germination rate=98,99,1

c. Isoflavonoid content=98,99,1

d. Sensory evaluation=99,100,5

Chapter 2. Safety evaluation of functional soybean sprout using rat=104,105,1

Section 1. Purpose=104,105,1

Section 2. Materials & Methods=104,105,1

1. Materials=104,105,2

2. Animals and growing conditions=105,106,1

3. Observation and Analysis=106,107,1

a. Clinical diagnosis and body weight=106,107,1

b. Feed intake and water consumption=106,107,1

c. Blood analysis=106,107,1

d. Biochemical analysis of serum=106,107,1

e. Internal organ weight analysis=107,108,1

f. Pathological and histological analysis=107,108,1

4. Statistical analysis=107,108,1

Section 3. Results=107,108,1

1. Dead animals and clinical diagnosis=107,108,1

2. Body weight=107,108,1

3. Feed consumption=108,109,1

4. Water consumption=108,109,1

5. Blood analysis=108,109,1

6. Biochemical analysis of serum=108,109,1

7. Internal organ weight analysis=108,109,1

8. Eye observation=108,109,1

9. Pathological and histological analysis=109,110,1

Section 4. Concluding remarks=109,110,15

Chapter 3. Development of cultivation techniques to produce soybean=124,125,1

Section 1. Purpose=124,125,1

Section 2. Materials & Methods=125,126,1

1. Materials=125,126,1

2. Germinations and seedling growth characteristics=125,126,2

3. Cultivation=126,127,1

4. Elicitor treatment=126,127,1

5. Application of draught and detergent=126,127,2

6. Growth and yield=127,128,1

7. Isoflavonoid content=127,128,2

8. Infection=128,129,1

Section 3. Results and discussion=128,129,1

1. germination and seedling growth characteristics=128,129,7

2. Effect of elicitor type and treatment methods on soybean growth characteristics=135,136,8

3. Isoflavonoid content=142,143,8

4. Effect of elicitors under draught condition=149,150,4

5. Effect of detergents=152,153,4

6. Effect of elicitors on resistance against phytopathogens=156,157,16

칼라목차

jpg

Fig. 8. Elicitation activities of β-glucans prepared from yeast with HCI or TFA Elicitation activiy was determined using soybean cotybean cotyledon assay.=157,158,1

Fig. 33. Soybean sprouts incubate for 72 hours at temperature after infection with a fungal pathogen P. sojae=158,159,1

Fig. 34. Soybean sprouts incubate for 72 hrs at temperature after infection with a bacterial pathogen B. subtilis=158,159,1

Fig. 35. Soybean sprouts incubate for 72 hrs at room temperature after infection with a bacterial pathogen B. coagulans.=159,160,1

Fig. 40. Soybean sprouts incubate with elicitors during cultivation in large scale at a soybean sprout company.=160,161,1

Lung(100x)=161,162,1

Kidney(100x)=161,162,1

Liver(100x)=162,163,1

Heart=162,163,1

Brain(100x)=163,164,1

Adrenal gland(100x)=163,164,1

Spleen(100x)=164,165,1

Thymus(100x)=164,165,1

Fig. 50. Representative histological sections of control male rats (in the order of lung,kidney,liver,heart,brain (cerebrum),adrenal gland,spleen,thymus and testis).=165,166,1

Lung(100x)=166,167,1

Kidney(100x)=166,167,1

Liver(100x)=167,168,1

Heart(100x)=167,168,1

Brain(100x)=168,169,1

Adrenal gland(100x)=168,169,1

Spleen(100x)=169,170,1

Thymus(100x)=169,170,1

Fig. 51. Representative histological sections of 10%-sprout treated male rats (in the order of lung,kidney,liver,heart,brain(cerebrem),adrenal gland,spleen,thymus and testis).=170,171,1

Fig. 52. Photograph of soybean treated with chitosan after cultivation for 4 days.=171,172,1

Fig. 60. soybean leaves incubated for 7 days at room temperature after infection with a bacterial pathogen Xanthomonas campestris.=171,172,1